(0.6 ± 0.1) mm3 min1, when the eth

(0.6 ± 0.1) mm3 min1, when the ethanol concentration reached
80 g L1, which was significantly lower than that of
(5.1 ± 0.1) mm3 min1 in R1, where the ethanol concentration was
approximately 60 g L1 (Fig. 7). Since there was no increasing trend
in lactic acid concentration or acetic acid concentration (Fig. 6C),
the decrease in ethanol concentration and yeast cell viability
should not be caused by bacterial contamination. Therefore, it can
be concluded that the yeast cells suffered from considerable stress
at the high ethanol concentration, resulting in a decrease of cell
growth and activity, thereby causing a decrease in ethanol concentration [6].
In order to keep the ethanol concentration in R2 at approximately 80 g L1, a third reactor was used to produce fresh yeast
cells, and the fresh yeast cells were continuously fed into R2 to
replenish viable cells and enhance the activity. In our previous
study, it had been proven that the sugar concentration between
80 g L1 and 100 g L1 resulted in the highest cells activity at 30
C
[23]. In this study, sugar concentration of 90 g L1 was fed into R3,
and the cultivation was carried out at 30
C. Ethanol concentration
in R3 was (37.1 ± 2.2) g L1 (Fig. 8A). The yeast number and cell
activity in R3 was (9.8 ± 2.8)  108 cm3 and (9.2 ± 1.0) mm3 min1,
respectively (Figs. 8B and 7). In the continuous ethanol fermentation at 30
C, the decreasing trend in ethanol concentration and
yeast cell viability disappeared (Fig. 8A and B) by feeding the fresh
yeast cells from R3 into R2. The yeast cell viability stabilized at 60%
to 70 %, and the number of viable yeast was (1.7 ± 0.4)  109 cm3
(Fig. 8B). Moreover, the cell activity was (3.8 ± 1.0) mm3 min1,
which was markedly higher than the activity without a fresh feed
(Fig. 7). The ethanol concentration in R2 was (80.1 ± 1.8) g L1
(Fig. 8A), corresponding to ethanol yield of 82.5% and productivity
of 8.8 g L1 h1. The concentration of VFA in each reactor was
relatively constant and at low level, indicating that no bacterial
contamination occurred (Fig. 8C).
Subsequently, the effect of temperature was investigated in the
continuous ethanol fermentation of thick juice. The temperature of
R3 was controlled at 30
C, while the temperatures of R1 and R2
were increased from 30
C to 35
C. As shown in Table 2, the difference of ethanol concentration in R1 was not significant when the
temperature increased from 30
C to 35
C (P ¼ 0.057). The ethanol
concentration in R2 at 33
C was not significantly different from
that at 30
C (P ¼ 0.414), while it significantly decreased to
75.2 g L1 at 35
C (P ¼ 0.016). Thus, the temperature in R2 should
be controlled at 33
C.
The continuous ethanol fermentation of thick juice can be performed year-round, due to the excellent storability [24]. Although
raw juice is not suitable for year-round ethanol fermentation due to
0
20
40
60
80
100
0 5 10 15 20 25 30
Yeast number (108 cm–3)
Yeast cell viability (%)
Fermentation time (days)
0
20
40
60
80
100
0 5 10 15 20 25 30
Ethanol concentration (g L–1)
Fermentation time (days)
A
0
1000
2000
3000
4000
5000
0 5 10 15 20 25 30
VFAs concentration (mg L–1)
Fermentation time (days)
C

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

(0.6 ± 0.1) mm3 นาที 1 เมื่อความเข้มข้นเอทานอล80 กรัม L 1 ซึ่งต่ำกว่าที่(5.1 ± 0.1) mm3 นาที 1 ใน R1 ที่มีความเข้มข้นเอทานอลประมาณ 60 กรัม 1 L (Fig. 7) เนื่องจากมีแนวโน้มไม่เพิ่มขึ้นในความเข้มข้นของกรดแลกติกหรือกรดน้ำส้มเข้มข้น (Fig. 6C),ลดลงในเอทานอลความเข้มข้นและยีสต์เซลล์ชีวิตควรไม่เกิดจากการปนเปื้อน ดังนั้น จึงสามารถสรุปได้ว่า เซลล์ยีสต์รับความเดือดร้อนจากความเครียดมากที่ความเข้มข้นเอทานอลสูง เกิดการลดลงของเซลล์เจริญเติบโตและกิจกรรม จึงก่อให้เกิดการลดลงของความเข้มข้นของเอทานอล [6]เพื่อให้ความเข้มข้นเอทานอลใน R2 ที่ประมาณ 80 กรัม L 1 สาม เครื่องปฏิกรณ์ที่ใช้ในการผลิตยีสต์สดเซลล์ และเซลล์ยีสต์สดได้อย่างต่อเนื่องรับ R2 การเติมเซลล์ทำงานได้ และเพิ่มกิจกรรม ในของเราก่อนหน้านี้ศึกษา มันได้รับการพิสูจน์ที่ความเข้มข้นของน้ำตาลระหว่าง80 g L 1 และ L 1 100 กรัมส่งผลให้กิจกรรมเซลล์สูงสุดที่ 30 C[23] . ในการศึกษานี้ น้ำตาลเข้มข้น 90 กรัม L 1 ถูกเลี้ยงใน R3และเพาะปลูกถูกดำเนินการที่ความเข้มข้นของเอทานอล 30 ซีใน R3 ถูก (37.1 ± 2.2) g L 1 (Fig. 8A) จำนวนยีสต์และเซลล์กิจกรรมใน R3 ถูก (9.8 ± 2.8) 108 ซม. 3 และนาที mm3 (9.2 ± 1.0) 1ตามลำดับ (Figs. 8B และ 7) ในการหมักเอทานอลอย่างต่อเนื่องที่ 30 C การลดแนวโน้มในความเข้มข้นของเอทานอล และชีวิตเซลล์ยีสต์หาย (Fig. 8A และ B) โดยให้อาหารสดเซลล์ยีสต์จาก R3 เป็น R2 ชีวิตเซลล์ยีสต์ที่เสถียรที่ 60%70% และจำนวนของยีสต์ทำงานได้ (1.7 ± 0.4) 109 ซม. 3(Fig. 8B) นอกจากนี้ กิจกรรมเซลล์ถูก (3.8 ± 1.0) mm3 นาที 1ซึ่งเป็นอย่างเด่นชัดมากกว่ากิจกรรมไม่มีอาหารสด(Fig. 7) (80.1 ± 1.8) มีความเข้มข้นเอทานอลใน R2 g L 1(Fig. 8A), ที่สอดคล้องกับผลผลิตเอทานอลของ 82.5 อาศานั้น%และผลผลิตของ 8.8 g h L 1 1 มีความเข้มข้นของ VFA ในเครื่องปฏิกรณ์แต่ละค่อนข้างคง และอยู่ ใน ระดับต่ำ เพื่อระบุว่า แบคทีเรียไม่การปนเปื้อนเกิดขึ้น (Fig. 8C)ในเวลาต่อมา มีการตรวจสอบผลของอุณหภูมิในการหมักเอทานอลอย่างต่อเนื่องของน้ำหนา อุณหภูมิของR3 ถูกควบคุม C 30 ในขณะที่อุณหภูมิของ R1 และ R2ได้เพิ่มขึ้นจาก 30 ซีซี 35 ดังแสดงในตารางที่ 2 ความแตกต่างของความเข้มข้นของเอทานอลใน R1 ไม่สำคัญเมื่อการอุณหภูมิเพิ่มขึ้นจาก 30 C ถึง 35 C (P ¼ 0.057) เอทานอลไม่แตกต่างอย่างมากจากความเข้มข้นใน R2 ที่ 33 Cที่ 30 C (P ¼ 0.414), ใน ขณะที่มันลดลงไปมากL 1 g 75.2 ที่ 35 C (P ¼ 0.016) ดังนั้น ใน R2 ควรควบคุมที่ 30 องศาเซลเซียสสามารถทำน้ำหนาหมักเอทานอลอย่างต่อเนื่องตลอดทั้งปี จาก storability แห่ง [24] ถึงแม้ว่าน้ำดิบไม่เหมาะสำหรับการหมักเอทานอลพลังงานเนื่อง0204060801000 5 10 15 20 25 30จำนวนยีสต์ (108 ซม. – 3)ชีวิตเซลล์ยีสต์ (%)เวลาการหมัก (วัน)0204060801000 5 10 15 20 25 30ความเข้มข้นของเอทานอล (L – 1 กรัม)เวลาการหมัก (วัน)A0100020003000400050000 5 10 15 20 25 30ความเข้มข้นของ VFAs (L – 1 มิลลิกรัม)เวลาการหมัก (วัน)C

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

(0.6 ± 0.1) mm3 นาที 1 เมื่อความเข้มข้นของเอทานอลถึง
80 กรัม L? 1 ซึ่งมีนัยสำคัญต่ำกว่า
(5.1 ± 0.1) mm3 นาที 1 ใน R1
ที่ความเข้มข้นของเอทานอลได้ประมาณ60 กรัม L? 1 (รูปที่. 7) เนื่องจากไม่มีแนวโน้มเพิ่มขึ้นในความเข้มข้นของกรดแลคติกหรือความเข้มข้นของกรดอะซิติก (รูป. 6C) การลดลงของความเข้มข้นของเอทานอลและมีชีวิตเซลล์ยีสต์ไม่ควรจะเกิดจากการปนเปื้อนของเชื้อแบคทีเรีย ดังนั้นจึงสามารถสรุปได้ว่าเซลล์ยีสต์ได้รับความเดือดร้อนจากความเครียดมากที่ความเข้มข้นของเอทานอลสูงทำให้เกิดการลดลงของเซลล์เจริญเติบโตและกิจกรรมจึงก่อให้เกิดการลดลงของความเข้มข้นของเอทานอล[6]. เพื่อที่จะให้ความเข้มข้นของเอทานอลใน R2 เมื่อเวลาประมาณ 80 กรัม L? 1, เครื่องปฏิกรณ์ที่สามถูกนำมาใช้ในการผลิตยีสต์สดเซลล์และเซลล์ยีสต์สดได้รับการเลี้ยงดูอย่างต่อเนื่องเข้าสู่R2 เพื่อเติมเต็มเซลล์ที่มีชีวิตและเพิ่มกิจกรรม ก่อนหน้านี้ในการศึกษาจะได้รับการพิสูจน์แล้วว่ามีความเข้มข้นน้ำตาลระหว่าง80 กรัม L 1 และ 100 กรัม L 1 ส่งผลให้กิจกรรมเซลล์สูงสุดที่ 30 องศาเซลเซียส[23] ในการศึกษานี้ความเข้มข้นของน้ำตาล 90 กรัม L 1 ถูกป้อนเข้า R3, และการเพาะปลูกได้ดำเนินการวันที่ 30 องศาเซลเซียส ความเข้มข้นของเอทานอลใน R3 เป็น (37.1 ± 2.2) กรัม L 1 (รูป. 8A) จำนวนเซลล์ยีสต์และกิจกรรมใน R3 เป็น (9.8 ± 2.8) 108 ซม. 3 และ (9.2 ± 1.0) นาที mm3? 1, ตามลำดับ (มะเดื่อ. 8B และ 7) ในลกฮอล์อย่างต่อเนื่องวันที่ 30? C, แนวโน้มลดลงและความเข้มข้นของเอทานอลมีชีวิตเซลล์ยีสต์หายไป(รูป. 8A และ B) โดยการให้อาหารสดเซลล์ยีสต์จากR3 เข้า R2 เซลล์ยีสต์มีชีวิตที่มีความเสถียรที่ 60% ถึง 70% และจำนวนของยีสต์ที่ทำงานได้เป็น (1.7 ± 0.4) 109 ซม. 3 (รูป. 8B) นอกจากนี้การทำงานของเซลล์ได้ (3.8 ± 1.0) mm3 นาที? 1 ซึ่งเป็นที่เห็นได้ชัดที่สูงกว่ากิจกรรมโดยไม่ต้องมีอาหารสด(รูปที่. 7) ความเข้มข้นของเอทานอลใน R2 เป็น (80.1 ± 1.8) กรัม L 1 (รูป. 8A) ที่สอดคล้องกับผลผลิตเอทานอล 82.5% และผลผลิต8.8 กรัม L? 1 ชั่วโมง 1 ความเข้มข้นของ VFA ในแต่ละเครื่องปฏิกรณ์ที่ได้ค่อนข้างคงที่และอยู่ในระดับที่ต่ำแสดงให้เห็นว่าไม่มีเชื้อแบคทีเรียปนเปื้อนที่เกิดขึ้น(รูป. 8C). ต่อมาผลของอุณหภูมิถูกตรวจสอบในการหมักเอทานอลอย่างต่อเนื่องของน้ำผลไม้หนา อุณหภูมิของR3 ถูกควบคุมที่ 30 องศาเซลเซียสในขณะที่อุณหภูมิของ R1 และ R2 เพิ่มขึ้นจากวันที่ 30? C ถึง 35? C ดังแสดงในตารางที่ 2 ความแตกต่างของความเข้มข้นของเอทานอลใน R1 ไม่ได้อย่างมีนัยสำคัญเมื่ออุณหภูมิเพิ่มขึ้นจากวันที่30? C ถึง 35? C (P ¼ 0.057) เอทานอลความเข้มข้นใน R2 ที่ 33 องศาเซลเซียสก็ไม่แตกต่างจากที่วันที่30? C (P ¼ 0.414) ในขณะที่มันมีความหมายลดลง75.2 กรัม L 1 ที่ 35 องศาเซลเซียส (P ¼ 0.016) ดังนั้นอุณหภูมิใน R2 ควรมีการควบคุมที่? 33? C. หมักเอทานอลอย่างต่อเนื่องของน้ำผลไม้หนาสามารถดำเนินการตลอดทั้งปีเนื่องจากการเก็บรักษาที่ดี [24] แม้ว่าน้ำผลไม้ดิบไม่เหมาะสำหรับการหมักเอทานอลตลอดทั้งปีเนื่องจากการ0 20 40 60 80 100 0 5 10 15 20 25 30 จำนวนยีสต์ (108 ซม. 3) มีชีวิตเซลล์ยีสต์ (%) ระยะเวลาการหมัก (วัน) 0 20 40 60 80 100 0 5 10 15 20 25 30 ความเข้มข้นของเอทานอล (ช L-1) เวลาการหมัก (วัน) 0 1000 2000 3000 4000 5000 0 5 10 15 20 25 30 VFAs เข้มข้น (mg L-1) เวลาการหมัก (วัน) C

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

( 0.6 มม. ± 0.1 ) มิน  1 เมื่อเอทานอลความเข้มข้นสูงถึง 80 กรัมต่อลิตร 
1 ซึ่งน้อยกว่าที่ของ
( 5.1 ± 0.1 ) มม. มิน  1 ใน R1 ที่เอทานอลความเข้มข้น
ประมาณ 60 กรัม ผม  1 ( รูปที่ 7 ) ในเมื่อไม่มีแนวโน้มเพิ่มขึ้น
ความเข้มข้นของกรดแลคติกหรือความเข้มข้นของกรดอะซิติก ( รูปที่ 6 ) ,
ลดลงในเอทานอลและ
viability ของเซลล์ยีสต์ไม่ควรเกิดจากการปนเปื้อนแบคทีเรีย ดังนั้นจึงสามารถสรุปได้ว่าเซลล์ยีสต์

ทรมานจากความเครียดมากในเอทานอลสูง เป็นผลในการลดลงของกิจกรรมเซลล์
การเจริญเติบโตและจึงก่อให้เกิดการลดลงของเอทานอลความเข้มข้น [ 6 ] .
เพื่อให้เอทานอลความเข้มข้นใน R2 ประมาณ 80 g l  1เครื่องปฏิกรณ์ที่ 3 ใช้ในการผลิตเซลล์ยีสต์
สด และเซลล์ยีสต์สดอย่างต่อเนื่อง Fed ใน R2

เติมเต็มได้ เซลล์ และเพิ่มกิจกรรม ในการศึกษา
ของเรา มันได้ถูกพิสูจน์แล้วว่าน้ำตาลที่ความเข้มข้นระหว่าง
80 แกรม ฉัน  1 และ 100 กรัม ผม  1 ส่งผลให้เซลล์สูงสุด 30 กิจกรรมที่
C
[ 23 ] ในการศึกษานี้ความเข้มข้นของน้ำตาล 90 กรัม ผม  1 ถูกป้อนลงใน R3
,และการกระทำที่ 30
C เอทานอลความเข้มข้นใน R3
( 37.1 ± 2.2 กรัมต่อลิตร  1 ( รูปที่ 8A ) ยีสต์จำนวนและกิจกรรมของเซลล์ใน R3
( 9.8 ± 2.8 )  108 ซม.  3 ( 9.2 ± 1.0 ) มม. มิน  1
2 ( Figs 8A และ 7 ) ในการหมักเอทานอลแบบต่อเนื่อง 30
C มีแนวโน้มลดลงในเอทานอลและ
viability ของเซลล์ยีสต์หายไป ( ฟิคเอและบี ) โดยการให้อาหารเซลล์ยีสต์สด
จาก R3 เป็นอาร์ทู ยีสต์เซลล์คงที่ที่ 60 %
ถึง 70 % และจำนวนยีสต์ได้เป็น ( 1.7 ± 0.4 )  109 ซม.  3
( รูปที่ใส่ ) นอกจากนี้ เซลล์ activity ( 3.8 ± 1.0 ) มม. มิน  1
ที่เด่นชัดมากกว่ากิจกรรมโดยไม่
ให้อาหารสด ( รูปที่ 7 ) เอทานอลความเข้มข้นใน R2 ( 80.1 ± 1.8 g ) L  1
( รูปที่ 8A )สอดคล้องกับผลผลิตและผลผลิตเอธานอล 82.5 %
ของ 8.8 กรัม ผม  1 H  1 ความเข้มข้นของกรดไขมันระเหยได้ในแต่ละชุดการทดลอง
ค่อนข้างคงที่และอยู่ในระดับที่ต่ำ ที่ระบุว่าไม่มีการปนเปื้อนแบคทีเรีย
เกิดขึ้น ( รูปที่ 8C ) .
ต่อมา , ผลของอุณหภูมิพบว่าใน
อย่างต่อเนื่องศึกษาการหมักเอธานอลของน้ำข้น อุณหภูมิถูกควบคุมไว้ที่ 30

R3 Cขณะที่อุณหภูมิของ R1 R2
และเพิ่มขึ้นจาก 30
C 35
C ดังแสดงใน ตารางที่ 2 ความแตกต่างของความเข้มข้นของเอทานอลใน R1 อย่างมีนัยสำคัญเมื่อ
อุณหภูมิเพิ่มขึ้นจาก 30
C 35
C ( P ¼ 0.057 ) เอทานอลความเข้มข้นใน R2
ที่ 33
C ไม่แตกต่างจาก
ที่ 30
C ( P ¼ 0.414 ) ในขณะที่มันลดลง

g ล. 75.2  1 ที่ 35
C ( P ¼ 0.016 )ดังนั้น จึงควรควบคุมอุณหภูมิใน R2
ที่  33
C .
อย่างต่อเนื่อง น้ำหมักเอธานอลหนาที่สามารถดำเนินการได้ตลอดทั้งปี เนื่องจากความสามารถที่ยอดเยี่ยม [ 24 ] แม้ว่า
น้ำผลไม้ไม่เหมาะสำหรับการหมักเอทานอลตลอดทั้งปีเนื่องจาก
0
20



40 60 80 100
0 5 10 15 20 25 30
ยีสต์จำนวน 108 เซนติเมตร ( 3 )

viability ของเซลล์ยีสต์ ( % ) ระยะเวลา ( วัน )
0
20


60 40 80 100

0 5 10 15 20 25 30
เอทานอลความเข้มข้น ( G L -
1 ) ระยะเวลา ( วัน ) :
0
1000 2000 3000 4000



5
0 5 10 15 20 25 30
vfas สมาธิ ( มก. แอล– 1 )
ระยะเวลา ( วัน )
c