2.1. Bacterial strains and propagat

2.1. Bacterial strains and propagation
Commercial freeze-dried mesophilic lactic culture Choozit™ MA 16 LYO 25 DCU from Danisco (kindly provided by Larbus S.A., Madrid, Spain), with no gas production, and consisting of limited Lactococcus lactis subsp. lactis and cremoris strains, was used in cheese-making. The packet of MA 16 was resuspended in reconstituted skim milk to achieve a lactococci concentration of 4 109 cfu/mL, aliquoted and frozen at 40 C until use. The day before cheese-making, one aliquot was thawed and used to inoculate at 0.1% reconstituted skim milk and incubated at 30 C for 18 h.
C. tyrobutyricum INIA 68, C. beijerinckii INIA 63 and C. sporogenes INIA 71 were isolated from Manchego cheeses with pronounced late blowing defect (Garde, Arias, et al., 2011, Garde, Avila, et al., 2012; Garde, Gaya, Arias, & Nu~nez, 2012). These strains were selected on the basis that they were some of the best candidates to reproduce LBD in trial cheeses because they presented different pulsotypes represented by several isolates which produced high amounts of gas and butyric acid in milk and in Bryant and Burkey broth (containing sodium lactate). C. tyrobutyricum CECT 4011 and C. butyricum CECT 361 were obtained from the Spanish Type Culture Collection (Colecci on Espa~nola de Cultivos Tipo, CECT, Valencia, Spain). Given the ability of C. tyrobutyricum CECT 4011 to cause LBD in a similar type of cheese (G omez-Torres, Avila, Gaya, & Garde, 2014) we included this strain as a positive control of development of LBD. All Clostridium strains were maintained at 80 C in Reinforced Clostridial Medium (RCM, Difco, Detroit, USA) with 5% glycerol and subcultured in RCM and incubated at 37 C for 48 h in anaerobic jars with an H2 plus CO2 generating kit (AnaeroGen, Oxoid, Basingstoke, UK) before spore preparation.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.1. แบคทีเรียสายพันธุ์และเผยแพร่ แล็กติกกรอบพาณิชย์ mesophilic วัฒนธรรม Choozit ™ MA 16 LYO 25 DCU จาก Danisco (กรุณาโดย Larbus S.A. มาดริด สเปน), ไม่ผลิตก๊าซ และประกอบด้วยจำกัด Lactococcus lactis ถั่ว lactis และ cremoris สายพันธุ์ ใช้ในการทำชีส ห่อ MA 16 ถูก resuspended ใน reconstituted skim นมเพื่อให้ได้ความเข้มข้น lactococci ของ 4 109 cfu/mL, aliquoted และน้ำแข็งที่ 40 C จนกว่าจะใช้ วันก่อนทำชีส ส่วนลงตัวหนึ่งเป็น thawed และใช้ฉีดที่ 0.1% reconstituted skim นม และ incubated ที่ 30 C ใน 18 h C. tyrobutyricum INIA 68, beijerinckii C. INIA 63 และ C. sporogenes INIA 71 ถูกแยกต่างหากจากเนยแข็ง Manchego มีออกเสียงบกพร่องพัดปลาย (Garde, Arias, et al. 2011 Garde หมู่ et al., 2012 Garde กาย่า Arias และ Nu ~ nez, 2012) สายพันธุ์เหล่านี้ได้เลือกบนพื้นฐานว่า พวกเขามีบางส่วนของผู้สมัครที่ดีที่สุดเพื่อสร้าง LBD ในเนยแข็งที่ทดลองใช้เนื่องจากพวกเขานำเสนอ pulsotypes แตกต่างกันแสดงหลายแยกที่ผลิตยอดสูงของก๊าซและกรด butyric ในนม และซุปไบรอันท์และ Burkey (ประกอบด้วยโซเดียม lactate) C. tyrobutyricum CECT 4011 และ C. butyricum CECT 361 ได้รับมาจากวัฒนธรรมสเปนชนิดคอลเลกชัน (Colecci บน Espa ~ nola Cultivos เด Tipo, CECT, Valencia สเปน) เราให้ความสามารถของ C. tyrobutyricum CECT 4011 ทำ LBD เป็นชนิดที่คล้ายกันของชี (G omez-ทอร์เรส หมู่ กาย่า และ Garde, 2014) รวมนี้ต้องใช้เป็นควบคุมพัฒนา LBD เป็นบวก สายพันธุ์เชื้อ Clostridium ทั้งหมดถูกจัดเก็บอยู่ที่ 80 C ในเสริม Clostridial (RCM, Difco ดีทรอยต์ สหรัฐอเมริกา) กับกลีเซอร 5% และ subcultured ใน RCM และ incubated ที่ 37 C สำหรับ h 48 ในขวดที่ไม่ใช้ออกซิเจนมีเป็น H2 และ CO2 สร้างชุด (AnaeroGen, Oxoid, Basingstoke, UK) ก่อนเตรียมสปอร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.1 สายพันธุ์แบคทีเรียและการขยายพันธุ์พาณิชย์แห้งวัฒนธรรมแลคติก mesophilic Choozit ™ MA 16 LYO 25 DCU จาก Danisco (ให้ความกรุณาโดย Larbus SA, มาดริด, สเปน) กับการผลิตก๊าซไม่และประกอบด้วย จำกัด Lactococcus lactis subsp
lactis และสายพันธุ์ cremoris ถูกนำมาใช้ในการทำชีส แพ็คเก็ตของ MA 16 ถูก resuspended ในนมพร่องมันเนยสร้างขึ้นเพื่อให้บรรลุความเข้มข้น lactococci 4 109 โคโลนี / มิลลิลิตร aliquoted และแช่แข็งที่ 40 C จนถึงการใช้งาน วันก่อนทำชีสหนึ่ง aliquot ถูกละลายและใช้ในการฉีดวัคซีนที่ 0.1% นมพร่องมันเนยละลายและบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 18 ชั่วโมง.
ซี tyrobutyricum Inia 68, ซี beijerinckii Inia 63 และ C sporogenes Inia 71 แยกได้จากชีส Manchego กับข้อบกพร่องเป่าปลายออกเสียง (จี๊ด, เรียส, et al 2011, จี๊ด, Avila, et al, 2012;.. จี๊ด, Gaya, เรียสและ Nu ~ หนีบ 2012) สายพันธุ์เหล่านี้ได้รับการคัดเลือกบนพื้นฐานที่ว่าพวกเขาบางส่วนของผู้สมัครที่ดีที่สุดในการทำซ้ำ LBD ในชีสทดลองเพราะพวกเขานำเสนอสายพันธุ์ที่แตกต่างกันแสดงโดยไอโซเลทหลายอย่างที่ผลิตในปริมาณที่สูงของก๊าซและกรดบิวทิริกในนมและไบรอันท์และน้ำซุป Burkey (ที่มีโซเดียม แลคเตท) ซี tyrobutyricum CECT 4011 และ C butyricum CECT 361 ที่ได้รับจากวัฒนธรรมประเภทสเปนสะสม (Colecci ใน Espa ~ Nola เด Cultivos Tipo, CECT, วาเลนเซีย, สเปน) ได้รับความสามารถของซี tyrobutyricum CECT 4011 ที่จะทำให้เกิด LBD ในประเภทที่คล้ายกันของชีส (G-omez อร์เรส, วีลายาและจี๊ด 2014) เรารวมถึงสายพันธุ์นี้เป็นตัวควบคุมในเชิงบวกของการพัฒนาของ LBD สายพันธุ์เชื้อ Clostridium ทั้งหมดถูกเก็บรักษาไว้ที่ 80 องศาเซลเซียสในการเสริม Clostridial กลาง (RCM, Difco, ดีทรอยต์สหรัฐอเมริกา) กับกลีเซอรีน 5% และเลี้ยงใน RCM และบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมงในขวดเพาะกายที่มี H2 บวก CO2 สร้างชุด (AnaeroGen, Oxoid เบซิงสหราชอาณาจักร) ก่อนที่จะเตรียมความพร้อมของสปอร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.1 . สายพันธุ์แบคทีเรียแลคติกแห้งและเผยแผ่
พาณิชย์มีวัฒนธรรม choozit ™มา 16 ไลโอ 25 DCU จาก danisco ( กรุณาให้ larbus S.A . , มาดริด , สเปน ) , ไม่มีก๊าซที่ผลิตและประกอบด้วยจำกัดแลคโตค คัส lactis subsp . และ cremoris lactis สายพันธุ์ ที่ใช้ในการทำเนยแข็งที่อยู่ในธรรมชาติมา 16 คือ resuspended หางนมเพื่อให้เกิดความเข้มข้นของแลกโตค ไค 4 109 CFU / ml , แช่แข็งที่อุณหภูมิ 40 องศาเซลเซียสและ aliquoted จนใช้ วัน ก่อนการทำชีส หนึ่งส่วนลงตัวถูกละลายและใช้ในการฉีดวัคซีนที่ 0.1% สร้างหางนมผงและบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 18 ชั่วโมง
C tyrobutyricum inia 68 , C . beijerinckii inia 63 .sporogenes inia 71 ที่แยกได้จาก แมนเชโก้ชีส กับออกเสียงสายเป่าข้อบกพร่อง ( Garde Arias , et al . , 2011 , การ์ด , Avila , et al . , 2012 ; เปรี้ยวจี๊ด กายา Arias & Nu ~ เนซ , 2012 )สายพันธุ์เหล่านี้ได้ถูกเลือกบนพื้นฐานที่ว่าพวกเขามีบางส่วนของผู้สมัครที่ดีที่สุดที่จะทำซ้ำ lbd ในเนยแข็งทดลองเพราะพวกเขานำเสนอที่แตกต่างกัน pulsotypes แสดงโดยหลายสายพันธุ์ที่ผลิตปริมาณสูงของแก๊สและกรด butyric ในนม และใน ไบรอันกับ burkey broth ( ที่มีโซเดียมแลคเตท ) C . tyrobutyricum CECT 4011 .butyricum CECT คุณได้มาจากสเปนประเภทวัฒนธรรมของสะสม ( colecci เอสปาโนล่า เดอ cultivos ประเภทที่ ~ , CECT วาเลนเซีย , สเปน ) ได้รับความสามารถของ tyrobutyricum CECT 4011 ให้ lbd ในประเภทที่คล้ายกันของชีส ( G omez ตอร์เรส , Avila กายา &เปรี้ยวจี๊ด 2014 ) เรารวมสายพันธุ์นี้เป็นตัวควบคุมบวกของการพัฒนา lbd .เชื้อ Clostridium ทั้งหมดถูกเก็บรักษาไว้ที่ 80 C ในโครงสร้าง clostridial ขนาดกลาง ( จำนวน difco , ดีทรอยต์ , USA ) กับกลีเซอรอล 5% และในจำนวน subcultured บ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง ใช้ขวดกับ H2 บวก CO2 สร้าง Kit ( anaerogen oxoid Basingstoke , สหราชอาณาจักร , ,
) ก่อนการเตรียมการสร้างสปอร์