2.5. Quantitative Analysis of CT Pr

2.5. Quantitative Analysis of CT Production in Bacterial Culture
Supernatant by Bead-ELISA. Preparation of quantitative
bead enzyme-linked immunosorbent assay (Bead-ELISA) for
CT and quantitative analysis of concentration of CT in culture
supernatant were done as described previously [10]. To
construct the Bead-ELISA, anti-CT-specific IgG prepared in
this study was used.The concentrations of CT in culture supernatant
were calculated with four-parameter logistic curve
fit for points on the standard curve for purified recombinant
CT.
The bacterial culture supernatants were obtained after the
organisms were cultured under AKI-SW condition [11].
Briefly, the organisms were cultured initially in stationary test
tubes (height, 150 mm; diameter, 15 mm) for 4 h at 37∘C, and
then all the culture was transferred into 100mL Erlenmeyer
flasks. Subsequent cultivation was done at 37∘C for 20h with
shaking (130 rpm). The amount of medium was maintained
constantly at 10 mL. AKI medium (1.5% Bacto Peptone (Becton,
Dickinson and Company), 0.4% yeast extract (Becton,
Dickinson and Company) and 0.5% NaCI, and 0.3%
NaHCO3) was used for all bacterial strains.The bacterial culture
supernatant was obtained after centrifugation at 900 ×g
for 5min.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5 การวิเคราะห์เชิงปริมาณผลิต CT ในแบคทีเรียวัฒนธรรม
Supernatant โดย ELISA ลูกปัด การเตรียมการของเชิงปริมาณ
ลูกปัดเอนไซม์ลิงค์ immunosorbent assay (ELISA ลูกปัด) สำหรับ
CT และการวิเคราะห์เชิงปริมาณของความเข้มข้นของ CT ในวัฒนธรรม
supernatant ทำตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [10] การ
สร้างลูกปัด-ELISA เตรียมป้องกันเฉพาะ CT IgG ใน
การศึกษานี้ใช้ความเข้มข้นของ CT ในวัฒนธรรม supernatant
ถูกคำนวณพารามิเตอร์สี่โลจิสติกโค้ง
พอดีกับจุดบนเส้นโค้งมาตรฐานสำหรับวททชบริสุทธิ์
กะรัต
supernatants วัฒนธรรมแบคทีเรียได้รับหลังจาก
ชีวิตถูกอ่างภายใต้เงื่อนไขอากิ-SW [11] .
สั้น ๆ สิ่งมีชีวิตที่มีอ่างแรกในการทดสอบเครื่องเขียน
หลอด (150 มม. ความสูง ขนาด 15 มม.) สำหรับ h 4 ที่ 37∘C และ
แล้ววัฒนธรรมทั้งหมดถูกถ่ายโอนไป 100 mL Erlenmeyer
น้ำ ภายหลังปลูกเสร็จที่ 37∘C สำหรับ 20h กับ
สั่น (130 รอบต่อนาที) มีรักษายอดของกลาง
ตลอดเวลาที่ 10 mL อากิปานกลาง (1.5% Bacto Peptone (Becton,
สัน และ บริษัท), สารสกัดจากยีสต์ 0.4% (Becton,
สัน และ บริษัท) และ 0.5% NaCI และ 0.3%
NaHCO3) ใช้สำหรับสายพันธุ์แบคทีเรียทั้งหมดวัฒนธรรมแบคทีเรีย
supernatant กล่าวหลัง centrifugation ที่ 900 × g
สำหรับ 5 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 การวิเคราะห์เชิงปริมาณของการผลิตใน CT แบคทีเรียวัฒนธรรม
ใสโดยลูกปัด-ELISA การเตรียมความพร้อมของปริมาณ
ลูกปัดเอนไซม์ที่เชื่อมโยงทดสอบอิมมูโน (ลูกปัด-ELISA) เพื่อ
CT และการวิเคราะห์เชิงปริมาณของความเข้มข้นของ CT ในวัฒนธรรม
ใสได้ทำตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [10] เพื่อ
สร้างลูกปัด-ELISA, IgG ป้องกัน CT เฉพาะเตรียมใน
การศึกษาครั้งนี้เป็นความเข้มข้นของ used.The CT ในวัฒนธรรมใส
ถูกคำนวณกับสี่พารามิเตอร์โค้งโลจิสติก
เหมาะสำหรับจุดบนเส้นโค้งมาตรฐานสำหรับบริสุทธิ์ recombinant
CT
วัฒนธรรมแบคทีเรีย supernatants ที่ได้รับหลังจากการ
มีชีวิตที่ถูกเลี้ยงภายใต้เงื่อนไข AKI-SW [11]
สั้น ๆ , สิ่งมีชีวิตที่ได้รับการเพาะเลี้ยงครั้งแรกในการทดสอบนิ่ง
หลอด (ความสูง 150 มม. เส้นผ่าศูนย์กลาง 15 มม. ) เป็นเวลา 4 ชั่วโมงที่ 37 ∘ C และ
แล้วทั้งหมด วัฒนธรรมที่ถูกย้ายเข้ามาใน Erlenmeyer 100ml
ขวด การเพาะปลูกต่อมาได้รับการทำที่ 37 ∘ C เป็นเวลา 20h กับการ
สั่น (130 รอบต่อนาที) จำนวนของกลางที่ได้รับการรักษา
อย่างต่อเนื่องที่ 10 มิลลิลิตร AKI กลาง (1.5% Bacto เปปโตน (Becton,
ดิกคินสันและ บริษัท ), สารสกัดจากยีสต์ 0.4% (Becton,
ดิกคินสันและ บริษัท ) และ 0.5% NaCI และ 0.3%
NaHCO3) ถูกนำมาใช้สำหรับทุกแบคทีเรีย strains.The วัฒนธรรมแบคทีเรีย
ใสที่ได้รับหลังจาก การปั่นแยกที่ 900 ×กรัม
เป็นเวลา 5 นาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 การวิเคราะห์เชิงปริมาณของการผลิต CT ในวัฒนธรรมที่นำลูกปัด
แบคทีเรียโดยวิธีอีไลซ่า การเตรียมปริมาณ
ลูกปัด enzyme-linked immunosorbent assay ( ELISA )
ลูกปัด ) และการวิเคราะห์เชิงปริมาณความเข้มข้นของ CT ในนำวัฒนธรรม
เสร็จตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [ 10 ]

สร้างแอนติบอดี IgG anti ลูกปัด , CT เฉพาะเตรียม
การศึกษานี้ใช้ความเข้มข้นของ CT ใน
นำวัฒนธรรมได้ด้วยสี่พารามิเตอร์โลจิสติกโค้ง
พอดีสำหรับจุดบนเส้นโค้งมาตรฐานของรีคอมบิแนนท์

สะอาดบริสุทธิ์ supernatants เพาะเชื้อได้ หลังจากทำการเพาะเลี้ยงภายใต้สภาวะ aki-sw
สิ่งมีชีวิต [ 11 ] .
สั้น , สิ่งมีชีวิตในอาหารเพาะเลี้ยงในหลอดทดลองโดย
เครื่องเขียน ( ความสูง 150 มม. ; เส้นผ่าศูนย์กลาง15 มม. ) 4 H ที่ 37 ∘ C ,
แล้วทั้งหมดถูกโอนเข้าสู่วัฒนธรรมเออร์เลนเมเยอร์
ขวด 100ml . การกระทำที่ตามมา 37 ∘ C
20h กับสั่น ( 130 รอบต่อนาที ) ปริมาณของกลางไว้
ตลอดเวลา 10 มล. ( 1.5% ) อากิ Bacto เปปโตน ( เบคตอน
, ดิกคินสันและ บริษัท ) , สารสกัดจากยีสต์ 0.4 % ( เบคตอน
, ดิกคินสันและ บริษัท ) และ 0.5% NaCl และ 0.3 %
โซเดียมไบคาร์บอเนต ) ใช้สายพันธุ์แบคทีเรียทั้งหมด แบคทีเรียที่นำวัฒนธรรม
ได้หลังการปั่นเหวี่ยงที่ 900 × g
สำหรับ 5 นาที