1. Introduction
The achievement of successful semen cryopreservation would represent a dramatic leap in swine production systems. This would allow to the widespread use of germplasm banks for storing semen doses from selected males, for preserving genetic diversity, and for conserving rare breeds. Moreover, the long-term availability of frozen semen doses would allow for more flexible and efficient breeding programs, and it would help to control the transmission of pathogens [1]. Despite the utilization of refrigerated long-term semen storage, the use of cryopreserved boar semen has not achieved widespread acceptability for commercial breeding by artificial insemination, mainly for economical and political reasons, although there is need for technical improvement too [2]. It is possible to achieve fertility results comparable to fresh semen by combining cryopreservation with deep intrauterine insemination and accurate estimation of ovulation [3]. However, the use of thawed semen results in decreased farrowing rates and litter size if the insemination occurs outside this ovulation time window. Environmental and management factors affect fertility of thawed semen more than when using refrigerated semen [4] and [5].
The damage to boar sperm caused by cryopreservation includes motility impairment, chromatin damage, membrane alterations, and decreased mitochondrial membrane potential, caused by cold shock, osmotic shock, and oxidative damage by reactive oxygen species (ROS) to which boar spermatozoa seem to be especially sensitive [6] and [7]. Several factors have been presented as the cause of the low or irregular fertility results of frozen-thawed boar spermatozoa, including premature capacitation-like changes during the process of cooling and cryopreservation [6] and [8]. These changes have been termed as “cryocapacitation,” and could shorten the life span of spermatozoa, modify regulation pathways, cause early acrosome reaction, and modify the plasma membrane, resulting in part of the sperm population being unable to interact with the oviduct or to fertilize the ovum [9].
Using seminal plasma could help to improve semen quality after thawing. It is known that seminal plasma affects the physiology of spermatozoa, although its effects on different species are very variable, depending also on the condition of the sample [10], [11], [12] and [13]. In the case of boar spermatozoa, incubation of fresh or cryopreserved sperm in media supplemented with 10% seminal plasma seems to prevent, and possibly reverse, capacitation-related changes [7], [8] and [14]. In several studies, the post-thawing addition of seminal plasma improved membrane and acrosomal integrity, and enhanced the in vivo fertilization [15]. Use of 10% seminal plasma after thawing rendered good fertility results when combined with a modified freezing/thawing protocol [16].
However Abad et al. [17] found that 10% seminal plasma supplementation did not affect the creation of the oviductal sperm reservoir. The same authors reported no improvement on sow fertility when thawed boar semen was supplemented with 10% seminal plasma and inseminated by 2 or 12 hours of the predicted time of ovulation [18]. Therefore, they concluded that seminal plasma could not completely reverse cryocapacitation, or else other factors were having a role, decreasing cryopreserved semen fertility.
The objective of the present study was to enhance our understanding on the effects of post-thawing addition of seminal plasma to boar semen by analyzing several physiological variables using flow cytometry. This study follows a previous trial in which adding 50% seminal plasma to thawed boar semen made both pregnancy rate and mean litter size comparable to those achieved with liquid-stored semen [19]. Taking this study as a starting point, we posed the hypothesis that the seminal plasma would modify the physiology of thawed spermatozoa, explaining the fertility improvement found by [19]. Thus, we assessed the spermatozoa during a 4-hour incubation in the presence of 50% seminal plasma. A concentration of 10% seminal plasma was included in the study because it has been used in most studies, although it has yielded mixed results.
1 . บทนำ
ผลสัมฤทธิ์ของการเก็บรักษาน้ำเชื้อแบบแช่แข็งที่ประสบความสำเร็จจะแสดงถึงก้าวกระโดดอย่างมากในสุกร ระบบการผลิต นี้จะอนุญาตให้ใช้งานอย่างแพร่หลายของธนาคารพันธุกรรมเพื่อเก็บน้ำเชื้อโดสเลือกตัวผู้ เพื่อรักษาความหลากหลายทางพันธุกรรม และเพื่ออนุรักษ์พันธุ์หายาก นอกจากนี้ความพร้อมระยะยาวของน้ำเชื้อโดส จะอนุญาตให้มีความยืดหยุ่นมากขึ้นและมีประสิทธิภาพโปรแกรมการเพาะพันธุ์ และมันจะช่วยควบคุมการส่งผ่านเชื้อโรค [ 1 ] แม้จะมีการใช้ตู้เย็นเก็บน้ำเชื้อระยะยาว ใช้ตรวจสอบคุณภาพของน้ำเชื้อสุกรยังไม่บรรลุการยอมรับอย่างกว้างขวางเพื่อการพาณิชย์โดยการผสมเทียมส่วนใหญ่เหตุผลทางเศรษฐกิจและการเมือง แม้ว่าจะต้องปรับปรุงด้านเทคนิคด้วย [ 2 ] มันเป็นไปได้เพื่อให้บรรลุความอุดมสมบูรณ์ของผลเทียบเท่ากับน้ำเชื้อสด โดยรวมกับการผสมเทียม intrauterine และลึกก่อนการประเมินความถูกต้องของการตกไข่ [ 3 ] อย่างไรก็ตามใช้ละลายน้ำเชื้อผลลัพธ์ในโรงเรือนลดลงราคาและขนาดครอกถ้าการตกไข่เกิดขึ้นข้างนอกหน้าต่าง ในครั้งนี้ ปัจจัยด้านสิ่งแวดล้อมและการจัดการมีผลต่อภาวะเจริญพันธุ์ของละลายน้ำเชื้อแช่เย็นมากกว่าเมื่อใช้น้ำเชื้อ [ 4 ] และ [ 5 ] .
ความเสียหายที่เกิดจากเชื้ออสุจิตัวรวมถึงการพบความเสียหายเมมเบรน , การเคลื่อนที่ , การดัดแปลงและลดการเกิดเยื่อที่เกิดจากการเย็น , ช็อก , ช็อกและเกิดความเสียหายโดยปฏิกิริยาชนิดออกซิเจน ( ROS ) ซึ่งหมูป่า 5 ดูเหมือนจะบอบบางมาก [ 6 ] [ 7 ] หลายปัจจัยมี แสดง เป็น สาเหตุของการต่ำหรือผิดปกติจากอสุจิแช่แข็งและละลายหมูป่า ,รวมทั้งคลอดก่อนกำหนดมีเลศนัยเหมือนการเปลี่ยนแปลงในระหว่างกระบวนการของการทำความเย็นและระบบบำบัด [ 6 ] และ [ 8 ] การเปลี่ยนแปลงเหล่านี้ได้ถูกเรียกว่าเป็น " cryocapacitation " และสามารถร่นชีวิตของอสุจิ ปรับเปลี่ยนแนวทางระเบียบ เพราะต้นที่มีปฏิกิริยาและปรับเปลี่ยนพลาสมาเมมเบรน ,ซึ่งในส่วนของอสุจิประชากรไม่สามารถโต้ตอบกับท่อนำไข่ หรือให้ปุ๋ยไข่ [ 9 ] .
ใช้น้ำอสุจิอาจช่วยปรับปรุงคุณภาพน้ำเชื้อหลังการละลาย มันเป็นที่รู้จักกันว่า น้ำอสุจิ มีผลต่อสรีรวิทยาของอสุจิ แม้ว่าผลของสายพันธุ์ที่แตกต่างกัน มีตัวแปรมาก ทั้งนี้ ในเงื่อนไขของตัวอย่าง [ 10 ] [ 11 ] [ 12 ] และ [ 13 ]ในกรณีของหมูป่าอสุจิหรือสเปิร์มบ่มสด , ตรวจสอบคุณภาพสื่อเสริม 10% น้ำอสุจิจะป้องกัน และอาจย้อนกลับมีเลศนัยที่เกี่ยวข้องการเปลี่ยนแปลง [ 7 ] , [ 8 ] และ [ 14 ] ในการศึกษาหลายแห่ง , โพสต์การเพิ่มน้ำอสุจิปรับปรุงเยื่อและความสมบูรณ์ acrosomal และเสริมฤทธิ์ในการปฏิสนธิ [ 15 ]ใช้ 10% น้ำอสุจิหลังการละลายให้ความอุดมสมบูรณ์ของผลที่ดีเมื่อรวมกับการแก้ไขการแช่แข็ง / ละลายโปรโตคอล [ 16 ] .
แต่บัด et al . [ 17 ] พบว่า 10% เสริมน้ำอสุจิไม่มีผลต่อการสร้างอ่างเก็บน้ำอสุจิ oviductal .ผู้เขียนเดียวกันรายงานการปรับปรุงไม่มีในความอุดมสมบูรณ์ หว่าน เมื่อละลายน้ำเชื้อสุกรที่เสริมด้วย 10% และน้ำอสุจิผสมเทียม 2 หรือ 12 ชั่วโมงของช่วงเวลาการตกไข่ [ 18 ] ดังนั้น จึงสรุปได้ว่า น้ำอสุจิอาจไม่สมบูรณ์กลับ cryocapacitation , หรืออื่น ๆ ปัจจัยอื่น ๆ มี บทบาท การลดภาวะเจริญพันธุ์
ตรวจสอบคุณภาพน้ำเชื้อโดยมีวัตถุประสงค์เพื่อเสริมสร้างความเข้าใจในผลกระทบของการโพสต์เพิ่มน้ำอสุจิ เพื่อวิเคราะห์ตัวแปรทางสรีรวิทยาหลายน้ำเชื้อสุกรโดยใช้เซลล์ไหลการศึกษาแบบทดลองใช้ก่อน ซึ่งการเพิ่ม 50% น้ำอสุจิจะละลายน้ำเชื้อสุกร ทำให้ทั้งการตั้งครรภ์และอัตราหมายถึงขยะขนาดเปรียบเทียบกับความกับน้ำเชื้อเหลว [ 19 ] การ ศึกษานี้เป็นจุดเริ่มต้น เราจึงพบว่าพลาสมา อสุจิจะปรับเปลี่ยนสรีรวิทยาของอสุจิละลายอธิบายการปรับปรุงความอุดมสมบูรณ์ของพบโดย [ 19 ] ดังนั้นเราประเมินมี 3 ใน 4 บ่มในการแสดงตนของ 50% น้ำอสุจิ ความเข้มข้น 10 % น้ำอสุจิถูกรวมอยู่ในการศึกษา เพราะมีการใช้ในการศึกษามากที่สุด แม้จะมีผล
ผสม
การแปล กรุณารอสักครู่..