A newly isolated Bacillus subtilis

A newly isolated Bacillus subtilis WY34 produced high level of mannanase (1105 U/ml) when grown on konjac powder as the carbon source at 50 °C. The b-mannanase was purified 5.4-fold to homogeneity with a final recovery of 20.3% and a specificity of 8302.4 U/mg protein. The purified mannanase appeared as a single protein band on SDS–PAGE gel with a molecular mass of approx. 39.6 kDa. It was identified as a glycoprotein by periodic acid-Schiff staining with a carbohydrate content of 13.1%. The first 10 N-terminal amino acid sequence (HTVSPVNPNA) of the purified enzyme showed high homology (90% identity) with the N-terminal region of b-mannanase from B. subtilis NM-39. The optimal temperature and pH for mannanase activity was 65 °C and pH 6.0, respectively. The mannanase activity was stable within pH 5.5–10.1. It was stable up to 60 °C at pH 6.0. The mannanase was highly specific towards locust bean gum, but exhibited very low activity towards starch, CMC and birchwood xylan. Apparent Km values of the mannanase for locust bean gum, guar gum and konjac powder were 7.6, 10.5 and 27.4 mg ml

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โดดเดี่ยวใหม่ wy34 แบคทีเรีย Bacillus subtilis ผลิตระดับสูงของ mannanase (1105 U / ml) เมื่อปลูกในผงบุกเป็นแหล่งคาร์บอนที่ 50 ° C b-mannanase บริสุทธิ์ 5.4 เท่าเป็นเป็นเนื้อเดียวกันกับการกู้คืนสุดท้ายของ 20.3% และความจำเพาะของโปรตีน 8,302.4 U / mg mannanase บริสุทธิ์ดูเหมือนจะเป็นวงดนตรีโปรตีนเดียวบนเจล SDS หน้ากับมวลโมเลกุลประมาณ 39.6 กิโลดาลตันมันถูกระบุว่าเป็นไกลโคโปรตีนโดยการย้อมสีกรดชิฟฟ์เป็นระยะที่มีเนื้อหาคาร์โบไฮเดรตจาก 13.1% แรก 10 ลำดับกรดอะมิโน (htvspvnpna) ของเอนไซม์พบว่าโปรตีนสูง (90% เอกลักษณ์) กับภูมิภาค n-ขั้วของ b-mannanase จาก B subtilis นาโนเมตร-39 อุณหภูมิที่เหมาะสมและ ph สำหรับกิจกรรม mannanase เป็น 65 ° C และ pH 6.0 ตามลำดับกิจกรรม mannanase มีเสถียรภาพภายใน 5.5-10.1 pH มันเป็นมีเสถียรภาพได้ถึง 60 ° C ที่ pH 6.0 mannanase เป็นอย่างสูงที่เฉพาะเจาะจงต่อเหงือกถั่วตั๊กแตน แต่แสดงกิจกรรมที่ต่ำมากต่อแป้ง cmc และ Birchwood ไซแลน ค่าทางเห็นได้ชัดจาก mannanase สำหรับเหงือกถั่วตั๊กแตน, เหงือกกระทิงและผงบุกเป็น 7.6, 10.5 และ 27.4 มก. มล.