Background: Alpha-thalassaemia is a

Background: Alpha-thalassaemia is an autosomal recessive disorder characterized by defective production of the
alpha chain of haemoglobin. It is caused mainly by deletions of one or both of the duplicated alpha-globin genes
on chromosome 16, and/or by nucleotide variations, known as “nondeletion” mutations. Definition of the alpha
globin genotype in carriers supports genetic counselling, and in patients with Hb H disease is useful to predict
prognosis and management options. Here, we report a method that facilitates direct detection by naked eye of
the 13 most common “nondeletion” alpha-globin gene mutations in populations around the Mediterranean
and Middle East.
Methods and results: Themethod comprises (i) PCR amplification of a single 1087 bp fragment for each HBA1 and
HBA2 gene (separately); (ii)multiplex primer extension reaction of just 10 cycles, using unpurified amplification
product as a template, to incorporate biotin into those allele-specific primers that extend and, finally, (iii) visual
detection of the reaction products within minutes by the dipstick biosensor. The method was evaluated by
analysing 105 samples of known genotypes and the results were found fully concordant with those obtained
by the reference methods.
Conclusions: The proposed assay is particularly suited for small molecular-diagnostic laboratories with a limited
budget and a low-to-medium sample volume. In addition this platform represents a very simple and useful
genotyping tool to support gene scanning methods whenever nucleotide variations have to be specified.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Background: Alpha-thalassaemia is an autosomal recessive disorder characterized by defective production of thealpha chain of haemoglobin. It is caused mainly by deletions of one or both of the duplicated alpha-globin geneson chromosome 16, and/or by nucleotide variations, known as “nondeletion” mutations. Definition of the alphaglobin genotype in carriers supports genetic counselling, and in patients with Hb H disease is useful to predictprognosis and management options. Here, we report a method that facilitates direct detection by naked eye ofthe 13 most common “nondeletion” alpha-globin gene mutations in populations around the Mediterraneanand Middle East.Methods and results: Themethod comprises (i) PCR amplification of a single 1087 bp fragment for each HBA1 andHBA2 gene (separately); (ii)multiplex primer extension reaction of just 10 cycles, using unpurified amplificationproduct as a template, to incorporate biotin into those allele-specific primers that extend and, finally, (iii) visualdetection of the reaction products within minutes by the dipstick biosensor. The method was evaluated byanalysing 105 samples of known genotypes and the results were found fully concordant with those obtainedby the reference methods.Conclusions: The proposed assay is particularly suited for small molecular-diagnostic laboratories with a limitedbudget and a low-to-medium sample volume. In addition this platform represents a very simple and usefulเครื่องมือ genotyping สนับสนุนวิธีสแกนยีนเมื่อมีการเปลี่ยนแปลงของนิวคลีโอไทด์มีการระบุ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ประวัติ : เป็นยีนด้อยแอลฟาทาลัสซีเมียโรคลักษณะการผลิตของห่วงโซ่ของฮีโมโกลบิน
เราบกพร่อง มันเป็นสาเหตุหลัก โดยลบของหนึ่งหรือทั้งสองของอัลฟาโกลบินยีนๆ
บนโครโมโซมคู่ที่ 16 และ / หรือการเปลี่ยนแปลงนิวคลีโอไทด์ เรียกว่า " nondeletion " การกลายพันธุ์ คำนิยามของอัลฟาโกลบินยีนพันธุกรรมในผู้ให้บริการ
สนับสนุนให้คำปรึกษาและในผู้ป่วยโรคฮีโมโกลบินเอชเป็นประโยชน์ที่จะทำนาย
พยากรณ์โรคและการจัดการเลือก ที่นี่เรารายงานวิธีการที่อำนวยความสะดวกในการตรวจสอบโดยตรงด้วยตาเปล่าของ
13 ที่พบมากที่สุด " nondeletion " แอลฟาโกลบินยีนกลายพันธุ์ในประชากรรอบทะเลเมดิเตอร์เรเนียนและตะวันออกกลาง
.
วิธีการและผลลัพธ์ : วิธีการประกอบด้วย ( 1 ) PCR แบบเดี่ยวและคู่เบสแต่ละ hba1 และ
hba2 ยีน ( แยก ) ; ( 2 ) ปฏิกิริยา multiplex รองพื้นขยายเพียง 10 รอบ ใช้ผลิตภัณฑ์ (
unpurified เป็นแม่แบบรวม biotin ในอัลลีลไพรเมอร์ที่จำเพาะต่อและสุดท้าย ( 3 ) ภาพ
ตรวจจับผลิตภัณฑ์ปฏิกิริยาภายในไม่กี่นาที โดยชนิดไบโอเซนเซอร์ . วิธีการประเมินโดย
วิเคราะห์ 105 คนรู้จักสายพันธุ์ และพบความสอดคล้องกันอย่างเต็มที่กับผู้รับโดยอ้างอิง

สรุป : เสนอวิธี ทดสอบ เหมาะอย่างยิ่งสำหรับการวินิจฉัยโมเลกุลขนาดเล็กที่มีงบประมาณ จำกัด ห้องปฏิบัติการ
และต่ำปริมาณตัวอย่างขนาดกลาง นอกจากนี้แพลตฟอร์มนี้เป็นง่ายมากและมีประโยชน์
ส่งเสริมเครื่องมือสนับสนุนการสแกนวิธีการลำดับเบสยีนที่เปลี่ยนแปลงจะต้องระบุ