Immune responsesAt the end of phase

Immune responses
At the end of phase 1, plasma samples were used to measure IgG, IgA, and TNF-α. Total concentrations of IgG and IgA in plasma of pigs were measured according to the method described by Chaytor et al. [19] using ELISA kits (Bethyl, Montgomery, TX). Firstly, goat anti-pig IgG or IgA were used as capture antibodies to coat wells. Then plasma samples were diluted to 1:100,000 for the measurement. Horseradish peroxidase goat anti-pig IgG or IgA was used as the detection. The plate was read at 450 nm by an ELISA plate reader (Synergy HT, BioTek Instruments, Winooski, VT) and software (KC4 Data Analysis Software, BioTek Tnstrument). Sample concentration was quantified against the standard curve. Detective limits were 7.8 ng/mL for IgG, and 15.6 ng/mL for IgA, respectively.

Determination of TNF-α concentrations in plasma was completed according to the method described by Chaytor et al. [19] using ELISA kits (Pierce Biotechnology, Rockford, IL). Briefly, 50 μL of standard plus dilute or 100 μL of sample was added to microplate wells coated with capture antibody in conjunction with biotinylated antibody reagent. Horseradish peroxidase, TMB substrate, and a stop solution of 2 mol/L H2SO4 were used for the detection. Absorbance was read at 450 nm by an ELISA plate reader (Synergy HT, BioTek Instruments, Winooski, VT) and software (KC4 Data Analysis Software, BioTek Tnstrument). Detection limit for TNF-α was 5 pg/mL.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การตอบสนองของระบบภูมิคุ้มกันในตอนท้ายของระยะที่ 1, ตัวอย่างพลาสมาถูกนำมาใช้ในการวัด IgG, IgA และ TNF-α
ความเข้มข้นรวม IgG และ IgA ในพลาสมาของสุกรถูกวัดตามวิธีการอธิบายโดย Chaytor et al, [19] โดยใช้ชุด ELISA (Bethyl กอเมอรี, เท็กซัส) ประการแรกแพะ IgG ต่อต้านหมูหรือ IgA ถูกนำมาใช้เป็นแอนติบอดี้ที่จะจับภาพหลุมเสื้อ จากนั้นตัวอย่างพลาสมาถูกลดลงเหลือ 1: 100,000 วัด มะรุมแพะ peroxidase IgG ต่อต้านหมูหรือ IgA ถูกใช้เป็นการตรวจสอบ แผ่นที่ได้รับการอ่านที่ 450 นาโนเมตรโดยเครื่องอ่านแผ่นวิธี ELISA (Synergy HT, Biotek เครื่องมือ, นุ, VT) และซอฟต์แวร์ (KC4 วิเคราะห์ข้อมูลซอฟท์แว Biotek Tnstrument) ความเข้มข้นของสารตัวอย่างได้รับการวัดกับกราฟมาตรฐาน ข้อ จำกัด นักสืบเป็น 7.8 ng / มิลลิลิตรสำหรับ IgG และ 15.6 ng / มิลลิลิตรสำหรับจีเอตามลำดับ. การกำหนดความเข้มข้นของ TNF-αในพลาสมาเสร็จสมบูรณ์ตามวิธีการอธิบายโดย Chaytor et al, [19] โดยใช้ชุด ELISA (เพียร์ซเทคโนโลยีชีวภาพ, ฟอร์ด, IL) สั้น ๆ , 50 ไมโครลิตรของเจือจางบวกมาตรฐานหรือ 100 ไมโครลิตรของกลุ่มตัวอย่างถูกบันทึกอยู่ในหลุม microplate เคลือบด้วยแอนติบอดีจับร่วมกับสารแอนติบอดี้ biotinylated peroxidase มะรุมสารตั้งต้นทหารไทยและโซลูชั่นครบวงจร 2 โมล / ลิตร H2SO4 ถูกนำมาใช้สำหรับการตรวจสอบ การดูดกลืนแสงได้อ่านที่ 450 นาโนเมตรโดยเครื่องอ่านแผ่นวิธี ELISA (Synergy HT, Biotek เครื่องมือ, นุ, VT) และซอฟต์แวร์ (KC4 วิเคราะห์ข้อมูลซอฟท์แว Biotek Tnstrument) ขีด จำกัด ของการตรวจสอบสำหรับ TNF-α 5 pg / มิลลิลิตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การตอบสนองทางภูมิคุ้มกัน
เมื่อสิ้นสุดระยะที่ 1 ตัวอย่างพลาสมาที่ใช้วัด IgA และ IgG , TNF - α . รวมปริมาณ IgG และ IgA ในพลาสมาของสุกรได้ตามวิธีการที่อธิบายโดย chaytor et al . [ 19 ] โดยใช้ ELISA ชนิดติดตั้งอิสระ ( bethyl Montgomery , TX ) ประการแรก แพะ หมู หรือ กลุ่มต่อต้านกลุ่มใช้เป็นแอนติบอดีจับกับ เวลส์ เสื้อคลุม แล้วตัวอย่างพลาสมาลด 100 ,000 สำหรับการวัด มะรุมมีแพะหมู IgG anti หรือกะใช้เป็นการตรวจสอบ จานอ่าน 450 nm โดยอ่านป้าย ELISA ( Synergy HT , เครื่องมือ biotek Winooski , VT ) และซอฟต์แวร์ ( kc4 การวิเคราะห์ข้อมูลซอฟต์แวร์ biotek tnstrument ) ตัวอย่างของ quantified กับเส้นโค้งมาตรฐาน จำกัดนักสืบเป็น 7.8 ng / ml สำหรับ IgG และ IgA รวม ng / ml ,ตามลำดับ

หา TNF - αความเข้มข้นในพลาสมาได้สมบูรณ์ตามวิธีการที่อธิบายโดย chaytor et al . [ 19 ] โดยใช้ ELISA ชนิดติดตั้งอิสระ ( เพียซชีวภาพ , Rockford , อิลลินอยส์ ) สั้น ๆ , 50 μลิตรมาตรฐานพร้อมμเจือจางหรือ 100 ลิตร เพิ่มพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย จำนวนบ่อเคลือบแอนติบอดี แอนติบอดีจับร่วมกับไลต์ . horseradish peroxidase ,เพิ่มพื้นผิวและหยุดการแก้ไข 2 mol / l กรดซัลฟิวริกที่ใช้สำหรับการตรวจสอบ คืออ่านค่า 450 nm โดยอ่านป้าย ELISA ( Synergy HT , เครื่องมือ biotek Winooski , VT ) และซอฟต์แวร์ ( kc4 การวิเคราะห์ข้อมูลซอฟต์แวร์ biotek tnstrument ) ขีดจำกัดสำหรับ TNF - α 5 พิโคกรัม / มิลลิลิตร