To test that these 5 primer pairs w

To test that these 5 primer pairs were specific to the targetpathogens, the primer sequenceswere used to search against the National Center for Biotechnology Information (NCBI) databases using the Basic Local Alignment Tool (BLAST) [24].
Amplification of m-PCR and analysis of its products m-PCR amplification system in 25 lL of reaction mixtures
was as follows: 2 lL of extracted DNA, PCR buffer (20 mM Tris hydrochloride pH 8.4, 50 mM KCl and 2.0 mM MgCl2), 0.2 mM of each dNTP, 1.25 U of Taq DNA polymerase (D334A, TakaRa Dalian, China), SAL-F and SAL-R 0.08 lM, LIS-F, LIS-R, ESC-F and ESC-R 0.06 lM, YE-F and YE-R 0.256 lM, ST-F and ST-R 0.4 lM, 16S-F and 16S-R 0.03 lM. The PCR amplification was performed in a Mastercycler ep cycler (Eppendorf Germany) under the following conditions: heat denaturation at 95 C for 5 min followed by 35 cycles of heat denaturation at 95 C for 50 s, primer annealing at 54 C for 40 s and DNA extension at 72 C for 50 s. This was followed by incubation at 72 C for 7 min [18] and cooling at 4 C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เพื่อทดสอบว่า รองพื้น 5 คู่นี้ได้เฉพาะ targetpathogens, sequenceswere พื้นที่ใช้ค้นหากับศูนย์แห่งชาติในฐานข้อมูลข้อมูลเทคโนโลยีชีวภาพ (NCBI) โดยใช้การพื้นฐานท้องถิ่นตำแหน่งเครื่องมือ (ระเบิด) [24]ขยายของ m-PCR และการวิเคราะห์ของผลิตภัณฑ์ PCR เมตรขยายระบบ 25 จะส่วนผสมของปฏิกิริยามีดังนี้: 2 จะแยกดีเอ็นเอ PCR ของ dNTP แต่ละ 0.2 mM, 1.25 U Taq DNA พอลิเมอเรส (D334A, TakaRa ต้าเหลียน จีน), แซล F และแซล-R 0.08 lM, LIS F, LIS-R, ESC F และ ESC-R 0.06 lM, YE-F และ YE-R 0.256 lM, ST-F และ ST-R 0.4 lM, 16S F และ 16S-R $ 0.03 (20 mM ทริสเรทติ้งไฮโดรคลอไรด์ pH 8.4, KCl 50 มม.และ 2.0 มม. MgCl2), กันชน lM ขยาย PCR ถูกดำเนินการในการ Mastercycler ep cycler (Eppendorf เยอรมนี) ภายใต้เงื่อนไขต่อไปนี้: denaturation ความร้อนที่ 95 C สำหรับ 5 นาทีตาม ด้วยรอบ 35 ของ denaturation ความร้อนที่ 95 C สำหรับ 50 s พื้นการอบเหนียวที่ 54 C 40 s และภายในดีเอ็นเอที่ 72 C สำหรับ 50 s นี้ถูกตาม ด้วยคณะทันตแพทยศาสตร์ที่ 72 C สำหรับ 7 นาที [18] และระบายความร้อนที่ค. 4

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อทดสอบว่าเหล่านี้ 5 ไพรเมอร์คู่เป็นเฉพาะกับ targetpathogens , ไพรเมอร์ sequenceswere ใช้ค้นหากับศูนย์ข้อมูลเทคโนโลยีชีวภาพแห่งชาติ ( ncbi ) ฐานข้อมูลโดยใช้เครื่องมือพื้นฐานแนวท้องถิ่น ( ระเบิด ) [ 24 ] .
แบบ m-pcr และการวิเคราะห์ของผลิตภัณฑ์ m-pcr ขยายระบบใน 25 จะปฏิกิริยาผสม
เช่น 1 : 2 จะสกัดดีเอ็นเอ PCR buffer (20 mM Tris hydrochloride pH 8.4, 50 mM KCl and 2.0 mM MgCl2), 0.2 mM of each dNTP, 1.25 U of Taq DNA polymerase (D334A, TakaRa Dalian, China), SAL-F and SAL-R 0.08 lM, LIS-F, LIS-R, ESC-F and ESC-R 0.06 lM, YE-F and YE-R 0.256 lM, ST-F and ST-R 0.4 lM, 16S-F and 16S-R 0.03 lM. The PCR amplification was performed in a Mastercycler ep cycler (Eppendorf Germany) under the following conditions: heat denaturation at 95 C for 5 min followed by 35 cycles of heat denaturation at 95 C for 50 s, primer annealing at 54 C for 40 s and DNA extension at 72 C for 50 s. This was followed by incubation at 72 C for 7 min [18] and cooling at 4 C.