2.4.2. Analysis of phenolic compoun

2.4.2. Analysis of phenolic compounds by HPLC
Reverse phase (RP)-HPLC system for the analysis of phenolic
compounds was used, comprising of Shimadzu LC-20AC pumps, a
SPD-M20A diode array detector and a LUNA C-18 column
(4.6 250 mm i.d., 5 lm). The composition of the solvents and
the gradient elution conditions used were described previously
by Bengoechea et al. (1997) and followed by Butsat, Weerapreeyakul,
and Siriamornpun (2009) with some modifications.
The mobile phase consisted of purified water with acetic acid
(pH 2.74) (solvent A) and acetonitrile (solvent B) at a flow rate of
0.8 ml/min. Gradient elution was performed as follows: from 0 to
5 min, linear gradient from 5% to 9% solvent B; from 5 to 15 min,
9% solvent B; from 15 to 22 min, linear gradient from 9% to 11% solvent
B; from 22 to 38 min, linear gradient from 11% to 18% solvent
B; from 38 to 43 min, from 18% to 23% solvent B; from 43 to
44 min, from 23% to 90% solvent B; from 44 to 45 min, linear gradient
from 90% to 80% solvent B; from 45 to 55 min, isocratic at
80% solvent B; from 55 to 60 min, linear gradient from 80 to 5% solvent
B and a re-equilibration period of 5 min with 5% solvent B
used between individual runs. Operating conditions were as follows:
column temperature, 38 C, injection volume, 20 ll, and
UV-diode array detection at 280 nm (hydroxybenzoic acids),
320 nm (hydroxycinnamic acids) and 350 nm (flavonols) at a
flow-rate of 0.8 ml/min. The spectra were recorded from 200 to
600 nm. The phenolic compounds in the samples were identified
by comparing their relative retention times and UV spectra with
those of authentic compounds and were detected using an external
standard method.

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4.2 . การวิเคราะห์สารประกอบฟีนอลโดยเฟสกลับ 4
( RP ) - 2 ระบบสำหรับการวิเคราะห์สารประกอบฟีนอลิก
ใช้ประกอบด้วย Shimadzu lc-20ac ปั๊ม ,
spd-m20a ไดโอดเรย์ตรวจจับและลูน่า - คอลัมน์
( 4.6 250 มม. บัตร 5 กล. ) องค์ประกอบของสารละลาย และใช้เงื่อนไขการใช้

ไว้ก่อนหน้านี้ โดย bengoechea et al . ( 1997 ) และตามด้วย butsat ,weerapreeyakul
siriamornpun ( 2009 ) , และมีการปรับเปลี่ยน
เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยบริสุทธิ์น้ำที่มีกรด ( pH 2.74 )
( ตัวทำละลาย ) และไน ( ตัวทำละลาย B ) ที่อัตราการไหล
0.8 มิลลิลิตร / นาที ไล่ระดับได้มาดำเนินการดังนี้ 0
5 นาที เชิงเส้น ไล่ระดับ จาก 5% 9% ตัวทำละลาย B ; 5 - 15 นาที ,
9 % ตัวทำละลาย B ; จาก 15 ถึง 22 นาทีเชิงเส้น ไล่ระดับจาก 9% 11% ตัวทำละลาย
b ; จาก 22 ถึง 38 นาที เส้นไล่ระดับจากร้อยละ 11 ถึง 18 % ละลาย
b ; จาก 38 43 นาทีจาก 18% ถึง 23 % ตัวทำละลาย B ;

จาก 43 44 นาที จาก 23 % 90 % จาก 44 ในตัวทำละลาย B ; 45 นาที
ลาดเชิงเส้นจาก 90% 80% ตัวทำละลาย B ; 45 ถึง 55 นาทีที่ 80 %
Isocratic ตัวทำละลาย B จาก 55 ถึง 60 นาที เส้นไล่ระดับจาก 80 % 5
.B และอีกครั้ง equilibration ระยะเวลา 5 นาทีกับ 5 % ตัวทำละลาย B
ใช้ระหว่างวิ่งของแต่ละบุคคล เงื่อนไขมีดังนี้
คอลัมน์อุณหภูมิ 38 องศาเซลเซียส การฉีดปริมาณ 20 จะและอาร์เรย์การตรวจสอบไดโอด
UV 280 nm ( hydroxybenzoic กรด ) ,
320 nm ( hydroxycinnamic กรด ) และ 350 nm ( flavonols ) ที่
0.8 มิลลิลิตร / นาที อัตราการไหลของสเปกตรัมที่ถูกบันทึกไว้จาก 200

600 นาโนเมตรสารประกอบฟีนอลในตัวอย่างที่ระบุโดยการเปรียบเทียบครั้ง
ญาติและ UV แสงกับ
เหล่านั้นสารประกอบของแท้และถูกตรวจพบใช้ภายนอก

ตรวจมาตรฐาน