The presence of germ cells and soma

The presence of germ cells and somatic cells in the ovary was
immunohistochemically examined using markers for germ and
somatic cells. The 3b-hydroxysteroid dehydrogenase (3b-HSD)
was used as a marker for steroid-producing somatic cells and vasa
for germ cells. Vasa is a specific antigen produced by early stage
germ cells (Kobayashi et al., 2002). 3b-HSD protein is localized in
interstitial and theca cells (Kobayashi et al., 1996). Specificity of
antibodies against tilapia 3b-HSD or vasa protein were previously
verified and reported elsewhere (Kobayashi et al., 1996;
Kobayashi et al., 2002). Standard immunohistochemical methods
were used to stain germ and somatic cells. Briefly, five micrometer
gonad sections were prepared in paraffin and deparaffinized with
xylene, rehydrated in graded ethanol, and finally washed in
0.1 M PBS. They were then treated with 3% H2O2for 20 min to inactivate endogenous peroxidase activity. To eliminate non-specific
binding, slides were incubated with 15% normal goat serum for
15 min. Samples were incubated overnight with the primary antibodies (diluted 1:600–1:2000 in 1% BSA/PBS) in a moist chamber at
4C. Detection and visualization of the primary antibodies were
completed using the Histofine Immunohistochemistry Kit
(Nichirei, Tokyo, Japan) and diaminobenzidine (DAB) according to
the manufacturer’s protocol. Control slides for immunohistochemistry were treated with BSA in PBS and normal rabbit plasma
instead of the primary antibody to determine the non-specific
reactivity of the secondary antibody.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สถิตอยู่จมูกและมาติกเซลล์ในรังไข่immunohistochemically ตรวจสอบการใช้เครื่องหมายสำหรับจมูก และมาติกเซลล์ 3b hydroxysteroid dehydrogenase (3b HSD)ใช้เป็นเครื่องหมายการผลิตสเตอรอยด์มาติกเซลล์ vasaสำหรับจมูกมีเซลล์ Vasa ได้ตรวจหาเฉพาะที่ผลิต โดยระยะแรก ๆเจิร์มเซลล์ (โคะบะยะชิและ al., 2002) 3b HSD โปรตีนจะเป็นภาษาท้องถิ่นหลาก และเซลล์ theca (โคะบะยะชิ et al., 1996) Specificity ของเคยแอนตี้กับโปรตีน 3b HSD หรือ vasa นิลตรวจสอบ และรายงานอื่น (โคะบะยะชิ et al., 1996โคะบะยะชิและ al., 2002) วิธีมาตรฐาน immunohistochemicalก็จะติดจมูกและเซลล์มาติก สั้น ๆ 5 ไมโครมิเตอร์ส่วน gonad เตรียมในพาราฟิน และ deparaffinized ด้วยไซ rehydrated ในมีการจัดระดับเอทานอล และสุดท้าย ล้างใน0.1 M PBS แล้วพวกเขาก็ถือว่า มี 3% H2O2for 20 นาทีจะยกกิจกรรม endogenous peroxidase เพื่อกำจัดไม่เฉพาะเจาะจงผูก ภาพนิ่งถูก incubated กับซีรั่มแพะปกติ 15% สำหรับตัวอย่าง 15 นาทีได้ incubated ค้างคืนกับแอนตี้หลัก (ยกเว้น 1:600 – 1:2000 1% บีเอส เอ/PBS) ในหอชุ่มชื่นที่4 ค.ตรวจสอบและแสดงสถานะของแอนตี้หลักเสร็จสมบูรณ์โดยใช้ Histofine Immunohistochemistry Kit(นิชิเร โตเกียว ญี่ปุ่น) และ diaminobenzidine (เล็กน้อย) ตามโพรโทคอลของผู้ผลิต ภาพนิ่ง immunohistochemistry ควบคุมได้รับการรักษากับบีเอสเอในพลาสม่ากระต่ายปกติและ PBSแทนแอนติบอดีหลักกำหนดเจาะจงการเกิดปฏิกิริยาของแอนติบอดีรอง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การปรากฏตัวของเซลล์สืบพันธุ์และเซลล์ร่างกายในรังไข่ได้รับการ
ตรวจสอบ immunohistochemically ใช้เครื่องหมายสำหรับเชื้อโรคและ
เซลล์ร่างกาย dehydrogenase 3b-hydroxysteroid (3b-HSD)
ถูกใช้เป็นเครื่องหมายสำหรับเตียรอยด์ที่ผลิตเซลล์ร่างกายและแว
สำหรับเซลล์สืบพันธุ์ แวเป็นแอนติเจนที่เฉพาะเจาะจงที่ผลิตโดยช่วงเริ่มต้น
เซลล์สืบพันธุ์ (โคบายาชิ et al., 2002) โปรตีน 3b-HSD เป็นภาษาท้องถิ่นใน
สิ่งของและเซลล์ theca (โคบายาชิ et al., 1996) ความจำเพาะของ
แอนติบอดีต่อปลานิล 3b-HSD หรือโปรตีนแวถูกก่อนหน้านี้
การตรวจสอบและรายงานอื่น ๆ (โคบายาชิ, et al, 1996;.
. โคบายาชิ, et al, 2002) วิธี immunocytochemistry ของมาตรฐาน
ที่ใช้ในการเปื้อนเชื้อโรคและเซลล์ร่างกาย สั้น ๆ ห้าไมโครเมตร
ส่วนอวัยวะสืบพันธุ์ได้จัดทำพาราฟินและ deparaffinized กับ
ไซลีน, เอทานอลในคืนรูปช้าและล้างในที่สุด
0.1 M พีบีเอส พวกเขาได้รับการรักษาแล้วกับ 3% H2O2for 20 นาทีเพื่อยับยั้งกิจกรรม peroxidase ภายนอก เพื่อขจัดความไม่เฉพาะเจาะจง
ผูกพันภาพนิ่งถูกบ่มด้วยเซรั่มแพะปกติ 15% สำหรับ
15 นาที ตัวอย่างถูกบ่มค้างคืนกับแอนติบอดีหลัก (ปรับลดที่ 1: 600-1: 2000 ใน 1% BSA / พีบีเอส) ในห้องชื้นที่
4 องศาเซลเซียส การตรวจสอบและแสดงภาพของแอนติบอดี้ที่ถูกหลัก
เสร็จสมบูรณ์โดยใช้ Histofine immunohistochemistry Kit
(นิชิเรโตเกียวประเทศญี่ปุ่น) และ diaminobenzidine (DAB) ตาม
โปรโตคอลของผู้ผลิต สไลด์ควบคุมสำหรับ immunohistochemistry ได้รับการรักษากับบีเอสเอพีบีเอสในพลาสม่าและกระต่ายปกติ
แทนแอนติบอดีหลักในการตรวจสอบที่ไม่เฉพาะเจาะจง
ปฏิกิริยาของแอนติบอดีรอง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การปรากฏตัวของเชื้อโรคและเซลล์โซมาติกเซลล์ในรังไข่ถูก
immunohistochemically ตรวจสอบการใช้เครื่องหมายสำหรับเชื้อโรค
โซมาติกเซลล์ 3B hydroxysteroid dehydrogenase ( 3B HSD )
ถูกใช้เป็นเครื่องหมายสำหรับการผลิตเซลล์โซมาติกและ Vasa
สำหรับเซลล์สืบพันธุ์ วาซาเป็นแอนติเจนเฉพาะผลิตโดยช่วงแรก
เซลล์สืบพันธุ์ ( โคบายาชิ et al . , 2002 ) ดำเนินการในโปรตีนเป็นภาษาท้องถิ่นใน
และเซลล์ ( interstitial ทีคาโคบายาชิ et al . , 1996 ) ความจำเพาะของ
แอนติบอดีต่อปลานิล 3B HSD หรือ Vasa โปรตีนก่อนหน้านี้
ตรวจสอบและรายงานอื่น ๆ ( โคบายาชิ et al . , 1996 ;
โคบายาชิ et al . , 2002 )
วิธีการมาตรฐานสำหรับใช้กับคราบเชื้อโรคและโซมาติกเซลล์ สั้น 5 ไมโครเมตร
ท้องน้อยส่วนเตรียมในพาราฟิน และ deparaffinized
ไซลีนด้วย ,ได้ทำการ รีไฮเดรทมในระดับเอทานอล และสุดท้าย ล้างใน 0.1 M
PBS จากนั้นได้รับ 3% h2o2for 20 นาทีเพื่อยับยั้งกิจกรรมเอนไซม์ภายใน . เพื่อขจัดเฉพาะ
ผูก สไลด์ถูกบ่มด้วย 15 % ปกติแพะซีรั่มสำหรับ
15 นาที จำนวน บ่มค้างคืนกับแอนติบอดีประถมศึกษา ( เจือจาง 1:600 – 1:2000 1% BSA / PBS ) ในห้องชุ่มชื้นที่ 
4 Cการตรวจหาและการมองเห็นของแอนติบอดีปฐมภูมิ
เสร็จใช้ histofine หลอดชุด
( มอสโก , โตเกียว , ญี่ปุ่น ) และ diaminobenzidine ( DAB ) ตาม
โปรโตคอลของผู้ผลิต ภาพนิ่งหลอดควบคุมได้รับการรักษาด้วย BSA ใน PBS และกระต่าย
ปกติพลาสม่าแทนแอนติบอดีประถมศึกษาเฉพาะ
ประสิทธิภาพของการมัธยมศึกษา