Antisense (AS) plasmid constructs w

Antisense (AS) plasmid constructs were used to target genes VP28, VP39 and wsv477 of white spot syndrome virus (WSSV) in the Pacific white shrimp Litopenaeus vannamei, and subsequent protection from the virus was investigated. PCR amplified products of the targeted viral ORFs were cloned downstream in antisense orientation (3′–5′) into a plasmid vector having elongation factor 1α (EF1α) promoter. Shrimp were injected with the AS plasmids intramuscularly followed by a challenge with WSSV. The AS plasmids administered individually (pEF-VP28, pEF-VP39 and pEF-wsv477) and in combinations (pEF-VP28 + VP39, pEF-VP28 + wsv477, pEF-VP39 + wsv477) provided significant protection to the L. vannamei against WSSV. Mortality began in the positive and promoter control groups on day three of viral challenge and reached 100% by day nine. The shrimp injected with AS plasmid of VP28, VP39 and wsv477 showed survival rate of 50%, 60% and 90% respectively, in comparison with the control groups at 9 days post infection (dpi). The AS constructs targeting the early regulatory gene wsv477 produced statistically superior protection against WSSV, both alone and in combination as pEF-VP28 + wsv477 and pEF-VP39 + wsv477.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โครงสร้างของ plasmid antisense (AS) ใช้ในการเป้าหมายยีน VP28, VP39 และ wsv477 ของไวรัสกลุ่มอาการจุดสีขาว (ตรวจ) ในตัวกุ้งขาว Litopenaeus vannamei และต่อมาป้องกันไวรัสถูกตรวจสอบ PCR ขยายผลิตภัณฑ์ของ ORFs ไวรัสเป้าหมายถูกโคลนน้ำใน antisense (3′ – 5′) เป็นเวกเตอร์ plasmid มี elongation ปัจจัย 1α โปรโมเตอร์ (EF1α) กุ้งถูกฉีด ด้วย plasmids AS เข้ากล้ามเนื้อตาม ด้วยความท้าทายด้วยการตรวจ Plasmids เป็นจัดการแยก (pEF VP28, pEF VP39 และ pEF wsv477) และในชุด (pEF VP28 VP39, pEF VP28 + wsv477, pEF VP39 + wsv477) ให้สมบูรณ์เพื่อกุลา L. กับการตรวจ การตายเริ่มต้นบวกและโปรโมเตอร์กลุ่มควบคุมเมื่อวันที่สามของไวรัสท้าทาย และถึง 100% โดยวันเก้า กุ้งฉีดด้วยเป็น plasmid VP28, VP39 และ wsv477 พบว่าอัตราการรอด 50%, 60% และ 90% ตามลำดับ เมื่อเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุมที่ 9 วันที่ลงรายการบัญชี (dpi) การติดเชื้อ โครงสร้างตามที่กำหนดเป้าหมาย wsv477 regulatory ยีนต้นผลิตป้องกันเหนือกว่าทางสถิติ กับการ ตรวจ ทั้งคนเดียว และร่วมเป็น pEF VP28 wsv477 และ pEF VP39 + wsv477

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

antisense (AS) สร้างพลาสมิดถูกนำมาใช้ในการกำหนดเป้​​าหมายยีน VP28, VP39 และ wsv477 ของเชื้อไวรัสโรคจุดขาว (WSSV) ในกุ้งขาวแวนนาไมแปซิฟิกและการป้องกันไวรัสที่ตามมาจากการถูกตรวจสอบ PCR ขยายผลิตภัณฑ์ของ ORFs ไวรัสกำหนดเป้​​าหมายถูกโคลนปลายน้ำในแนว antisense (3'-5) เป็นเวกเตอร์พลาสมิดที่มีปัจจัยการยืดตัว1α (EF1α) โปรโมเตอร์ กุ้งถูกฉีดด้วยพลาสมิด AS ตามกล้ามเนื้อโดยการท้าทายกับตัวแดงดวงขาว พลาสมิด AS บริหารงานเป็นรายบุคคล (PEF-VP28, PEF-VP39 และ PEF-wsv477) และในชุด (PEF-VP28 + VP39, PEF-VP28 + wsv477, PEF-VP39 + wsv477) ให้ความคุ้มครองที่สำคัญในกุ้งขาวกับตัวแดงดวงขาว . การตายเริ่มต้นขึ้นในเชิงบวกและโปรโมเตอร์กลุ่มควบคุมในวันที่สามของความท้าทายไวรัสและถึง 100% โดยวันที่เก้า กุ้งฉีดพลาสมิดของ AS VP28, VP39 wsv477 และแสดงให้เห็นว่าอัตราการรอดตายของ 50%, 60% และ 90% ตามลำดับเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมที่ 9 วันที่โพสต์ติดเชื้อ (dpi) เป็นโครงสร้างที่กำหนดเป้​​าหมาย wsv477 ยีนที่ควบคุมดูแลการผลิตที่เหนือกว่าสถิติการป้องกันตัวแดงดวงขาวกับทั้งคนเดียวและในการรวมกันเป็น PEF-VP28 + wsv477 และ PEF-VP39 + wsv477

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

antisense ( ) ถูกใช้เพื่อเป้าหมายสร้างพลาสมิดยีน vp28 vp39 wsv477 , และไวรัสโรคจุดขาว ( ี ) ในการเลี้ยงกุ้งขาว Litopenaeus vannamei , และการป้องกันที่ตามมาจากไวรัสที่ถูกตรวจสอบเพื่อขยายผลิตภัณฑ์ของเป้าหมายไวรัส orfs ถูกโคลนล่องในการปฐมนิเทศ antisense ( 3 ′– 5 School ) เป็นเวคเตอร์มีปัจจัยทั้งหมด 1 α ( ef1 α ) โปรโมเตอร์ กุ้งฉีดพลาสมิดที่มีเป็นทางตามความท้าทายกับี . เป็นนักเรียนเป็นรายบุคคล ( pef-vp28 ) , และ pef-vp39 pef-wsv477 ) และค่า ( vp39 pef-vp28 ,pef-vp28 wsv477 pef-vp39 , wsv477 ) ให้คุ้มครองอย่างมีนัยสำคัญกับ L . vannamei ต่อี . การตายเริ่มขึ้นในแง่บวกและผู้สนับสนุนกลุ่มควบคุมในวันที่สามของไวรัสและท้าทายถึง 100% โดยวันที่เก้า กุ้งฉีดเป็นพลาสมิดของ vp28 vp39 wsv477 , และพบว่าอัตราการรอดชีวิตของ 50% , 60% และ 90% ตามลำดับในการเปรียบเทียบกับกลุ่มควบคุม 9 วันหลังการติดเชื้อ ( dpi ) เป็นโครงสร้างเป้าหมาย wsv477 กฎระเบียบยีนต้นผลิตสถิติเหนือกว่าป้องกันีทั้งเดี่ยวและรวมเป็น pef-vp28 wsv477 และ pef-vp39 wsv477 .