Microbiological analysis. The samples were allowed to
melt at 5o
C under aseptic condition, after which they were
used for the analysis. The total colony count was done by
pour plate method using nutrient agar (Lateef, 2004; Lateef
et al., 2005). The ice water samples were serially diluted
using sterile distilled water, and 0.2 ml of appropriate
dilution was used to inoculate the plate in duplicate. The
plates were incubated at 37o
C for 24 h, after which the total
colony count was determined. Distinct colonies based on
colonial morphology were purified to obtain pure cultures
that were subjected to routine primary and biochemical tests.
The isolates were identified according to the scheme of
Buchanan and Gibbons (1974). The three-tube procedure
using lactose broth (Hammad and Dirar, 1982; Fawole et al,
2002; Bakare et al., 2003) was used to detect the coliform
and determine the most probable number (MPN) of
coliform bacilli using McCrady table. A 0.1 ml, 1 ml, and
10 ml of each sample were used to inoculate the lactose
broth in five replicates. Tubes were incubated at 37o
C for
48 h and the MPN was determined in accordance with
standard method (APHA, 1985). For the detection of fecal
coliform bacteria, production of acid and gas was taken as
positive indication (D’Auriac et al., 2000).
Antibiotic sensitivity test. The bacterial isolates were
tested for their sensitivity to antibiotics by means of M2-A6
disc diffusion method recommended by the National
Committee for Clinical Laboratory Standards, NCCLS
(NCCLS 1997) using nutrient agar. The commercial discs
used contained the following: Gentamicin (Gen) 10 µg;
Tetracycline (Tet), 30 µg; Cotrimoxazole (Cot), 25 µg;
Nalidix acid (Nal), 30 µg; Ampicillin (Amp), 25 µg;
Cefotaxine (Cro), 30 µg; Ofloxacin (Ofl), 10 µg;
Cephalexin (Crl), 30 µg; and Erythromycin (Ery), 5 µg. The
plates were incubated at 37o
C for 24 h, after which the
zones of inhibition were examined and interpreted
accordingly (Chortyk et al., 1993) considering the
appropriate breakpoints (Andrews, 2005). Earlier, the
potencies of all the antibiotics used in the study were
confirmed using susceptible E. coli strains.
การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา ตัวอย่างที่ได้รับอนุญาตให้ละลายที่ 5oC ภายใต้สภาพปลอดเชื้อ หลังจากที่พวกเขาได้ใช้สำหรับการวิเคราะห์ ทำโดยการนับจำนวนโคโลนีทั้งหมดเทแผ่นวิธีการใช้สารอาหารวุ้น (ลา 2004 ลาet al. 2005) Serially ถูกเจือจางตัวอย่างน้ำแข็งใช้ฆ่าเชื้อกลั่นน้ำ และ 0.2 ml เหมาะสมใช้เจือจางฉีดยาป้องกันแผ่นสำเนา การแผ่นได้รับการกกที่ 37oC ใน 24 ชม หลังจากที่ทั้งหมดจำนวนโคโลนีที่ถูกกำหนด อิงจากอาณานิคมที่แตกต่างกันสัณฐานวิทยาโคโลเนียลได้บริสุทธิ์รับวัฒนธรรมบริสุทธิ์ที่ถูกต้องเพื่อการทดสอบทางชีวเคมี และหลักตามปกติการแยกระบุตามแบบแผนของBuchanan ทำยอดและชะนี (1974) ขั้นตอนสามหลอดใช้น้ำซุปแล็กโทส (Hammad และ Dirar, 1982 Fawole et al2002 Bakare et al. 2003) ใช้ในการตรวจหาโคลิฟอร์มและกำหนดหมายเลขที่มากที่สุดน่าเป็น (MPN) ของโคลิฟอร์มหนาที่ใช้ตาราง McCrady 0.1 ml, 1 ml และ10 ml ของแต่ละอย่างใช้ปลูกฝีแล็กโทสน้ำซุปในห้า replicates หลอดได้รับการกกที่ 37oC สำหรับ48 ชั่วโมงและ MPN ที่กำหนดตามวิธีมาตรฐาน (APHA, 1985) สำหรับการตรวจสอบของอุจจาระโคลิฟอร์มแบคทีเรีย ถ่ายเป็นผลิตกรดและก๊าซค่าบวกบ่งชี้ (D'Auriac et al. 2000)การทดสอบความไวต่อยาปฏิชีวนะ แยกเชื้อแบคทีเรียได้ผ่านทดสอบความไวต่อยาปฏิชีวนะ โดย M2 A6วิธีแพร่ดิสก์ที่แนะนำ โดยชาติคณะกรรมการมาตรฐานห้องปฏิบัติการทางคลินิก NCCLS(NCCLS 1997) โดยใช้สารอาหารวุ้น แผ่นดิสก์การพาณิชย์ใช้อยู่ต่อไปนี้: Gentamicin (Gen) 10 µgเตตราไซคลีน (Tet), 30 µg Cotrimoxazole (เปล), 25 µgกรด Nalidix (Nal), 30 µg โกคอ (แอมป์), 25 µgCefotaxine (โครสปลิต), 30 µg Ofloxacin (Ofl), 10 µgCephalexin (Crl), 30 µg และร่าง (Ery), 5 µg. ของแผ่นได้รับการกกที่ 37oC ใน 24 ชม หลังจากโซนของการยับยั้งการถูกตรวจสอบ และตีความตามลำดับ (Chortyk et al. 1993) พิจารณาการจุดพักที่เหมาะสม (แอนดรูวส์ 2005) ก่อนหน้านี้ การถูกกัน potencies ยาปฏิชีวนะทั้งหมดที่ใช้ในการศึกษายืนยันโดยใช้สายพันธุ์ของ E. coli ที่ไวต่อ
การแปล กรุณารอสักครู่..

การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา กลุ่มตัวอย่างที่ได้รับอนุญาตให้
ละลายที่ 5o
C ภายใต้สภาวะปลอดเชื้อหลังจากที่พวกเขาถูก
นำมาใช้ในการวิเคราะห์ นับอาณานิคมทั้งหมดทำโดย
เทแผ่นวิธีการใช้สารอาหารวุ้น (Lateef 2004; Lateef
. et al, 2005) กลุ่มตัวอย่างน้ำแข็งน้ำเจือจางลำดับ
โดยใช้น้ำกลั่นปลอดเชื้อและ 0.2 มิลลิลิตรเหมาะสม
เจือจางถูกใช้ในการฉีดวัคซีนในจานที่ซ้ำกัน
แผ่นถูกบ่มที่ 37o
เซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงหลังจากที่รวม
นับอาณานิคมถูกกำหนด อาณานิคมที่แตกต่างกันขึ้นอยู่กับ
ลักษณะทางสัณฐานวิทยาอาณานิคมบริสุทธิ์ที่จะได้รับเชื้อบริสุทธิ์
ที่ถูกยัดเยียดให้ทดสอบหลักและชีวเคมีประจำ.
สายพันธุ์ที่ถูกระบุตามโครงการของ
บูคานันและกิบบอนส์ (1974) ขั้นตอนที่สามหลอด
โดยใช้น้ำซุปแลคโตส (Hammad และ Dirar 1982; Fawole, et al,
2002;. Bakare, et al, 2003) ถูกนำมาใช้ในการตรวจสอบโคลิฟอร์ม
และตรวจสอบหมายเลขน่าจะเป็นที่สุด (MPN) ของ
แบคทีเรียโคลิฟอร์มใช้ตาราง McCrady 0.1 มล. 1 มล. และ
10 มล. ของแต่ละกลุ่มตัวอย่างที่ใช้ในการฉีดวัคซีนแล็กโทสที่
น้ำซุปในห้าซ้ำ ท่อถูกบ่มที่ 37o
เซลเซียสเป็นเวลา
48 ชั่วโมงและ MPN ถูกกำหนดให้เป็นไปตาม
วิธีการมาตรฐาน (APHA, 1985) สำหรับการตรวจสอบของอุจจาระ
โคลิฟอร์มแบคทีเรียผลิตกรดและก๊าซถูกนำมาเป็น
ข้อบ่งชี้ในเชิงบวก (D'Auriac et al., 2000).
การทดสอบความไวของยาปฏิชีวนะ แบคทีเรียได้รับ
การทดสอบความไวต่อยาปฏิชีวนะของพวกเขาโดยใช้วิธีการ M2-A6
วิธีการแพร่กระจายแผ่นดิสก์ที่แนะนำโดยแห่งชาติ
คณะกรรมการรับรองมาตรฐานห้องปฏิบัติการทางคลินิก, NCCLS ได้เปลี่ยนชื่อ
(NCCLS ได้เปลี่ยนชื่อ 1997) โดยใช้อาหารเลี้ยงเชื้อ แผ่นเชิงพาณิชย์
ที่ใช้มีดังต่อไปนี้: Gentamicin (Gen) 10 g;
Tetracycline (Tet) 30 ไมโครกรัม; cotrimoxazole (Cot) 25 ไมโครกรัม;
Nalidix Acid (เอ็น) 30 ไมโครกรัม; ampicillin (แอมป์) 25 ไมโครกรัม;
Cefotaxine (CRO) 30 ไมโครกรัม; Ofloxacin (OFL), 10 ไมโครกรัม;
cephalexin (Crl) 30 ไมโครกรัม; และ Erythromycin (ery) 5 ไมโครกรัม
แผ่นถูกบ่มที่ 37o
เซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงหลังจากที่
โซนของการยับยั้งการถูกตรวจสอบและตีความ
ตาม (Chortyk et al., 1993) การพิจารณา
จุดพักที่เหมาะสม (แอนดรู 2005) ก่อนหน้านี้
potencies ของยาปฏิชีวนะทั้งหมดที่ใช้ในการศึกษาได้รับการ
ยืนยันโดยใช้ไวต่ออีโคไลสายพันธุ์
การแปล กรุณารอสักครู่..

การวิเคราะห์ทางจุลชีววิทยา . ตัวอย่างที่ได้รับอนุญาตละลายที่ 5oC ภายใต้สภาพปลอดเชื้อ หลังจากที่พวกเขาใช้สำหรับการวิเคราะห์ นับโคโลนีทั้งหมดเสร็จสิ้นแล้วเทใส่จานใช้วิธี NUMB3RS ( ลาทีฟ , 2004 ; ลาทีฟet al . , 2005 ) น้ำแข็งน้ำจำนวนเป็นเจือจางการฆ่าเชื้อน้ำและ 0.2 มิลลิลิตร ที่เหมาะสม( ใช้แก่ จานที่ซ้ำกัน ที่อุณหภูมิ 37o จานองศาเซลเซียส เป็นเวลา 24 ชั่วโมง หลังจากที่ทั้งหมดรัฐอิสราเอลถูกกำหนดไว้ อาณานิคมบนพื้นฐานแตกต่างกันสัณฐานวิทยาอาณานิคมมีความบริสุทธิ์ได้รับวัฒนธรรมบริสุทธิ์ที่ถูกขั้นตอนหลักและการทดสอบทางชีวเคมีการแยกกลุ่มตามโครงการของBuchanan และชะนี ( 1974 ) ขั้นตอนที่ 3 หลอดการใช้น้ำและแลคโตส ( hammad dirar , 1982 ; fawole et al ,2002 ; bakare et al . , 2003 ) ถูกใช้เพื่อตรวจหาโคลิฟอร์มและกำหนดหมายเลขที่น่าจะเป็น ( MPN ) ของเชื้อโคลิฟอร์ม โดยใช้ตาราง mccrady . เป็น 0.1 มิลลิลิตร 1 มิลลิลิตร และ10 ml ของแต่ละตัวอย่างถูกใช้ในการฉีดวัคซีนที่ แลคโตสน้ำซุปใน 5 นาที . อุณหภูมิ 37o หลอดC สำหรับ48 ชั่วโมงและเมื่อพิจารณาตามวิธีมาตรฐาน ( apha , 1985 ) การตรวจหาโคลิโคลิฟอร์มแบคทีเรียผลิตกรดและก๊าซถูกจับเป็นสัญญาณบวก ( d'auriac et al . , 2000 )การทดสอบความไวของยาปฏิชีวนะ จากแบคทีเรียไอโซเลทการทดสอบความไวของยาโดยวิธีการของ m2-a6วิธีการกระจายแผ่นแนะนำโดยชาติคณะกรรมการมาตรฐานห้องปฏิบัติการทางคลินิก แบรนด์( แบรนด์ 1997 ) โดยใช้อาหารเลี้ยงเชื้อสารอาหาร แผ่นเชิงพาณิชย์ใช้ที่อยู่ดังต่อไปนี้ : โปงลางสะออน ( gen ) µ 10 g ;เตตร้าไซคลิน ( Tet ) µ 30 g ; โคไตรม็อกซาโซล ( COT ) , 25 µ g ;nalidix acid ( ร ) , µ 30 g ; เมอรีล สตรีป ( แอมป์ ) , 25 µ g ;cefotaxine ( CRO ) µ 30 g ; ออฟลอกซาซิน ( OFL ) µ 10 g ;เซฟาเลกซิน ( CRL ) µ 30 กรัม และอีริโทรมัยซิน ( ธุรกิจ ) , 5 µกรัมอุณหภูมิ 37o จานองศาเซลเซียส เป็นเวลา 24 ชั่วโมง หลังจากที่โซนของการตรวจสอบและตีความคือตาม ( chortyk et al . , 1993 ) พิจารณาจุดที่เหมาะสม ( แอนดรู , 2005 ) ก่อนหน้านี้potencies ของยาปฏิชีวนะที่ใช้ในการศึกษาคือการยืนยันใช้เสี่ยงเชื้ออีโคไลสายพันธุ์
การแปล กรุณารอสักครู่..
