culture extract from mycelium is us

culture extract from mycelium is useful for PCR amplifi-
cation. On melting analysis, melting peak at Tm values of
88.08 and 88.58–89.08C were formed by SD192 and
SD296, respectively (Fig. 1a,b). As expected, electrophoretic
analysis of these PCR products with 30058-S1 extract
showed 144- and 265-bp amplified bands, respectively
(Fig. 1c,d). These findings indicate that SD192 and SD296
can be used in the detection of the sporeless trait from
TMIC-30058 by using real-time PCR and culture extracts.
Determination of sporulation phenotype in the breeding
population by test cross in P. pulmonarius generally
requires at least 60 days containing mating with tester
strains, preparation of the culture seeds, and cultivation to
obtain the mature fruiting bodies. Although the two previously
developed STS markers, SD192 and SD296, solved
the need for these lengthy processes, preparation of purified
genomic DNA and electrophoretic analysis were required.
Here we showed the method combined these STS markers
and real-time PCR without the necessity of purified genomic
DNA and electrophoretic analysis. This method makes
possible the handling of many specimens in a day by one
person. This time- and labor-saving method will be a
valuable tool for efficient MAS under large-scale screening
in the breeding of sporeless cultivars. To our knowledge,
this is the first report of the real-time PCR-based method
for useful mutation traits in mushroom breeding.
Acknowledgments This research was supported in part by the
Japan Society for the Promotion of Science (Grants-in-Aid for Scientific
Research, KibanC 19580004)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สารสกัดจากเส้นใยวัฒนธรรมจะเป็นประโยชน์สำหรับเครื่องขยาย PCR
ไอออนบวก การวิเคราะห์ละลายละลายสูงสุดที่ค่า Tm ของ
88.08 และ 88.58-89.08C กำลังก่อตัวขึ้นโดย SD192 และ
SD296 ตามลำดับ (รูป. 1a b) เป็นที่คาดหวัง electrophoretic
วิเคราะห์ผลิตภัณฑ์เหล่านี้ PCR ด้วยสารสกัดจาก 30058-S1
แสดงให้เห็น 144- และ 265 bp-วงดนตรีที่ขยายตามลำดับ
(รูปที่. 1 c, d) การค้นพบนี้แสดงให้เห็นว่า SD192 และ SD296
สามารถนำมาใช้ในการตรวจสอบของลักษณะ sporeless จาก
TMIC-30058 โดยใช้วิธี PCR แบบ real-time และสารสกัดจากวัฒนธรรม.
การกำหนดฟีโนไทป์สร้างสปอร์ในการเพาะพันธุ์ของประชากรโดยการทดสอบข้ามในพี pulmonarius โดยทั่วไปต้องมีอย่างน้อย60 วันที่มีการผสมพันธุ์กับเครื่องทดสอบสายพันธุ์การเตรียมเมล็ดวัฒนธรรมและการเพาะปลูกเพื่อให้ได้ผลร่างผู้ใหญ่ แม้ว่าทั้งสองก่อนหน้านี้บ่งชี้พัฒนา STS, SD192 และ SD296 แก้ไขความจำเป็นสำหรับกระบวนการที่มีความยาวเหล่านี้เตรียมความพร้อมของบริสุทธิ์ดีเอ็นเอและการวิเคราะห์electrophoretic ต้อง. ที่นี่เราแสดงให้เห็นวิธีการรวมเหล่านี้บ่งชี้ห่วงและ PCR แบบ real-time โดยไม่จำเป็นของบริสุทธิ์ จีโนมดีเอ็นเอและการวิเคราะห์electrophoretic วิธีการนี้จะทำให้เป็นไปได้ที่การจัดการของตัวอย่างจำนวนมากในวันหนึ่งคน นี้เวลาและวิธีการที่ช่วยประหยัดแรงงานจะเป็นเครื่องมือสำคัญสำหรับการที่มีประสิทธิภาพภายใต้การตรวจคัดกรอง MAS ขนาดใหญ่ในการปรับปรุงพันธุ์พันธุ์sporeless ความรู้ของเรานี้เป็นรายงานแรกของเวลาจริงวิธีการที่ใช้วิธี PCR สำหรับลักษณะการกลายพันธุ์ที่มีประโยชน์ในการเพาะพันธุ์เห็ด. กิตติกรรมประกาศงานวิจัยนี้ได้รับการสนับสนุนในส่วนของสมาคมญี่ปุ่นเพื่อการส่งเสริมวิทยาศาสตร์ (เงินอุดหนุนในการปฐมพยาบาลวิทยาศาสตร์ วิจัย KibanC 19580004)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัฒนธรรมสกัดจากเส้นใยที่เป็นประโยชน์สำหรับ PCR amplifi -
ไอออนบวก ในการหลอมละลายสูงสุดในการวิเคราะห์ค่า TM ของ
88.08 88.58 –และ 89.08c ขึ้นโดย sd192 และ
sd296 ตามลำดับ ( รูปที่ 1A , B ) เป็นไปตามคาด การวิเคราะห์รูปแบบของดีเอ็นเอเหล่านี้กับผลิตภัณฑ์

30058-s1 สกัดพบ 144 - 265 BP ขยายวงตามลำดับ
( ภาพ c , d ) จากผลการวิจัยแสดงให้เห็นว่า sd192 sd296
และสามารถใช้ในการตรวจสอบลักษณะ sporeless จาก
tmic-30058 โดยใช้ PCR แบบเรียลไทม์ และสารสกัดจากวัฒนธรรม .
กำหนดการในการเพาะพันธุ์
ประชากรโดยข้ามการทดสอบในหน้า pulmonarius ทั่วไป
ต้องอย่างน้อย 60 วันบรรจุ tester
สายพันธุ์ผสมพันธุ์กับการเตรียมของวัฒนธรรม , เมล็ด และการเพาะเลี้ยง

รับผู้ใหญ่ กินศพแม้ว่าสองก่อนหน้านี้
พัฒนาตามเครื่องหมาย และ sd192 sd296 แก้ไข
ต้องกระบวนการที่ยาวเหล่านี้ การเตรียมดีเอ็นเอและการวิเคราะห์รูปแบบบริสุทธิ์

ถูกต้อง . ที่นี่เราพบวิธีการรวมเหล่านี้ตามและ PCR แบบเรียลไทม์โดยไม่มีเครื่องหมาย

ความจำเป็นของดีเอ็นเอและการวิเคราะห์รูปแบบความ วิธีนี้ทำให้
เป็นไปได้ในการจัดการหลายชิ้นในวันเดียว
คน - วิธีนี้ทุ่นแรงและเวลาจะเป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าสำหรับที่มีประสิทธิภาพ แต่ภายใต้

การขนาดใหญ่ในการผสมพันธุ์ของ sporeless พันธุ์ ความรู้ของเรา
นี่คือรายงานแรกของ PCR แบบเรียลไทม์จากวิธีการเพื่อประโยชน์ในการปรับปรุงพันธุ์ของลักษณะ

ขอบคุณเห็ด การวิจัยนี้ได้รับการสนับสนุนในส่วนของ
ญี่ปุ่นสังคมเพื่อการส่งเสริมวิทยาศาสตร์ ( ทุนอุดหนุนสำหรับการวิจัยทางวิทยาศาสตร์
, 19580004 kibanc )