2. MATERIALS AND METHODS2.1 Sugarca

2. MATERIALS AND METHODS
2.1 Sugarcane Bagasses
Sugarcane bagasses originating from
the Kornburi factory producing sugar in
Thailand were dried in an oven in
temperature range of 50-60°C for 20 hours,
then ground in a ball mill, screened into
size ranges of 63-53, 106-63, 150-106,
212-150 and 1180-212 μm, and kept in a
desiccator prior to testing. Lignin contents
were determined as Klason lignin following
the ASTM D-1106 standard method [12].
2.2 Microorganisms and Growth
Conditions
Clostridium butyricum (TISTR 1032),
Clostridium sporogenes (TISTR 1452), Clostridium
beijerinckii (TISTR 1461) and Clostridium
acetobutylicum (TISTR 1462) were grown
separately in cooked meat medium (CMM;
Difco Laboratories, Detroit, MI, USA) with
composition of 454 g/l beef heart, 20 g/l
bactoproteose peptone, 2 g/l bacto dextrose,
and 5 g/l NaCl. The cooked meat medium
was sterilized by an autoclave at 121°C for
15 minutes.
2.3 Acid Hydrolysis
In this step, sugarcane bagasse was
hydrolyzed with dilute sulfuric acid and
heat treatment. Dried sugarcane bagasses
were added to different concentrations of
sulfuric acid solution (0.25-1 % v/v). The
pulp was prepared at different solid/liquor
ratios of 1:10, 1:15 and 1:20 (g dry weight
of sugarcane bagasse: ml of sulfuric acid
solution) in a conical flask with screw cap.
These experiments were carried out at 30, 70,
and 80°C using a water-bath shaker for
1 hour and at 121°C using an autoclave for
15 minutes and 1 hour. All experiments
were replicated three times. The hydrolyzed
solution was adjusted its pH to about 7 with
NaOH, then passed through a filter paper
and microfiltration (Clyde filter, 0.2 μm) and
subsequently diluted with sterile distilled
water prior to the analysis of glucose and
xylose.
2.4 Fermentation
All batch experiments of Clostridium sp.
were carried out in a conical flask with screw
cap containing 90 ml of previously sterilized
medium for 48 hours of fermentation time
at 37°C under anaerobic and static
conditions. The medium that contained
glucose and xylose from sugarcane bagasse
hydrolysate was chosen for the growth of
Clostridium sp. The medium was autoclaved
at 121°C for 15 min followed by cooling
under oxygen free nitrogen gas environment
which was created by sweeping the gas across
medium surface. This anaerobic condition in
the fermenter followed the method of
Qureshi et al. [7]. The 24 hr-bacterial cell
measured by a microscope counting chamber
(hemocytometer) was about 2 × 109 cells/ml.
A 10 % (v/v) inoculum of the bacteria was
added to a series of flasks. Two flasks were
removed to provide duplicate samples for
each data point. The fermentation broth was
passed through a microfiltration (Clyde filter,
0.2 μm) and subsequently analyzed the
concentration of fermentation products viz.,
acetone, butanol and ethanol by HPLC.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2 bagasses วัสดุและวิธีการ bagasses

2.1 อ้อยอ้อยที่มาจากโรงงานผลิต
น้ำตาล kornburi ในประเทศไทย
แห้งในเตาอบใน
ช่วงอุณหภูมิ 50-60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 ชั่วโมง
แล้วพื้นในโรงงานลูกคัดเลือกเป็น
ช่วงขนาดของ 63-53, 106-63, 150-106, 212-150
และ 1180-212 ไมโครเมตรและเก็บไว้ใน
แขวนก่อนที่จะมีการทดสอบ เนื้อหาลิกนิน
ได้รับการพิจารณาเป็น klason ลิกนินต่อไปนี้
ASTM D-1106 วิธีมาตรฐาน [12].
2.2 จุลินทรีย์และการเจริญเติบโต

เงื่อนไข Clostridium butyricum (TISTR 1032)
sporogenes Clostridium (TISTR 1452), Clostridium
beijerinckii (TISTR 1461) และ Clostridium
acetobutylicum (TISTR 1462) มีการเติบโต
แยกต่างหากในกลางเนื้อสุก (CMM;
ห้องปฏิบัติการ difco, ดีทรอยต์, ไมล์, usa) ด้วย
องค์ประกอบของ 454 g / l หัวใจเนื้อวัว, 20 g / l
bactoproteose เปปโตน, 2 กรัม / ลิตร bacto เดกซ์โทรส
และ 5 กรัม / ลิตรโซเดียมคลอไรด์ กลางเนื้อสุก
ได้รับการฆ่าเชื้อด้วยหม้อนึ่งความดันที่ 121 ° C เป็นเวลา 15 นาที
.
2.3 กรดไฮโดรไลซิ
ในขั้นตอนนี้ชานอ้อยเป็นไฮโดรไลซ์ด้วย
กรดซัลฟูริกเจือจางและ
การรักษาความร้อน แห้ง bagasses อ้อย
มีการเพิ่มความเข้มข้นแตกต่างกันของ
สารละลายกรดซัลฟูริก (025-1% v / v)
เยื่อเตรียมที่แข็ง / สุรา
อัตราส่วนที่แตกต่างกันของ 1:10, 1:15 และ 1:20 (กรัมน้ำหนักแห้ง
อ้อยชานอ้อย: มิลลิลิตรของกรดกำมะถัน
โซลูชั่น). ในขวดรูปกรวยที่มีฝาเกลียว
เหล่านี้ การทดลองได้รับการดำเนินการวันที่ 30, 70, และ 80
องศาเซลเซียสโดยใช้เครื่องปั่นน้ำอาบน้ำ
1 ชั่วโมงและ 121 องศาเซลเซียสโดยใช้หม้อนึ่งความดันเพื่อ
15 นาทีและ 1 ชั่วโมง การทดลองทั้งหมด
ถูกทำซ้ำสามครั้ง
โซลูชั่นไฮโดรไลซ์มีการปรับพีเอชในการประมาณ 7 ด้วย
naoh ผ่านแล้วผ่านกระดาษกรอง
และไมโคร (กรอง clyde, 0.2 ไมครอน) และต่อมา
เจือจางด้วยน้ำกลั่น
ผ่านการฆ่าเชื้อก่อนที่จะมีการวิเคราะห์ของน้ำตาลกลูโคสและไซโลส


2.4 การหมักการทดลองทุกชุดของ Clostridium เอสพี.
ถูกดำเนินการในขวดรูปกรวยที่มีสกรู
หมวกที่มี 90 มล. ของการฆ่าเชื้อก่อนหน้านี้
กลางเป็นเวลา 48 ชั่วโมงของเวลาการหมัก
ที่ 37 ° C ภายใต้การเพาะกายและคง
เงื่อนไข กลางที่มี
กลูโคสและไซโลสจากชานอ้อย
ไฮโดรไลเสตเป็นทางเลือกสำหรับการเจริญเติบโตของเอสพี
Clostridium กลางเป็นเบา
ที่ 121 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาทีตามด้วยการระบายความร้อน
ภายใต้สภาพแวดล้อมที่ออกซิเจนฟรีก๊าซไนโตรเจน
ซึ่งถูกสร้างขึ้นโดยกวาดก๊าซทั่ว
พื้นผิวกลางสภาพไร้ออกซิเจนในถังหมัก
ตามวิธีการของ
เรชิเอตอัล [7] 24 ชั่วโมงแบคทีเรียเซลล์
วัดจากกล้องจุลทรรศน์นับห้อง
(hemocytometer) ประมาณ 2 × 109 เซลล์ / ml.
10% (v / v) เชื้อแบคทีเรียที่เป็น
เข้ามาอยู่ในชุดของขวด สองขวดถูก
ออกไปให้กลุ่มตัวอย่างที่ซ้ำกันเพื่อ
แต่ละจุดข้อมูล น้ำหมักเป็น
ผ่าน microfiltration (กรอง clyde
0.2 ไมครอน) และต่อมาวิเคราะห์
ความเข้มข้นของผลิตภัณฑ์หมัก ได้แก่ . อะซีโตนบิวทานอ
และเอทานอลโดย hplc

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธี
2.1 Bagasses อ้อย
bagasses อ้อยเกิดจาก
Kornburi โรงงานผลิตน้ำตาลใน
ไทยถูกอบแห้งในเตาอบใน
ช่วงอุณหภูมิ 50-60 องศาเซลเซียส 20 ชั่วโมง,
แล้ว พื้นในโรงสีลูก ฉายเป็น
ขนาดช่วง 150-106 106-63, 63-53
μm 212-150 และ 1180-212 และเก็บไว้ใน
desiccator ก่อนทดสอบ เนื้อหา lignin
ถูกกำหนดดังต่อไปนี้ lignin Klason
วิธีมาตรฐานของ ASTM D-1106 [12]
2.2 จุลินทรีย์และการเจริญเติบโต
เงื่อนไข
เชื้อ Clostridium butyricum (1032 วว),
เชื้อ Clostridium sporogenes (วว 1452), เชื้อ Clostridium
beijerinckii (1461 วว) และเชื้อ Clostridium
acetobutylicum (1462 วว) ได้ปลูก
แยกต่างหากในเนื้อสุก (CMM;
ปฏิบัติ Difco ดีทรอยต์ MI สหรัฐอเมริกา) กับ
องค์ประกอบของหัวใจเนื้อ 454 g/l, 20 g/l
bactoproteose peptone ขึ้น bacto 2 g/l,
5 g/l NaCl และ กลางเนื้อสุก
ถูก sterilized ตามด้วยการที่ 121° C สำหรับ
15 นาที.
2.3 กรดไฮโตรไลซ์
ในขั้นตอนนี้ ชานอ้อยอ้อยถูก
hydrolyzed ด้วยกรดซัลฟิวริก dilute และ
รักษาความร้อน แห้ง bagasses อ้อย
ได้เพิ่มความเข้มข้นแตกต่างกันของ
กรดซัลฟิวริกโซลูชัน (025 1% v/v)
เยื่อเตรียมไว้ที่ทึบต่าง ๆ เหล้า
อัตราส่วน 1:10, 1:20 และ 1:15 (กรัมน้ำหนักแห้ง
ของชานอ้อยอ้อย: มิลลิลิตรของกรดซัลฟิวริก
โซลูชัน) ในทรงกรวยหนาวด้วยสกรูฟิลด์
ทดลองเหล่านี้ได้ดำเนินการใน 30, 70,
และ 80° C โดยใช้น้ำน้ำเชคเกอร์สำหรับ
1 ชั่วโมงและ ที่ 121° C ใช้ด้วยสำหรับการ
15 นาทีและ 1 ชั่วโมง ทดลองทั้งหมด
ถูกจำลองแบบแล้ว 3 ครั้ง การ hydrolyzed
มีการปรับปรุงโซลูชัน pH ประมาณ 7 กับ
NaOH ผ่านกระดาษกรอง
microfiltration (กรองไคลด์ 0.2 μm) และ และ
มาผสมกับ กลั่นกอซ
น้ำก่อนการวิเคราะห์น้ำตาลใน และ
xylose
2.4 หมัก
ทุกชุดการทดลองของเชื้อ Clostridium sp.
ได้ดำเนินทรงกรวยหนาวด้วยสกรู
ฝา ml 90 มีของ sterilized ก่อนหน้านี้
กลางภายใน 48 ชั่วโมงของเวลาหมัก
ที่ 37° C ภายใต้ไม่ใช้ออกซิเจน และคง
เงื่อนไข สื่อที่อยู่
กลูโคสและ xylose จากชานอ้อยอ้อย
ด้วยถูกเลือกสำหรับการเติบโตของ
เชื้อ Clostridium sp สื่อถูก autoclaved
ที่ 121° C สำหรับ 15 นาทีตามความร้อน
ภายใต้ก๊าซออกซิเจนไนโตรเจนฟรีสภาพแวดล้อม
ซึ่งสร้าง โดยกวาดแก๊สข้าม
ผิวปานกลาง เงื่อนไขนี้ไม่ใช้ใน
fermenter ที่ตามวิธีการของ
Qureshi et al. [7] 24 ชั่วโมงแบคทีเรียเซลล์
วัด โดย chamber
(hemocytometer) นับเป็นกล้องจุลทรรศน์ถูกประมาณ 2 × 109 เซลล์ / มล.
inoculum 10% (v/v) ของแบคทีเรียถูก
เพิ่มชุดของน้ำ ได้นำสอง
เอาให้ตัวอย่างซ้ำสำหรับ
แต่ละจุดข้อมูล ซุปหมักถูก
ผ่านแบบ microfiltration (ไคลด์กรอง,
0.2 μm) และมาวิเคราะห์การ
เข้มข้นหมักผลิตภัณฑ์ได้แก่,
อะซิโตน บิวทานอ และเอทานอล โดย HPLC

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ

2.1 ไร่อ้อยโรงงานน้ำตาลกลับกลับจาก
ที่ kornburi โรงงานน้ำตาลทรายใน
ซึ่งจะช่วยประเทศไทยก็แห้งในเตาอบใน
ช่วง อุณหภูมิ ของ 50-60 50-60 50-60 ° C สำหรับ 20 ชั่วโมง,
แล้วลงในลูก,ฉากเข้าสู่
ขนาดช่วงของ 63-53 , 106-63 , 150-106 ,
212-150 และ 1180-212 μ m ,และได้รับการดูแลรักษาให้อยู่ใน
เครื่องดูดความชื้นก่อนถึงการทดสอบแล้ว. lignin เนื้อหา
ตามมาตรฐานมีกำหนดให้เป็น klason lignin ต่อไปนี้:
ที่ ASTM D -1106 มาตรฐานวิธีการ[ 12 ].
2.2 จุลชีพและการขยายตัว

clostridium เงื่อนไข butyricum ( tistr 1032 ),
clostridium sporogenes ( tistr สีเงิน - 1452 ), clostridium
beijerinckii ( tistr 1461 )และ clostridium
acetobutylicum ( tistr 1462 )ได้เติบโต
แยกต่างหากในอาหารที่ปรุงสุกขนาดกลาง(ต้องนับ CMM ,;
difco Laboratories , Detroit , MI , USA )พร้อมด้วย
ส่วนประกอบของ 454 กรัม/ใจกลางเนื้อ L 20 กรัม/ L
bactoproteose เนื้อยุ่ยเมื่อถูกเพพซิน 2 กรัม/ L น้ำตาลเดคซ - ทโรซ bacto
และ NaCl 5 G / L . อาหารที่ปรุงมีขนาดกลาง
ซึ่งจะช่วยเป็นเชื้อ autoclave ที่ได้ที่ 121 ° C สำหรับ
15 นาที.
2.3 กรดหลักด้วย
ซึ่งจะช่วยในขั้นตอนนี้ใช้ชานอ้อยปลูกอ้อยเป็น
ซึ่งจะช่วยเจือจางต้มด้วยกรดเกลือจากนั้นจะถูกทำด้วยกรดซัลฟูริและการบำบัด
ความร้อน อ้อยแห้ง
ซึ่งจะช่วยกลับถูกเพิ่มลงในสาขาวิชาต่างๆของโซลูชัน
กรดซัลฟูริก( 025-1% v / v )
ออกจากโถแยกกากผลไม้ที่เตรียมไว้ที่แตกต่างกันเป็น/เหล้า
อัตราส่วน 1 : 10 , 1 : 15 และ 1 : 20 ( G แห้งน้ำหนัก
อ้อยชานอ้อย:มล.ของกรดซัลฟูริก
โซลูชัน)ในรูปกรวยทรงกลมกระติกน้ำด้วยขันสกรูฝาปิด.
เหล่านี้การทดลองได้ถูกออกจากที่ 30 , 70 ,
และ 80 ° C โดยใช้น้ำ - อ่างอาบน้ำเครื่องเขย่าสำหรับ
1 ชั่วโมงและที่ 121 ° C โดยใช้ autoclave สำหรับ
15 นาทีและ 1 ชั่วโมง. การทดลองทั้งหมดถูกทำซ้ำ
สามครั้ง
ต้มด้วยกรดเกลือจากนั้นจะถูกทำให้โซลูชันมีการปรับที่ pH ประมาณ 7 พร้อมด้วย
โซดาไฟแล้วผ่านตัวกรองกระดาษ
และ microfiltration ( Clyde แผ่นกรอง, 0.2 μ m )และ
ซึ่งจะช่วยเจือจางใน ภายหลัง ว่าฆ่าเชื้อขวดนมด้วยน้ำกลั่น
ซึ่งจะช่วยก่อนเพื่อการวิเคราะห์ของกลูโคสและ
xylose .

ทั้งหมด 2.4 หมักชุดข้อมูลการทดลองของ clostridium sp .
ได้ถูกออกมาในรูปทรงกรวยกระติกน้ำพร้อมด้วยสกรู
ฝาครอบที่มี 90 มล.เคยฆ่าเชื้อได้
มีขนาดกลางสำหรับ 48 ชั่วโมงของเวลาหมัก
ที่ C 37 °ตามเงื่อนไขเต็นแอโรบิคและไฟฟ้าสถิตย์
) มีขนาดกลางที่มีอยู่
กลูโคสและ xylose จากอ้อยใช้ชานอ้อย
ซึ่งจะช่วยย่อยน้ำตาลแลคโตสจะได้รับเลือกให้การขยายตัวของ
clostridium sp . มีขนาดกลางที่เป็น autoclaved
ในนาที 121 ° C สำหรับ 15 ตามด้วยระบบระบายความร้อน
สภาพแวดล้อม ก๊าซออกซิเจนในแบบไม่เสียค่าบริการไนโตรเจน
ซึ่งถูกสร้างขึ้นโดยในมุมกว้างก๊าซบนพื้นผิว
ขนาดกลางสภาพ เต็นแอโรบิคแห่งนี้ใน fermenter
ตามด้วยวิธีการ
qureshi et al . [ 7 ]. ที่ 24 ชั่วโมง - ฆ่าเชื้อแบคมีเรียเซลล์
ซึ่งจะช่วยได้จากการวัดโดยที่ช่องเก็บเศษหนวด
ซึ่งจะช่วยการนับกล้องจุลทรรศน์( hemocytometer )ก็เป็นประมาณ 2 × 109 เซลล์/มิลลิลิตร.
10% ( v / v ) inoculum ของแบคทีเรียเป็น
ซึ่งจะช่วยเพิ่มในใบลูกปืนหลาย. สองใบลูกปืนหลายคน
ซึ่งจะช่วยถอดออกเพื่อจัดให้บริการตัวอย่างที่ซ้ำกันสำหรับ
จุดเชื่อมต่อข้อมูลแต่ละครั้ง น้ำซุปหมักเป็น
ตามมาตรฐานผ่าน microfiltration (แผ่นกรอง Clyde
0.2 μ m )และ ภายหลัง นำมาวิเคราะห์
สมาธิของ ผลิตภัณฑ์ หมักกล่าวคือที่
อะซีโตน butanol และเอทานอลโดย hplc.