minced muscle stored at room temperature, and canned chelipeds without exoskeleton stored at room temperature (Table 2). All samples were quickly taken to the laboratory and kept frozen until DNA extraction. Approximately 6 mm2 of frozen tissue was taken and placed in absolute ethanol at _20 _C, with an ethanol change 24 h later. For the frozen cubes of minced meat, between 30 and 50 samples were taken per cube, trying to cover the entire minced-meat block. DNA of samples for authentication was extracted using the E.Z.N.A_ tissue DNA kit (Omega, Biotech) according to manufacturer’s instructions. For DNA Barcoding and authentication samples a partial fragment of the COI gen was amplified via PCR using the universal COI primers of Folmer, Black, Hoeh, Lutz, and Vrijenhoek (1994). PCR was performed in a final volume of 35 ml with 1.5 ng of DNA, 1 mM of 10X PCR Buffer, 0.6mMof dNTP mix, 1.5mMof MgCl2, 0.6mMof each primer, 0.075 mg/mL of Bovin Serum Albumine and 0.03 U of
กล้ามเนื้อสับเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องและ chelipeds กระป๋องโดยไม่ต้องรพเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง (ตารางที่ 2) ตัวอย่างทั้งหมดถูกนำตัวไปยังห้องปฏิบัติการได้อย่างรวดเร็วและเก็บแช่แข็งจนกว่าการสกัดดีเอ็นเอ ประมาณ 6 mm2 ของเนื้อเยื่อแช่แข็งและถูกนำมาวางไว้ในเอทานอลที่แน่นอน _20 _c, เอทานอลที่มีการเปลี่ยนแปลงตลอด 24 ชั่วโมงต่อมา สำหรับก้อนแช่แข็งของเนื้อสัตว์สับระหว่าง 30 และ 50 ตัวอย่างที่ถูกนำมาต่อลูกบาศก์พยายามที่จะครอบคลุมบล็อกเนื้อสับทั้งหมด dna ของตัวอย่างสำหรับการตรวจสอบได้รับการสกัดโดยใช้ชุด dna เนื้อเยื่อ ezna_ (โอเมก้า, ไบโอเทค) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต หาดีเอ็นเอบาร์โค้ดและการตรวจสอบตัวอย่างส่วนบางส่วนของ COI เก็ถูกขยายผ่าน PCR โดยใช้ไพรเมอร์ COI สากลของ Folmer, สีดำ, Hoeh, ลัทซ์,และ vrijenhoek (1994) pcr ได้ดำเนินการในเล่มสุดท้ายจาก 35 มล. กับ 1.5 ng ของ dna, 1 มิลลิเมตร 10 เท่าบัฟเฟอร์ pcr, 0.6mmof ผสม dntp, 1.5mmof MgCl2, 0.6mmof แต่ละไพรเมอร์, 0.075 mg / ml ของ Bovin albumine ซีรั่มและ 0.03 ของ u
การแปล กรุณารอสักครู่..