Digestive tracts from two catfishes

Digestive tracts from two catfishes (labeled as samples 1 and 2)
were sterilely dissected and washed. The fish intestines were cut,
weighed and homogenized in Man Rogossa Sharp (MRS) agar and
vortexed. These were serially diluted (from 10-1 to 10-6 for two
samples, respectively) and were pour plated on MRS agar. The
plates were incubated anaerobically, at 30°C for 48 h. Single
colonies developed were picked up for morphological, lactose
utilization, gram reaction, catalase ad antimicrobial test, and further,
genomic extraction for rRNA sequencing.
In lactose utilization test, the selected colonies were then
streaked onto nutrient agar NA with the addition of lactose
containing 0.005 g/L bromo-cresol purple, as a pH indicator dye.
The plates were incubated at 30°C for 24 h. Isolates that were able
to utilize lactose and produce acid were differentiated by the
change of media color from violet to yellow. Catalase activity was
tested by adding a drop of 30% hydrogen peroxide solution onto the
cell smears. Positive reaction would be seen as bubbles or froths
generated from the colonies, indicating a rapid production of
oxygen gas. Only isolates that showed negative reaction were
subjected to further identification test.
The antagonistic activity of the isolated LAB against Salmonella
typhimurium and Escherichia coli were determined by using agar
disc diffusion. LAB isolate was propagated in MRS broth medium
and incubated anaerobically at 30°C for 48 h. Cell propagated in
MRS broth was pipette onto 5 mm diameter filter paper disc
(diameter of 5 mm, Whatman No.1) and dried for 10 min. About 500
μl of indicator organism, (either S. typhimurium or E. coli) was
spread on the plates. The test was performed in triplicates. Then,
the plates were incubated at 37°C for 24 h and the zone of
inhibitions formed surrounding the disc was observed.
Following overnight incubation at 30°C in 10 ml MRS broth,
genomic extraction was carried out using DNeasy Blood and Tissue

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ทางเดินอาหารจากสอง catfishes (ระบุว่าเป็น 1 ตัวอย่างและ 2)
ถูกชำแหละ sterilely และล้าง ลำไส้ปลาถูกตัด
ชั่งน้ำหนักและปั่นในผู้ชาย Rogossa ชาร์ป (MRS) อาหารเลี้ยงเชื้อและ
การ vortex เหล่านี้ถูกปรับลดลำดับ (10-1 10-6 ไปสอง
ตัวอย่างตามลำดับ) และได้รับการเทชุบบนอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS
แผ่นถูกบ่มแบบไม่ใช้อากาศที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง เดี่ยว
อาณานิคมพัฒนาถูกหยิบขึ้นมาสำหรับก้านแลคโตส
การใช้ปฏิกิริยากรัมโฆษณา catalase ทดสอบยาต้านจุลชีพและเพิ่มเติม
สำหรับการสกัดจีโนมลำดับ rRNA.
ในการทดสอบการใช้แลคโตส, โคโลนีที่เลือกถูกแล้ว
ลายลงบนอาหารเลี้ยงเชื้อสารอาหาร NA มีการเพิ่มของแลคโตส
ที่มี 0.005 กรัม / ลิตรโบรโมครีซอล-สีม่วงเป็นสีย้อมวัดค่า pH.
แผ่นถูกบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ไอโซเลทที่มีความสามารถ
ที่จะใช้แลคโตสและผลิตกรดได้รับแตกต่างจาก
การเปลี่ยนแปลงของสีที่สื่อจากสีม่วงเป็นสีเหลือง กิจกรรม catalase ได้รับการ
ทดสอบโดยการเพิ่มการลดลงของการแก้ปัญหาไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ 30% ลงบน
รอยเปื้อนมือถือ ปฏิกิริยาบวกจะถูกมองว่าเป็นฟองอากาศหรือ froths
สร้างขึ้นจากอาณานิคมแสดงให้เห็นอย่างรวดเร็วของการผลิต
ก๊าซออกซิเจน เฉพาะแยกที่แสดงให้เห็นปฏิกิริยาเชิงลบที่ถูก
ยัดเยียดให้ทดสอบประจำตัวประชาชนต่อไป.
กิจกรรมปฏิปักษ์ของ LAB ที่แยกกับเชื้อ Salmonella
typhimurium และเชื้อ Escherichia coli ได้รับการพิจารณาโดยใช้อาหารเลี้ยงเชื้อ
แพร่กระจายแผ่นดิสก์ LAB แยกถูกแพร่กระจายในน้ำซุป MRS กลาง
และบ่มแบบไม่ใช้อากาศที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง มือถือที่แพร่กระจายใน
น้ำซุป MRS เป็นปิเปตบนเส้นผ่านศูนย์กลาง 5 แผ่นกระดาษกรอง
(ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 5 มมเบอร์ 1) และแห้งเป็นเวลา 10 นาที ประมาณ 500
ไมโครลิตรของสิ่งมีชีวิตตัวบ่งชี้ (ทั้ง typhimurium เอสหรือเชื้อ E. coli) ถูก
แพร่กระจายบนจาน การทดสอบได้รับการดำเนินการใน triplicates จากนั้น
แผ่นที่ถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24 ชั่วโมงและโซนของการ
ยับยั้งที่เกิดขึ้นรอบ ๆ แผ่นก็สังเกตเห็น.
หลังจากที่บ่มค้างคืนที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียสใน 10 มล. น้ำซุป MRS,
สกัดจีโนมได้รับการดำเนินการโดยใช้ DNeasy เลือดและเนื้อเยื่อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ทางเดินอาหารจากสองปลาดุก ( ระบุว่าเป็น ตัวอย่างที่ 1 และ 2 )
) sterilely ผ่าและล้าง ปลาไส้ถูกตัด
ชั่งบดในมนุษย์และ rogossa คม ( นาง ) วุ้นและ
vortexed . เหล่านี้เป็นเจือจาง ( 10-1 จะสามารถสอง
ตามลำดับ ) และเทบนนางชุบวุ้น
แผ่นถูกบ่มพ 30 ° C ใน 48 ชั่วโมงเดียว
นิคมพัฒนาถูกเลือกขึ้นสำหรับการใช้ลักษณะทางสัณฐานวิทยา แลคโตส
, โฆษณาต้านปฏิกิริยากรัม สามารถทดสอบ และการสกัดลำดับจีโนมต่อไป

สำหรับ rRNA ในการทดสอบการใช้นมที่อาณานิคมแล้ว
ลายบน NUMB3RS นาด้วยการเพิ่มแลคโตส 0.005 กรัม / ลิตร
ที่มีหมู่ว่องไว Bromo สีม่วง เป็น ตัวบ่งชี้
อย้อมจานถูกบ่มที่อุณหภูมิ 30 องศา C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง สายพันธุ์ที่สามารถผลิตกรดแลคโตส
ใช้และที่แตกต่างกัน โดย
เปลี่ยนสีจากสื่อ ม่วงเหลือง นักศึกษาถูก
ทดสอบโดยการเพิ่มหยดของสารละลายไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ลง 30%
มือถือเปื้อน ปฏิกิริยาเชิงบวก จะเห็นฟองอากาศ หรือ froths
ที่เกิดจากการล่าอาณานิคม ซึ่งการผลิตอย่างรวดเร็วของ
แก๊สออกซิเจน เพียงสายพันธุ์ที่พบปฏิกิริยาเชิงลบ

ภายใต้การทดสอบระบุเพิ่มเติม กิจกรรมปฏิปักษ์ที่แยกห้องกับเชื้อ Salmonella และ Escherichia coli
สำหรับวิเคราะห์โดยใช้ agar disc diffusion

ปฏิบัติการแยกเป็นจำนวนใน MRS broth medium
บ่มพ 30 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เซลล์จำนวน
MRS broth คือเปตบน 5 มม. เส้นผ่าศูนย์กลางกรองกระดาษแผ่น
( ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 5 มิลลิเมตร whatman No.1 ) และแห้ง 10 นาทีประมาณ 500
μ L ของตัวบ่งชี้สิ่งมีชีวิต ( S . typhimurium หรือ E . coli ) คือ
กระจายบนแผ่น การทดสอบแบ่งเป็น 3 ซ้ำ . งั้น
จานถูกบ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 24 ชั่วโมง และโซนของ
ยับยั้งขึ้นรอบแผ่นดิสก์ )
.ต่อไปนี้คืนบ่มที่ 30 ° C ใน 10 ml MRS broth
จีโนม , การสกัดโดยใช้ dneasy เลือดและเนื้อเยื่อ