Meanwhile, we recently evaluated a

Meanwhile, we recently evaluated a DNA-based diagnostic
method by the polymerase chain reaction (PCR) targeting
the small subunit ribosomal RNA (SSU rRNA)
genes of all four species of human malaria as reported (8).
Ten isolates each for P. falciparum, P. vivax, and P. malariae
and four isolates of P. ovale were used as positive controls.
Results showed that all isolates gave concordant
positive PCR products with those diagnosed by microscopy
except an isolate from this patient (data not shown).
Retrospective examination of blood smears has shown several
developmental stages of malaria parasites similar to
those typically seen in P. malariae. However, some erythrocytes
that harbored mature asexual parasites possessed
fimbriated margins. The cytoplasm of some young
trophozoites appeared spread out into the network of irregular
pseudopodia, and the chromatin was distributed into
fragments, conforming to the tenue forms. Pinkish dots
varying from fine to large irregular masses called Sinton
and Mulligan’s stippling developed intracorpuscularly with
the maturation of some parasites (Figure 1).
To elucidate the species of malaria infecting our
patient, we determined the SSU rRNA gene by using similar
methods as described by others (9), except that ExTaq
DNA polymerase (Takara, Japan), pGEM-T vector
(Promega, USA), and Escherichia coli strain JM109 were
used. Results showed that the SSU rRNA sequence contained
97.8% to 99.6% homology with those of P. knowlesi
transcribed during asexual stages or the type A gene
(GenBank accession no. AY327549-AY327557, L07560,
and U72542) (3,9). Nucleotide sequence data reported in
this study are available in the EMBL, GenBank, and DDJB
databases under the accession no. AY580317–8.
Phylogenetic tree showed that P. knowlesi in this study
was closely related to the W1 and Nuri strains, although its
divergence from Malaysian human isolates was not supported
by bootstrap analysis (Figure 2). Consistently, the
mitochondrial cytochrome b gene of this isolate, determined
by the methods similar to previous report except the
PCR primers (mtPk-F:5′-AGGTATTATATTCTTTATACAAATATTAAC-
3′ and mtPk-R:5′-TCTTTTATAATGAACAAGTGTAAATAATC-
3′), displayed perfect
sequence identity with that of P. knowlesi strain H from
monkey (AF069621) (4).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในขณะเดียวกัน เราเพิ่งประเมินการวินิจฉัยตามดีเอ็นเอวิธีการ โดยการกำหนดเป้าหมายปฏิกิริยาลูกโซ่ (PCR) ในพอลิเมอเรสย่อยเล็ก ribosomal อาร์เอ็นเอ (SSU rRNA)ยีนของมาลาเรียมนุษย์เป็นทั้งหมด 4 ชนิดรายงาน (8)สิบแยกแต่ละ การ P. falciparum, P. vivax, P. malariaeและสี่แยกของ P. ovale ถูกใช้เป็นตัวควบคุมบวกผลลัพธ์ที่แสดงให้เห็นว่า ทั้งหมดที่แยกได้ให้ concordantผลิตภัณฑ์ PCR บวกกับการวินิจฉัย โดย microscopyยกเว้นแยกจากผู้ป่วยรายนี้ (ข้อมูลไม่แสดง)การตรวจสอบเลือด smears คาดได้แสดงหลายขั้นตอนพัฒนาของปรสิตมาลาเรียที่คล้ายกับที่เห็นใน P. malariae โดยทั่วไป อย่างไรก็ตาม บาง erythrocytesที่ harbored กับ asexual ผู้ใหญ่มอบขอบหน้าปาน ไซโทพลาซึมของหนุ่มสาวบางtrophozoites ปรากฏ แพร่กระจายออกไปยังเครือข่ายไม่สม่ำเสมอเท้าเทียม และโครมาตินจะมีการกระจายเป็นชิ้นส่วน สอดคล้องกับแบบฟอร์ม tenue จุดบัวโรยแตกต่างจากฝูงปรับให้มีขนาดใหญ่ผิดปกติเรียกว่า Sintonมัลลิเกน stippling พัฒนา intracorpuscularly ด้วยพ่อแม่บางกับ (รูปที่ 1)การ elucidate พันธุ์ติดโรคมาลาเรียของเราผู้ป่วย เรากำหนดใน SSU rRNA ยีนโดยคล้ายคลึงกันวิธีตามที่อธิบายไว้ โดยผู้อื่น (9), ยกเว้น ExTaq ที่ดีเอ็นเอพอลิเมอเรส (Takara ญี่ปุ่น), เวกเตอร์ pGEM T(Promega สหรัฐอเมริกา), และ Escherichia coli ต้องใช้ JM109ใช้ ผลพบว่า ลำดับ SSU rRNA อยู่97.8% ถึง 99.6% homology กับ P. knowlesiทับศัพท์ระหว่างขั้น asexual หรือชนิดของยีน(GenBank ทะเบียนไม่ AY327549-AY327557, L07560และ U72542) (3,9) รายงานข้อมูลลำดับของนิวคลีโอไทด์การศึกษานี้อยู่ใน EMBL, GenBank และ DDJBฐานข้อมูลภายใต้ทะเบียนที่ไม่ AY580317-8ทรี phylogenetic พบว่า P. knowlesi ในการศึกษานี้มีสัมพันธ์ใกล้ชิดกับสายพันธุ์ W1 และ Nuri แม้ว่าการdivergence จากมาเลเซียแยกมนุษย์ไม่ได้รับการสนับสนุนโดยการเริ่มต้นระบบการวิเคราะห์ (2 รูป) อย่างสม่ำเสมอ การยีน mitochondrial cytochrome b ของนี้แยก กำหนดโดยวิธีการคล้ายกับรายงานก่อนหน้านี้ยกเว้นการไพรเมอร์ PCR (mtPk-F:5′ - AGGTATTATATTCTTTATACAAATATTAAC -3′ และ mtPk-R:5′-TCTTTTATAATGAACAAGTGTAAATAATC -3′), แสดงสมบูรณ์แบบลำดับรหัสประจำตัวที่ต้องใช้ P. knowlesi H จากลิง (AF069621) (4)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในขณะเดียวกันเราเมื่อเร็ว ๆ นี้ได้รับการประเมินวินิจฉัยดีเอ็นเอที่ใช้
วิธีการโดยวิธี Polymerase chain reaction (PCR) การกำหนดเป้าหมาย
ขนาดเล็ก subunit โซมอลอาร์เอ็นเอ (ซุ rRNA)
ยีนของทั้งสี่ชนิดของโรคมาลาเรียของมนุษย์ตามที่รายงาน (8).
สิบแยกแต่ละ P. falciparum , P. vivax และ P. malariae
และสี่แยกของ P. ovale ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมบวก.
ผลการศึกษาพบว่าเชื้อทั้งหมดให้สอดคล้อง
ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์บวกกับผู้ที่ได้รับการวินิจฉัยโดยใช้กล้องจุลทรรศน์
ยกเว้นแยกจากผู้ป่วยรายนี้ (ไม่ได้แสดงข้อมูล).
ย้อนหลัง การตรวจสอบรอยเปื้อนเลือดได้แสดงให้เห็นหลาย
ขั้นตอนพัฒนาการของปรสิตมาลาเรียคล้ายกับ
ที่พบโดยทั่วไปใน P. malariae แต่เม็ดเลือดแดงบางส่วน
ที่เก็บงำปรสิตกะเทยผู้ใหญ่มี
อัตรากำไรขั้นต้น fimbriated พลาสซึมของหนุ่มบาง
trophozoites ปรากฏแพร่กระจายออกไปในเครือข่ายของความผิดปกติของ
เท้าเทียมและโครมากระจายเป็น
ชิ้นส่วนที่สอดคล้องกับรูปแบบ tenue จุดชมพู
ที่แตกต่างจากที่ดีเพื่อฝูงผิดปกติขนาดใหญ่ที่เรียกว่า Sinton
และมัลลิแกน stippling พัฒนา intracorpuscularly กับ
การเจริญเติบโตของปรสิตบาง (รูปที่ 1).
เพื่ออธิบายชนิดของโรคมาลาเรียติดไวรัสของเรา
ป่วยเรากำหนด rRNA ซุยีนโดยใช้ที่คล้ายกัน
วิธีการตามที่อธิบาย อื่น ๆ (9) ยกเว้นว่า ExTaq
ดีเอ็นเอโพลิเมอร์ (Takara, ญี่ปุ่น), pGEM-T เวกเตอร์
(Promega, ประเทศสหรัฐอเมริกา) และ Escherichia coli JM109 สายพันธุ์ที่ถูก
นำมาใช้ ผลการศึกษาพบว่าลำดับ rRNA ซุที่มีอยู่
97.8% เป็น 99.6% ที่คล้ายคลึงกันกับผู้ P. knowlesi
คัดลอกในระหว่างขั้นตอนกะเทยหรือชนิดของยีน
(ภาคยานุวัติ GenBank ไม่มี. AY327549-AY327557, L07560,
และ U72542) (3.9) ข้อมูลลำดับเบสรายงานใน
การศึกษาครั้งนี้มีอยู่ใน EMBL เมดและ DDJB
ฐานข้อมูลภายใต้การภาคยานุวัติไม่มี AY580317-8.
Phylogenetic ต้นไม้แสดงให้เห็นว่า P. knowlesi ในการศึกษาครั้งนี้
มีความสัมพันธ์อย่างใกล้ชิดกับสายพันธุ์ W1 และนูแม้ว่ามัน
แตกต่างจากสายพันธุ์ของมนุษย์มาเลเซียไม่ได้รับการสนับสนุน
โดยการวิเคราะห์บูต (รูปที่ 2) อย่างต่อเนื่อง
ยล cytochrome ขยีนของเชื้อนี้กำหนด
โดยวิธีการคล้ายกับรายงานก่อนหน้านี้ยกเว้น
ไพร PCR (mtPk-F: 5'-AGGTATTATATTCTTTATACAAATATTAAC-
3 'และ mtPk-R: 5'-TCTTTTATAATGAACAAGTGTAAATAATC-
3 ') แสดง ที่สมบูรณ์แบบ
ลำดับบัตรกับที่ของสายพันธุ์ P. knowlesi H จาก
ลิง (AF069621) (4)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในขณะเดียวกัน , เราเพิ่งประเมินวินิจฉัย
ตามดีเอ็นเอโดยปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอร์เรส ( พีซีอาร์ ) เป้าหมาย
ขนาดเล็กไรโบโซมอล อาร์เอ็นเอ ( rRNA ซึ่งซื่อ )
ยีนของทั้ง 4 ชนิดของโรคมาลาเรียของมนุษย์ รายงานว่า ( 8 ) .
10 แยกแต่ละหน้าและไวแวกซ์มาลาเรีย , หน้า , หน้า และ มาลาเรีย
4 ไอโซเลท หน้ารูปไข่ ถูกใช้เป็นตัวควบคุมบวก พบว่าทุกสายพันธุ์

ให้สอดคล้องกันผลิตภัณฑ์ PCR บวกกับการวินิจฉัยด้วยกล้องจุลทรรศน์
เว้นแต่ที่แยกได้จากผู้ป่วย ( ข้อมูลไม่แสดง ) .
สอบย้อนหลังของสเมียร์เลือดได้แสดงขั้นตอนการพัฒนาของโรคมาลาเรียปรสิตคล้ายกับหลาย

ผู้ที่มักจะเห็นในหน้าไข้จับสั่น . อย่างไรก็ตาม การยอมรับว่าเป็นผู้ใหญ่ที่ไม่มีเพศ มีปรสิต

fimbriated ระยะขอบ ท่อของ
หนุ่มบางtrophozoites ปรากฏกระจายเข้าไปในเครือข่ายของผิดปกติ
เต่าเหลือง และพบกระจายไป
tenue เศษสอดคล้องกับรูปแบบ จุดที่แตกต่างจากสีชมพู
ปรับขนาดใหญ่ผิดปกติและมวลชนเรียกซินเติ้น
stippling พัฒนา intracorpuscularly มัลลิแกนเป็นด้วยวุฒิภาวะของปรสิตบางอย่าง

( รูปที่ 1 ) ทำให้สายพันธุ์ของเชื้อมาลาเรียติดคนไข้ของเรา
,เรามุ่งมั่นที่ซื่อ rRNA ยีนโดยใช้วิธีที่คล้ายกัน
ตามที่อธิบายไว้โดยคนอื่น ๆ ( 9 ) , ยกเว้นว่า extaq
DNA polymerase ( Takara , ญี่ปุ่น ) , เวกเตอร์ pgem-t
( promega , USA ) และ Escherichia coli สายพันธุ์ที่มีอยู่
ใช้ . ผลการศึกษาพบว่าซื่อ rRNA ลำดับอยู่
97.8 % % ซึ่งตินั้นหน้า knowlesi
และในระหว่างขั้นตอนไม่มีเพศหรือชนิดยีน
( ขนาดหนังสือไม่ay327549-ay327557 l07560
, , และ u72542 ) ( 3,9 ) ลำดับนิวคลีโอไทด์ข้อมูลรายงาน
การศึกษานี้มีอยู่ในสัตวขนาด , และ ddjb
ฐานข้อมูลภายใต้การครอบครองไม่ ay580317 – 8 .
phylogenetic ต้นไม้ พบว่าหน้า knowlesi ในการศึกษานี้มีความเกี่ยวข้องกับ W1
นูริ สายพันธุ์ และถึงแม้ว่าความแตกต่างของมนุษย์ที่แยกไม่ได้จากมาเลเซีย

โดยการวิเคราะห์บูได้รับการสนับสนุน ( รูปที่ 2 )อย่างต่อเนื่อง ,
- B ของยีนไมโตคอนเดรียนี้แยกที่กำหนด
โดยวิธีการคล้ายคลึงกับรายงานก่อนหน้านี้ยกเว้น
PCR ไพรเมอร์ ( mtpk-f : 5 ’ - ’ mtpk-r aggtattatattctttatacaaatattaac -
3 และ 5 นั้น - -
3 tcttttataatgaacaagtgtaaataatc School ) , แสดงที่สมบูรณ์แบบ
ลำดับตัวตนที่หน้า knowlesi เมื่อย
H จาก ลิง ( af069621 )
( 4 )