The extent of protein nitrosation i

The extent of protein nitrosation in the prepared sausages was
assessed by calculating the average number of 3-NT residues using the
method described by Vossen and De Smet (2015) with some modifications.
Briefly, two grams of sample was added to 20 mL of phosphate
buffer (20 mM, pH 7.0) and homogenized. Aliquot of 0.2 mL homogenates
(20 mg/mL) were treated with 0.4 mL of ice-cold TCA (20%). The
supernatant was discarded after centrifugation (3040 ×g, 10 min,
4 °C). Two milliliters of 6 M guanidine hydrochloride were added to dissolve
the pellets. After addition of 2 mL bicarbonate buffer (0.2 M,
pH 10.5), the sample was centrifuged again at 10,000 ×g for 10 min at
4 °C. The absorbance of supernatant was measured at 430 nm in a 96
well plate using 3-nitro-L-tyrosine as standard. The protein concentration
was measured by a bicinchoninic acid (BCA) protein quantification
assay (Thermo Fisher Scientific, Germany) using bovine serum albumin
(BSA) as standard. Results were expressed as nM of 3-nitrotyrosine per
mg of protein.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ขอบเขตของโปรตีน nitrosation ในไส้กรอกที่เตรียมไว้ได้ประเมิน โดยการคำนวณจำนวนเฉลี่ย 3 NT ตกค้างโดยใช้การวิธีอธิบาย โดย Vossen และเด Smet (2015) ด้วยการปรับเปลี่ยนบางอย่างสั้น ๆ เพิ่มสองกรัมของตัวอย่าง 20 มิลลิลิตรฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (20 มม. ค่า pH 7.0) และ homogenized ส่วนที่ลงตัวของ homogenates 0.2 mL(20 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร) ได้รับการรักษา ด้วย 0.4 mL ของ TCA เย็น (20%) การsupernatant ถูกละทิ้งหลังจากหมุนเหวี่ยง (3040 × g, 10 นาที4 ° C) มิลลิลิตร 2 ของ 6 เมตร guanidine ไฮโดรคลอไรด์เพิ่มการละลายเม็ด จากบัฟเฟอร์ไบคาร์บอเนต 2 มล. (0.2 Mค่า pH 10.5), ตัวอย่างถูกเหวี่ยงอีกครั้งที่ 10,000 × g สำหรับ 10 นาทีที่4 องศาเซลเซียส มีวัด absorbance ของ supernatant ที่ 430 nm ใน 96แผ่นดีที่ใช้ 3-ไนโตร-L-ไทโรซีนเป็นมาตรฐาน ความเข้มข้นของโปรตีนโดยวัดจากด้านใน bicinchoninic กรด (BCA) โปรตีนทดสอบ (เทอร์โม Fisher วิทยาศาสตร์ เยอรมนี) ใช้วัว serum albumin(บีเอสเอ) เป็นมาตรฐาน ผลลัพธ์ที่แสดงเป็น nM ของ 3-nitrotyrosine ต่อมก.โปรตีน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ขอบเขตของการ nitrosation โปรตีนในไส้กรอกเตรียมได้รับการ
ประเมินโดยการคำนวณค่าเฉลี่ยของจำนวน 3 NT ตกค้างโดยใช้
วิธีการอธิบายโดย Vossen และ De Smet (2015) มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง.
สั้น ๆ สองกรัมของกลุ่มตัวอย่างถูกบันทึกอยู่ใน 20 มลของฟอสเฟต
บัฟเฟอร์ (20 มิลลิเมตรมีค่า pH 7.0) และหดหาย aliquot 0.2 มล homogenates
(20 mg / ml) ได้รับการรักษาด้วย 0.4 มล TCA เย็น (20%)
ใสถูกยกเลิกหลังจากการหมุนเหวี่ยง (3040 × G, 10 นาที,
4 ° C) สองมิลลิลิตร 6 M guanidine ไฮโดรคลอไรมีการเพิ่มการละลาย
เม็ด หลังจากที่นอกเหนือจาก 2 มลบัฟเฟอร์ไบคาร์บอเนต (0.2 M,
ค่า pH 10.5) ตัวอย่างที่ถูกปั่นอีกครั้งที่ 10,000 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาทีที่
4 องศาเซลเซียส ค่าการดูดกลืนของสารละลายวัดที่ 430 นาโนเมตร 96
แผ่นเดียวใช้ 3 ตัว Nitro-L-tyrosine เป็นมาตรฐาน ความเข้มข้นของโปรตีน
โดยวัดจากกรด bicinchoninic (BCA) โปรตีนปริมาณ
การทดสอบ (Thermo Fisher Scientific, เยอรมัน) โดยใช้อัลบูมิวัวซีรั่ม
(BSA) เป็นมาตรฐาน ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็นนิวตันเมตร 3 nitrotyrosine ต่อ
มิลลิกรัมโปรตีน