Polymerase chain reaction (PCR) amp

Polymerase chain reaction (PCR) amplification has been used since 1996 in detecting Acanthamoeba, and a recent study on its accuracy by Boggild et al. [22]showed that it compared favourably with smear microscopy and biopsy histology in terms of sensitivity, although specificity was still slightly poorer. More recently, reports have been emerging such as those by Kandori et al. [23], Itahashi et al. [24], and Ikeda et al. [25], which demonstrate the use of real-time quantitative PCR for Acanthamoeba detection, eliminating the need for gel-based electrophoresis and time-consuming processing. Khairnar et al. [26] compared real-time PCR to gel-based techniques, along with traditional smear and biopsy microscopy, found similarly higher sensitivity of 89.3% in the real-time technique, and suggested that both PCR methods are favourable to the traditional techniques. Further refinements in the PCR technique have also been developed to yield higher sensitivities. Le Calvez et al. [27] recently described a multiplexed quantitative PCR method which is able to distinguish individual Acanthamoeba species in free-living mixed flora samples. Laummaunwai et al. [28] developed an algorithm for DNA extraction which is able to produce viable DNA from a single Acanthamoeba cyst; previously cystic DNA extraction has been the Achilles heel of the technique. These advances mean that real-time PCR is becoming more and more relevant in diagnostics, with particular benefits being that it is a much faster technique than growing Acanthamoeba cultures and does not require adjuvant biopsy, so it can be implemented earlier, on cases of lower clinical suspicion.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอร์ (PCR) ขยายได้ถูกนำมาใช้ตั้งแต่ปี 1996 ในการตรวจสอบ Acanthamoeba และศึกษาล่าสุดเกี่ยวกับความถูกต้องโดย Boggild et al, [22] แสดงให้เห็นว่ามันอยู่ในเกณฑ์ดีเมื่อเทียบกับการใช้กล้องจุลทรรศน์ smear และเนื้อเยื่อตรวจชิ้นเนื้อในแง่ของความไวความจำเพาะแม้ว่ายังคงยากจนกว่าเล็กน้อย เมื่อเร็ว ๆ นี้ได้รับรายงานที่เกิดขึ้นใหม่เช่นนั้นโดย Kandori et al, [23], et al, Itahashi [24] และอิเคดะ et al, [25] ซึ่งแสดงให้เห็นถึงการใช้เวลาจริง PCR ในการตรวจหาปริมาณ Acanthamoeba ไม่จำเป็นต้องสำหรับข่าวคราวที่ใช้การประมวลผลและใช้เวลานาน Khairnar et al, [26] เมื่อเทียบกับวิธี PCR ในเวลาจริงกับเทคนิคที่ใช้เจลพร้อมกับป้ายแบบดั้งเดิมและกล้องจุลทรรศน์ตรวจชิ้นเนื้อพบว่ามีความไวสูงในทำนองเดียวกันของ 89.3% ในเทคนิคแบบ real-time และชี้ให้เห็นว่าทั้งสองวิธี PCR เป็นอย่างดีกับเทคนิคแบบดั้งเดิม การปรับแต่งเพิ่มเติมในวิธี PCR ยังได้รับการพัฒนาเพื่อให้มีความไวสูง Le Calvez et al, [27] ​​เมื่อเร็ว ๆ นี้อธิบายวิธี PCR multiplexed เชิงปริมาณที่สามารถแยกแยะความแตกต่างของแต่ละบุคคลสายพันธุ์ Acanthamoeba ฟรีในชีวิตตัวอย่างพืชผสม Laummaunwai et al, [28] การพัฒนาอัลกอริทึมในการสกัดดีเอ็นเอซึ่งสามารถผลิตดีเอ็นเอที่ทำงานได้จากถุง Acanthamoeba เดียว; ก่อนหน้านี้การสกัดดีเอ็นเอเรื้อรังได้รับจุดอ่อนของเทคนิค ความก้าวหน้าเหล่านี้หมายความว่า PCR เวลาจริงมีมากขึ้นและที่เกี่ยวข้องมากขึ้นในการตรวจวินิจฉัยที่มีประโยชน์โดยเฉพาะอย่างยิ่งการที่มันเป็นเทคนิคที่เร็วกว่าการเติบโตวัฒนธรรม Acanthamoeba และไม่จำเป็นต้องตรวจชิ้นเนื้อเสริมเพื่อที่จะสามารถที่จะดำเนินการก่อนหน้านี้ในกรณีที่ลดลง สงสัยทางคลินิก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ปฏิกิริยาลูกโซ่ ( PCR ) ( มีการใช้ตั้งแต่ปี 1996 ในการตรวจสอบทุกครั้ง และผลการศึกษาล่าสุดในความถูกต้องโดย boggild et al . [ 22 ] พบว่าเมื่อใช้ภายในและตรวจชิ้นเนื้อเนื้อเยื่อ ดังนั้นในแง่ของความไว ความจำเพาะ คือ แม้ว่ายังคงเล็กน้อยที่ยากจนได้ เมื่อเร็วๆ นี้ มีรายงานการเกิดเช่น โดยคันโดริ et al . [ 23 ]itahashi et al . [ 24 ] และเคดะ et al . [ 25 ] ซึ่งแสดงให้เห็นถึงการใช้จริงปริมาณ PCR เพื่อตรวจหาทุกครั้งไม่ต้องเจลและประมวลผลใช้เวลานานอยู่ khairnar et al . [ 26 ] เทียบ PCR แบบเรียลไทม์เพื่อเจลตามเทคนิค พร้อมกับละเลงแบบดั้งเดิมและแบบส่องกราดตรวจชิ้นเนื้อพบในทํานองเดียวกันสูงขึ้น ความไว 893 % ในเทคนิค PCR แบบเรียลไทม์ และชี้ให้เห็นว่าทั้งสองวิธีที่ดีกับเทคนิคแบบดั้งเดิม เพิ่มเติมในการกลั่นกรองเทคนิค PCR ได้รับการพัฒนาเพื่อให้ผลความไวสูง เลอ calvez et al . [ 27 ] เมื่อเร็ว ๆนี้อธิบายการมัลติเพลกซ์และวิธีการเชิงปริมาณซึ่งสามารถแยกแยะชนิดของแต่ละบุคคลในอิสระทุกครั้งผสมพืชตัวอย่างlaummaunwai et al . [ 28 ] พัฒนาขั้นตอนวิธีสำหรับการสกัดดีเอ็นเอซึ่งสามารถผลิตได้ดีเอ็นเอจากซีสต์ทุกครั้งเดียว ก่อนหน้านี้ cystic การสกัดดีเอ็นเอมีจุดอ่อนของเทคนิค ความก้าวหน้าเหล่านี้หมายความว่า PCR แบบเรียลไทม์เป็นมากขึ้นและเกี่ยวข้องมากขึ้นในการวินิจฉัยโดยประโยชน์ที่เป็นเทคนิคที่เร็วกว่าการขัดอกขัดใจวัฒนธรรมและไม่ต้องเสริมเนื้อเยื่อ ดังนั้นจึงสามารถดำเนินการก่อนหน้านี้ ในกรณีของคลินิก






















ลดความสงสัย