A new method which allows the enzym

A new method which allows the enzymatic amplification of DNA extracted from whole blood dried on filter paper disks is presented. The method was used to study heterogeneity within an erythrocyte-binding antigen (EBA-175) of Plasmodium falciparum. Blood specimens from malaria-infected patients in Southeast Asia and Africa were spotted onto filter paper, dried, and transported for processing. P. falciparum DNA was extracted by boiling the filter paper disks in the presence of Chelex-100 ion-chelating resin, amplified by the polymerase chain reaction, and analyzed for the presence of genetic variation. In all cases examined, plasmodial DNA was successfully amplified and characterized from filter paper disks. Hybridization of the polymerase chain reaction products with internal probes demonstrated simultaneous infection with two strains of P. falciparum in two patients. This technique represents a sensitive and practical field method for the determination of genetic variation within P. falciparum and the study of molecular epidemiology.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การนำเสนอวิธีการใหม่ซึ่งช่วยให้ขยายเอนไซม์ในระบบของดีเอ็นเอที่สกัดจากเลือดทั้งที่แห้งบนกระดาษกรองดิสก์ วิธีการที่ใช้ศึกษา heterogeneity ภายในการผูกของเม็ดเลือดแดงตรวจหา (EBA-175) ของ falciparum พลาสโมเดียม ไว้เป็นตัวอย่างเลือดจากผู้ป่วยที่ติดเชื้อมาลาเรียในเอเชียตะวันออกเฉียงใต้และแอฟริกามีด่างลงบนกระดาษกรอง แห้ง และขนส่งสำหรับการประมวลผล P. falciparum DNA ถูกสกัด โดยเดือดดิสก์กระดาษกรองในต่อหน้าของเรซิ่น chelating ไอออน Chelex 100 ขยาย โดยปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส และวิเคราะห์ความผันแปรทางพันธุกรรมของ ในทุกกรณีที่ตรวจสอบ ดีเอ็นเอ plasmodial สำเร็จขยาย และลักษณะจากดิสก์กระดาษกรอง Hybridization ของผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสกับคลิปปากตะเข้ภายในแสดงให้เห็นว่าการติดเชื้อพร้อมกับสองสายพันธุ์ของ P. falciparum ในผู้ป่วย 2 เทคนิคนี้แสดงวิธีการฟิลด์มีความสำคัญ และปฏิบัติการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมภายใน P. falciparum และศึกษาระบาดวิทยาระดับโมเลกุล

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธีใหม่ซึ่งจะช่วยให้การขยายเอนไซม์ของดีเอ็นเอที่สกัดจากเลือดแห้งบนดิสก์กระดาษกรองจะนำเสนอ วิธีการที่ใช้ในการศึกษาความแตกต่างภายในแอนติเจนของเม็ดเลือดแดงที่มีผลผูกพัน (EBA-175) ของ Plasmodium falciparum ตัวอย่างเลือดจากผู้ป่วยที่ติดเชื้อมาลาเรียในเอเชียตะวันออกเฉียงใต้และแอฟริกาเป็นด่างลงบนกระดาษกรองแห้งและการขนส่งสำหรับการประมวลผล P. falciparum ดีเอ็นเอถูกสกัดโดยการต้มแผ่นกระดาษกรองในการปรากฏตัวของ Chelex-100 เรซินไอออนคีเลตที่ขยายโดยวิธี Polymerase chain reaction และวิเคราะห์การปรากฏตัวของการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรม ในทุกกรณีการตรวจสอบดีเอ็นเอ plasmodial ถูกขยายและประสบความสำเร็จที่โดดเด่นจากดิสก์กระดาษกรอง การผสมพันธุ์ของผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์กับยานสำรวจแสดงให้เห็นถึงการติดเชื้อภายในพร้อมกันกับสองสายพันธุ์ของ falciparum พีในสองผู้ป่วย เทคนิคนี้แสดงให้เห็นถึงวิธีการที่สนามที่มีความสำคัญและเป็นประโยชน์สำหรับการตัดสินใจของการเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมภายในพี falciparum และการศึกษาระบาดวิทยาโมเลกุล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธีใหม่ซึ่งจะช่วยให้ การเพิ่มปริมาณของดีเอ็นเอเอนไซม์สกัดจากเลือดแห้งในดิสก์กระดาษกรองคือแสดง วิธีที่ใช้ในการศึกษาความหลากหลายภายในเม็ดเลือดแดงจับแอนติเจน ( eba-175 ) ของ พลาสโมเดียม ฟัลซิปารัม . ตัวอย่างเลือดจากผู้ป่วยที่ติดเชื้อมาลาเรียในภูมิภาคเอเชียตะวันออกเฉียงใต้ และ แอฟริกา ถูกพบบนกระดาษ กรองแห้ง และขนสำหรับการประมวลผล หน้าฟัลซิปารั่มดีเอ็นเอโดยการต้มกรองกระดาษแผ่นในการแสดงตนของ chelex-100 ไอออนชนิดเรซิน , ขยายโดยปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอร์เรส และวิเคราะห์การเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรม ในทุกกรณีตรวจดีเอ็นเอ plasmodial ได้ขยายและลักษณะจากแผ่นดิสก์กระดาษกรองชนิดของการใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรสและแสดงผลิตภัณฑ์ภายในการติดเชื้อพร้อมกันสองสายพันธุ์ของเชื้อ P . ในผู้ป่วย 2 เทคนิคนี้แสดงถึงความละเอียดอ่อน และปฏิบัติด้านวิธีการหาปริมาณความหลากหลายทางพันธุกรรมภายในหน้าใหม่ และการศึกษาระบาดวิทยาโมเลกุล