The Vero proteins in samples were m

The Vero proteins in samples were measured by ELISA. The anti-Vero guinea pig IgG (3 μg/mL into NaHCO3, pH 9.6) was coated with 100 μL/well into a 96-well microplate (Corning, USA) overnight at room temperature. After three washes with PBST (PBS pH 7.2, 0.05% Tween 20), the plate was blocked with blocking buffer (3% BSA in PBST) for 1 h. Host cell protein standard and samples were serially diluted with blocking buffer and added into wells with 100 μL/well after three washes and incubated for 1 h at 37 °C. The plate was washed for three times and anti-Vero rabbit IgG (1:1000 in blocking buffer) was added with 100 μL/well and incubated for 1 h at 37 °C. After three washes, HRP-conjugated goat anti-rabbit serum was added and incubated for 1 h at 37 °C. After washes with PBST, TMB solution was added with 100 μL/well and incubated for an appropriate time at 37 °C before 1 M H2SO4 solution was added to stop the reaction. Color development was measured at 490 nm by a Thermo microplate reader (Thermo, USA).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Vero โปรตีนในตัวอย่างที่ถูกวัด โดย ELISA ตะเภา Vero ป้องกันการหา igg จำเพาะ (3 ไมโครกรัม/มิลลิลิตรเป็น NaHCO3 ค่า pH 9.6) ถูกเคลือบ ด้วย 100 μL/ดี เป็น microplate 96 หลุม (Corning สหรัฐอเมริกา) ค้างคืนที่อุณหภูมิห้อง หลังจากล้างสามกับ PBST (PBS ค่า pH 7.2, 0.05% แต่ 20), แผ่นที่ถูกบล็อก ด้วยบล็อกบัฟเฟอร์ (3% บีเอสเอใน PBST) สำหรับ 1 โฮสต์เซลล์โปรตีนมาตรฐาน และอย่าง serially กับบัฟเฟอร์บล็อก และเพิ่มลงในหลุมด้วย μL 100 อีกทั้งหลังจากล้างสาม และได้รับการกก 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส จานถูกล้าง 3 ครั้ง และกระต่ายป้องกัน Vero หา igg จำเพาะ (1: 1000 ในบัฟเฟอร์บล็อก) เพิ่ม 100 μL/ดี และได้รับการกก 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส หลังจากล้างสาม ซีรั่มป้องกันกระต่ายแพะรวมกัน HRP เพิ่ม และได้รับการกก 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส หลังจากล้างด้วย PBST แก้ไขปัญหาทหารไทยเพิ่ม 100 μL/ดี และได้รับการกกสำหรับเวลาเหมาะสมที่ 37 ° C ก่อน 1 M H2SO4 โซลูชันเพิ่มการหยุดปฏิกิริยา มีวัดการพัฒนาสีที่ 490 nm โดยผู้อ่าน microplate เทอร์โม (เทอร์โม สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โปรตีนเวโรในตัวอย่างถูกวัดโดยวิธี ELISA ป้องกันเวโรตะเภา IgG (3 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรลงใน NaHCO3 ค่า pH 9.6) ถูกเคลือบด้วย 100 ไมโครลิตร / ดีเป็น microplate 96 หลุม (Corning, สหรัฐอเมริกา) ค้างคืนที่อุณหภูมิห้อง หลังจากสามล้างด้วย PBST (พีบีเอสพีเอช 7.2, 0.05% Tween 20) แผ่นที่ถูกบล็อกด้วยการปิดกั้นบัฟเฟอร์ (3% BSA ใน PBST) เป็นเวลา 1 ชั่วโมง เป็นเจ้าภาพมาตรฐานโปรตีนของเซลล์และตัวอย่างที่ถูกปรับลดเป็นลำดับที่มีการปิดกั้นกันชนและเพิ่มเข้าไปในหลุมด้วย 100 ไมโครลิตร / ดีหลังจากสามล้างและบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส จานถูกล้างสามครั้งและต่อต้าน Vero กระต่าย IgG (1: 1000 การปิดกั้นกันชน) ถูกเพิ่มเข้ามาด้วย 100 ไมโครลิตร / ดีและบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส หลังจากสามล้าง HRP-ผันซีรั่มแพะป้องกันกระต่ายถูกบันทึกและบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส หลังจากล้างด้วย PBST, การแก้ปัญหาทหารไทยถูกเพิ่มเข้ามาด้วย 100 ไมโครลิตร / ดีและบ่มเป็นเวลาที่เหมาะสมที่ 37 องศาเซลเซียสก่อนวันที่ 1 แก้ปัญหา M H2SO4 ถูกเพิ่มเข้ามาเพื่อหยุดปฏิกิริยา การพัฒนาสีวัดที่ 490 นาโนเมตรโดยผู้อ่าน microplate เทอร์โม (เทอร์โม, สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การต้านโปรตีนในตัวอย่างถูกวัดโดยวิธีอีไลซ่า ต่อต้านเวโรหนูตะเภา IgG ( 3 μ g / ml เป็นโซเดียมไบคาร์บอเนต , pH 9.6 ) ถูกเคลือบด้วย 100 μ L / ดีเป็น 96 ดีพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย ( Corning , USA ) ค้างคืนที่อุณหภูมิห้อง หลังจากที่สามล้างด้วย pbst ( PBS pH 7.2 0.05 เปอร์เซ็นต์ Tween 20 ) , จานบล็อกกับบล็อกบัฟเฟอร์ ( 3 ) ( pbst ) เป็นเวลา 1 ชั่วโมง โฮสต์เซลล์และโปรตีนมาตรฐานจำนวนเป็นเจือจางด้วยการปิดกั้นบัฟเฟอร์ และเพิ่มลงในบ่อ มี 100 μ L / หลังจากสามถล่ม และบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ที่ 37 องศา จานซักสามครั้งและ IgG anti เวโรกระต่าย ( 000 ในบล็อกบัฟเฟอร์ ) คือเพิ่ม 100 μลิตร และบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 37 องศา หลังจากสามล้าง HRP และเซรั่มต่อต้าน กระต่าย แพะ ได้เพิ่ม และ บ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 37 องศา pbst หลังจากล้างด้วย , โดยโซลูชั่นเพิ่ม 100 μ L / และบ่มเพื่อเวลาที่เหมาะสมที่อุณหภูมิ 37 องศา C ก่อนโซลูชั่นกรดซัลฟิวริก 1 M เพิ่มเพื่อหยุดปฏิกิริยา การพัฒนาสี เป็นวัดที่ 490 nm โดยความร้อน ( Thermo อ่านพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย , สหรัฐอเมริกา )