AbstractBACKGROUND:Trichinella spir

Abstract
BACKGROUND:
Trichinella spiralis expresses paramyosin (Ts-PMY) not only as a structural protein but also as an immunomodulatory protein to protect the worm from being attacked by host complement components. In this study, the functions of PMY in the viability and the growth development of T. spiralis were confirmed at the first time by silencing the gene function with RNA interference technique.
METHODS AND FINDINGS:
To understand its functions in the viability of the worm, we used RNA interference to silence the expression of Ts-pmy mRNA and protein in the parasite. Significant silencing of Ts-pmy mRNA expression in larval and adult T. spiralis was achieved by siRNA and dsRNA through soaking and electroporation. Electroporation of T. spiralis larvae with 8 µM siRNA1743 or 100 ng/µl dsRNA-PF3 resulted in 66.3% and 60.4% decrease in Ts-pmy transcript and 52.0% and 64.7% decrease in Ts-PMY protein expression, respectively, compared with larvae treated with irrelevant control siRNA or dsRNA. Larvae treated with siRNA1743 displayed significant reduction in molting (40.8%) and serious surface damage as detected with SYTOX fluorescent staining. Infection of mice with larvae electroporated with Ts-pmy siRNA1743 resulted in 37.6% decrease in adult worm burden and 23.2% decrease in muscle larvae burden compared with mice infected with control siRNA-treated larvae. In addition, adult worms recovered from mice infected with siRNA-treated larvae released 24.8% less newborn larvae.
CONCLUSION:
It is the first time RNAi was used on T. spiralis to demonstrate that silencing PMY expression in T. spiralis significantly reduces the parasite's viability and infectivity, further confirming that Ts-PMY plays an important role in the survival of T. spiralis and therefore is a promising target for vaccine development.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อพื้นหลัง:Trichinella spiralis แสดง paramyosin (Ts PMY) ไม่เพียง เป็นโปรตีนโครงสร้าง แต่ยัง เป็นการโปรตีนภูมิคุ้มกันแบคทีเรียเพื่อป้องกันหนอนจากการถูกโจมตีโดยคอมโพเนนต์เสริมโฮสต์ ในการศึกษานี้ ฟังก์ชันของ PMY ในในเชิงและการพัฒนาเจริญเติบโตของ T. spiralis ถูกยืนยันเป็นครั้งแรก โดยสมรฟังก์ชันยีน ด้วยเทคนิครบกวน RNAวิธีการและผลการศึกษา:เข้าใจการทำในชีวิตของหนอน เราใช้รบกวน RNA เพื่อปิดการแสดง Ts pmy mRNA และโปรตีนในปรสิต สมรสำคัญของ mRNA Ts pmy อ่อน และผู้ใหญ่ T. spiralis สำเร็จ โดย siRNA และ dsRNA ที่ผ่านการแช่และ electroporation Electroporation ของ T. spiralis ตัวอ่อน 8 µM siRNA1743 หรือ 100 ฉบับ/µl dsRNA PF3 ผลใน 66.3% และ 60.4% ลดเสียงบรรยาย Ts pmy และ 52.0% และ 64.7% ลดแสดงออกของโปรตีน Ts PMY ตามลำดับ เมื่อเทียบกับตัวอ่อนถือว่า dsRNA หรือ siRNA ควบคุมไม่เกี่ยวข้อง อ่อนด้วย siRNA1743 แสดงสำคัญลด molting (40.8%) และจริงจังเสียตรวจพบ ด้วยการย้อมสีเรืองแสง SYTOX ติดเชื้อของหนูด้วย electroporated อ่อนกับ Ts pmy siRNA1743 ผลใน 37.6% ลดภาระหนอนผู้ใหญ่และลดลง 23.2% ภาระอ่อนกล้ามเนื้อเมื่อเทียบกับหนูที่ติดเชื้อตัวอ่อนถือว่า siRNA ควบคุม นอกจากนี้ หนอนผู้ใหญ่กู้จากหนูที่ติดเชื้อตัวอ่อนถือว่า siRNA ออก 24.8% น้อยกว่าทารกแรกเกิดตัวอ่อนสรุป:มันเป็นครั้งแรกที่ใช้ RNAi ใน T. spiralis การสาธิตว่า สมร PMY นิพจน์ใน T. spiralis ลดชีวิตของปรสิตและ infectivity ยืนยันเพิ่มเติม ว่า Ts PMY มีบทบาทสำคัญในการอยู่รอดของ T. spiralis และมีเป้าหมายแนวโน้มการพัฒนาวัคซีน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

บทคัดย่อภูมิหลัง:
Trichinella spiralis แสดงออก paramyosin (Ts-พีเอ็มวาย) ไม่เพียง แต่เป็นโปรตีนที่มีโครงสร้าง แต่ยังเป็นโปรตีนภูมิคุ้มกันเพื่อป้องกันหนอนจากการถูกโจมตีโดยส่วนประกอบส่วนประกอบโฮสต์ ในการศึกษานี้การทำงานของพีเอ็มวายในการมีชีวิตและการพัฒนาเจริญเติบโตของ spiralis ตันได้รับการยืนยันในเวลาห้ามไม่ให้พูดเป็นครั้งแรกโดยฟังก์ชั่นของยีนด้วยเทคนิคการแทรกแซงอาร์เอ็นเอ.
วิธีการและผลการวิจัย:
เพื่อให้เข้าใจถึงการทำงานในชีวิตของหนอนที่ เราใช้การแทรกแซงอาร์เอ็นเอที่จะเงียบแสดงออกของ mRNA Ts-พีเอ็มวายและโปรตีนในปรสิตที่ ห้ามไม่ให้พูดอย่างมีนัยสำคัญในการแสดงออกของ mRNA Ts-พีเอ็มวายในตัวอ่อนและผู้ใหญ่ spiralis ตันได้สำเร็จโดย siRNA dsRNA และผ่านการแช่และ electroporation Electroporation ตันของตัวอ่อน spiralis กับ 8 ไมครอน siRNA1743 100 ng / ไมโครลิตร dsRNA-PF3 ผลใน 66.3% และลดลง 60.4% ในหลักฐาน Ts-พีเอ็มวายและ 52.0% และลดลง 64.7% ในการแสดงออกของโปรตีน Ts-พีเอ็มวายตามลำดับเมื่อเทียบกับตัวอ่อน ได้รับการปฏิบัติที่ไม่เกี่ยวข้องกับการควบคุม siRNA หรือ dsRNA ตัวอ่อนรับการรักษาด้วย siRNA1743 แสดงลดความสำคัญในการลอกคราบ (40.8%) และความเสียหายของพื้นผิวที่ร้ายแรงที่สุดเท่าที่ตรวจพบมีการย้อมสีเรืองแสง SYTOX การติดเชื้อของหนูที่มีตัวอ่อน electroporated กับ Ts-พีเอ็มวาย siRNA1743 ผลในการลดลง 37.6% ภาระหนอนผู้ใหญ่และลดลง 23.2% ภาระตัวอ่อนกล้ามเนื้อเมื่อเทียบกับหนูที่ติดเชื้อที่มีการควบคุมตัวอ่อน siRNA ได้รับการรักษา นอกจากนี้หนอนโตหายจากหนูที่ติดเชื้อตัวอ่อน siRNA ที่ได้รับการปล่อยตัวออกมา 24.8% น้อยตัวอ่อนทารกแรกเกิด.
สรุป:
มันเป็นครั้งแรกที่ถูกนำมาใช้ RNAi ใน spiralis ตันแสดงให้เห็นว่าห้ามไม่ให้พูดการแสดงออกในพีเอ็มวายต spiralis อย่างมีนัยสำคัญจะช่วยลดความมีชีวิตของปรสิต และการติดเชื้อต่อไปยืนยันว่า Ts-พีเอ็มวายมีบทบาทสำคัญในการอยู่รอดของที spiralis และดังนั้นจึงเป็นเป้าหมายที่มีแนวโน้มสำหรับการพัฒนาวัคซีน