Chemicals. Sodium nitrite, (+)-catechin, Folin-Ciocalteu reagent, and R-keto-γ-methiolbutyric acid (KMBA) were purchased from Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO). Sodium carbonate, sodium hydroxide, acetone, and potassium phosphate were obtained from Mallinckrodt (Paris, KY). Aluminum chloride, potassium chloride, and sodium acetate were purchased from Fisher Scientific (Pittsburgh, PA), and gallic acid was obtained from ICN Biomedical Inc. (Costa Mesa, CA). 2,2′-Azobis- (amidinopropane) (ABAP) was obtained from Wako Chemicals (Rich- mond, VA). The HepG2 cells were from the American Type Culture Collection (ATCC) (Rockville, MD), and the MTS-based Cell Titer 96 nonradioactive cell proliferation assay was from Promega (Madison, WI). Williams Medium E (WME) and fetal bovine serum (FBS) were purchased from Gibco Life Technologies (Grand Island, NY).
Samples. Cortland and Idared apples were purchased from Cornell Orchards (Cornell University, Ithaca, NY). Rome Beauty and Golden Delicious apples were obtained from Red Jacket Orchards (Geneva, NY). All apples were kept in modified atmosphere storage until purchased. The apples were washed and dried before analysis. They were peeled, when necessary, with an Apple Master apple parer and cored. The flesh, flesh + peel, or peels were obtained from five randomly selected apples in each trial to minimize variation. The flesh was the edible portion of the apple without the peel. The flesh + peel was the edible portion of the apple with the amount of flesh and peel maintained in the same proportions as in the whole apple. The peels were the parts of the apple removed by the apple parer.
Extraction. The phenolic compounds of apples were extracted by a method similar to that reported previously by our laboratory (14, 21). Briefly, 50 g of apple flesh or apple flesh with the peel was blended with 200 g of chilled 80% acetone solution in a Waring blender for 5 min. The sample was then homogenized for 3 min using a Virtis 45 homogenizer. The slurry was filtered through Whatman No. 1 filter paper in a Buchner funnel under vacuum. The solids were scraped into 150 g of 80% acetone and homogenized again for 3 min before refiltering. The filtrate was recovered and evaporated using a rotary evaporator at 45 °C until less than 10% of the initial volume remained. The extract was made up to 50 mL with distilled water and frozen at -40 °C until analysis. Apple peels were extracted similarly using 25 g of peel. All extracts were made in triplicate.
สารเคมี โซเดียมไนไตรต์, ()-สารสกัดจาก รีเอเจนต์ Folin-Ciocalteu และ R-keto-γ-methiolbutyric กรด (KMBA) ซื้อจาก บริษัทเคมีซิก (St. Louis, MO) โซเดียมคาร์บอเนต โซเดียมไฮดรอกไซด์ อะซิโตน และโพแทสเซียมฟอสเฟตได้รับจาก Mallinckrodt (ปารีส KY) ซื้ออลูมิเนียมคลอไรด์ โปแตสเซียมคลอไรด์ และโซเดียม acetate จาก Fisher วิทยาศาสตร์ (พิตส์เบิร์ก PA), และกรด gallic กล่าวจาก ICN ทางชีวการแพทย์ Inc. (Mesa คอสตา CA) 2, 2′-Azobis- (amidinopropane) (ภาษาอาบัป) ได้รับสารเคมี Wako (พระอุดม VA) เซลล์ HepG2 อเมริกันประเภทวัฒนธรรมชุด (ATCC) (ร็อควิลล์ MD), และการใช้ MTS เซลล์ Titer 96 nonradioactive เซลล์การงอกวิเคราะห์ได้จาก Promega (เมดิสัน WI) ได้ E สื่อวิลเลียมส์ (WME) และเซรั่มวัวและทารกในครรภ์ (FBS) ซื้อจาก Gibco ชีวิตเทคโนโลยี (เกาะแกรนด์ NY) .
ตัวอย่าง Cortland และ Idared แอปเปิ้ลถูกซื้อจากสวนคอร์เนล (Cornell University, Ithaca, NY) แอปเปิ้ลทองอร่อยและความสวยงามของโรมได้รับมาจากสวนเสื้อแดง (เจนีวา NY) แอปเปิ้ลทั้งหมดถูกเก็บไว้ในบรรยากาศแก้ไขเก็บจนซื้อ แอปเปิ้ลถูกล้าง และอบแห้งก่อนวิเคราะห์ พวกเขาถูกปอก เปลือก เมื่อจำเป็น มีการต้นแอปเปิ้ลแอปเปิ้ล parer และ cored เนื้อ เนื้อเปลือก หรือ peels ได้รับจากแอปเปิ้ลเลือกสุ่มห้าในการทดลองแต่ละครั้งเพื่อลดความผันแปร เนื้อส่วนกินแอปเปิ้ลไม่มีเปลือกได้ ส่วนกินแอปเปิ้ลทั้งเนื้อและเปลือกรักษาในสัดส่วนเดียวกันในแอปเปิ้ลทั้งเปลือกเนื้อได้ Peels มีส่วนของแอปเปิ้ลที่ออก โดย parer แอปเปิ้ล
สกัด ม่อฮ่อมของแอปเปิ้ลที่สกัด ด้วยวิธีการคล้ายกับที่รายงานก่อนหน้านี้ โดยห้องปฏิบัติการของเรา (14, 21) สั้น ๆ g 50 เนื้อแอปเปิ้ลหรือแอปเปิ้ลเนื้อกับเปลือกจะถูกผสมกับ g 200 ของเย็น 80% อะซีโตนใน Waring เบลนเดอร์ใน 5 นาที ตัวอย่างที่แล้ว homogenized เป็นกลุ่มสำหรับใช้ homogenizer Virtis 45 นาที 3 น้ำจะถูกกรองโดยใช้กระดาษกรอง Whatman No. 1 ในปล่อง Buchner ภายใต้สุญญากาศ ของแข็งถูกขูดเป็น 150 กรัมของอะซีโตน 80% แล้ว homogenized เป็นกลุ่มอีกครั้งใน 3 นาทีก่อน refiltering สารกรองถูกกู้คืน และใช้ evaporator โรตารี่ที่ 45 ° C จนกว่ายังคงน้อยกว่า 10% ของปริมาตรหายไป การดึงข้อมูลทำถึง 50 mL ด้วยน้ำกลั่น และแช่แข็งที่-40 ° C จนถึงการวิเคราะห์ แอปเปิ้ล peels ถูกสกัดในทำนองเดียวกัน โดยใช้ 25 g ของเปลือก สารสกัดจากทั้งหมดที่เกิดขึ้นใน triplicate
การแปล กรุณารอสักครู่..

สารเคมี โซเดียมไนไตรท์ (+) - catechin, Folin-Ciocalteu น้ำยา R-คี-γ-methiolbutyric กรด (KMBA) ที่ซื้อมาจากซิกเคมิคอล จำกัด (เซนต์หลุยส์) โซเดียมคาร์บอเนตโซเดียมไฮดรอกไซอะซิโตนและโพแทสเซียมฟอสเฟตที่ได้รับจาก Mallinckrodt (ปารีส, เคนทักกี) อลูมิเนียมคลอไรด์โพแทสเซียมคลอไรด์และโซเดียมอะซิเตทที่ซื้อมาจากฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ (Pittsburgh, PA) และกรดแกลลิที่ได้รับจาก ICN ชีวการแพทย์อิงค์ (คอสตาเมซ่า, CA) 2,2'-Azobis- (amidinopropane) (ABAP) ที่ได้รับจาก Wako เคมีภัณฑ์ (Mond Rich-, VA) เซลล์ HepG2 มาจากวัฒนธรรมอเมริกันประเภทสะสม (ATCC) (Rockville, MD) และ titer เซลล์เอ็มทีเอที่ใช้ 96 nonradioactive ทดสอบเซลล์ขยายมาจาก Promega (เมดิสันวิสคอนซิน) วิลเลียมส์ปานกลาง E (WME) และวัวซีรั่มของทารกในครรภ์ (FBS) ที่ซื้อมาจาก Gibco ไลฟ์เทคโนโลยีส์ (แกรนด์ไอส์แลนด์นิวยอร์ก)
ตัวอย่าง คอร์ตและ Idared แอปเปิ้ลที่ซื้อมาจากสวนผลไม้คอร์เนล (Cornell University, Ithaca, NY) แอปเปิ้ลความงามกรุงโรมและโกลเด้นอร่อยที่ได้รับจากสวนผลไม้แจ๊คเก็ตสีแดง (เจนีวา, นิวยอร์ก) แอปเปิ้ลทั้งหมดที่ถูกเก็บไว้ในห้องเก็บของสภาพบรรยากาศดัดแปลงจนซื้อ แอปเปิ้ลถูกล้างและอบแห้งก่อนที่จะวิเคราะห์ พวกเขาถูกปอกเปลือกเมื่อมีความจำเป็นกับเครื่องปอกเปลือกแอปเปิ้ลแอปเปิ้ลโทและคว้านเมล็ด เนื้อเนื้อ + เปลือกหรือเปลือกที่ได้รับจากแอปเปิ้ลห้าสุ่มเลือกในการพิจารณาคดีที่จะลดความแตกต่างของแต่ละ เนื้อเป็นส่วนที่กินได้ของแอปเปิ้ลโดยไม่ต้องปอกเปลือก เนื้อ + เปลือกเป็นส่วนที่กินได้ของแอปเปิ้ลกับปริมาณของเนื้อและเปลือกไว้ในสัดส่วนเดียวกับในแอปเปิ้ลทั้ง เปลือกถูกชิ้นส่วนของแอปเปิ้ลบออกโดยเครื่องปอกเปลือกแอปเปิ้ล
สกัด สารประกอบฟีนอแอปเปิ้ลได้รับการสกัดด้วยวิธีการเดียวกับที่รายงานก่อนหน้านี้โดยห้องปฏิบัติการของเรา (14, 21) สั้น ๆ , 50 กรัมของเนื้อแอปเปิ้ลหรือเนื้อแอปเปิ้ลที่มีเปลือกที่ถูกผสมกับ 200 กรัมแช่เย็นแก้ปัญหาอะซิโตน 80% ในเครื่องปั่น Waring เป็นเวลา 5 นาที ตัวอย่างที่ได้รับการหดหายแล้วเป็นเวลา 3 นาทีโดยใช้ Virtis 45 โฮโมจีไน สารละลายถูกกรองผ่านกระดาษกรอง Whatman หมายเลข 1 ในช่องทาง Buchner ภายใต้สูญญากาศ ของแข็งถูกขูดเป็น 150 กรัม 80% อะซีโตนและหดหายอีกครั้งเป็นเวลา 3 นาทีก่อนที่จะ refiltering กรองก็หายและระเหยโดยใช้เครื่องระเหยแบบหมุน 45 องศาเซลเซียสจนน้อยกว่า 10% ของปริมาณเริ่มต้นที่ยังคงอยู่ สารสกัดที่ถูกสร้างขึ้นถึง 50 มิลลิลิตรด้วยน้ำกลั่นและแช่แข็งที่ -40 ° C จนการวิเคราะห์ เปลือกแอปเปิ้ลถูกสกัดในทำนองเดียวกันโดยใช้ 25 กรัมของเปลือก สารสกัดทั้งหมดได้ทำในเพิ่มขึ้นสามเท่า
การแปล กรุณารอสักครู่..

เคมีภัณฑ์ โซเดียมไนไตรท์ ( ) - Catechin , folin ciocalteu รีเอเจนต์และ r-keto - γ - methiolbutyric acid ( kmba ) ซื้อจาก Sigma Chemical Co . ( St . Louis , MO ) โซเดียมคาร์บอเนต , โซเดียม ไฮดรอกไซด์ อะซิโตน และโพแทสเซียมฟอสเฟต ได้จาก Ltd ( ปารีส , KY ) อลูมิเนียมคลอไรด์โพแทสเซียมคลอไรด์และโซเดียมอะซิเตต ซื้อมาจาก ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ ( Pittsburgh , PA )และ เพิ่มขึ้นได้จาก ICN ชีวการแพทย์อิงค์ ( Costa Mesa ( CA ) ได้รับ 2 , 2 - azobis - ( amidinopropane ) ( ABAP ) ได้จาก Wako สารเคมี ( รวย - มอนด์ , VA ) เซลล์มะเร็งตับมาจากวัฒนธรรมอเมริกันประเภทคอลเลกชัน ( ATCC ) ( ร็อกวิลล์ , แมรี่แลนด์ และเอ็มทีเอเซลล์ระดับเซลล์โดยการใช้ nonradioactive 96 จาก promega ( Madison , WI )วิลเลียมส์กลาง E ( WME ) และแม่วัวเลือด ( FBS ) ซื้อมาจากเทคโนโลยีกับชีวิต gibco ( เกาะแกรนด์ , นิวยอร์ก )
ตัวอย่าง คอร์ต idared และแอปเปิ้ล ซื้อมาจากสวน คอร์เนลล์ ( Cornell University , Ithaca , NY ) โรมความงามและแอปเปิ้ลอร่อยสีทองที่ได้รับจากสวนเสื้อสีแดง ( เจนีวานิวยอร์ก ) แอปเปิ้ลทั้งหมดถูกเก็บไว้ในที่เก็บบรรยากาศดัดแปลงจนซื้อแอปเปิ้ลถูกล้างและอบแห้งก่อนการวิเคราะห์ พวกเขาถูกปอกเปลือกเมื่อจำเป็นกับแอปเปิ้ลแอปเปิ้ลและอาจารย์ parer cored . เนื้อ แกะเนื้อ หรือเปลือก ได้จากการสุ่มเลือก แอปเปิ้ลห้าในแต่ละคดี ลดกระจาย เนื้อก็กินส่วนของแอปเปิ้ลไม่มีเปลือกเนื้อเปลือกกินส่วนของแอปเปิ้ลที่มีปริมาณเนื้อและเปลือกรักษาในสัดส่วนเดียวกับในแอปเปิ้ลทั้งหมด เปลือกเป็นส่วนของแอปเปิ้ลที่ออกโดยแอปเปิ้ล parer .
การสกัด สารประกอบฟีนอลิกของแอปเปิ้ลถูกสกัดโดยวิธีการคล้ายกับที่รายงานก่อนหน้านี้โดยห้องปฏิบัติการของเรา ( 14 ) สั้น ๆ50 กรัมของแอปเปิ้ลแอปเปิ้ลเนื้อหรือเนื้อกับเปลือกผสมกับสารละลายอะซิโตนเย็น 200 กรัม 80 % ในสินค้าเครื่องปั่นสำหรับ 5 นาทีตัวอย่างแล้วบด 3 นาทีโดยใช้เวอร์ติส 45 Homogenizer . ความเข้มข้นถูกกรองผ่านกระดาษกรอง whatman หมายเลข 1 ในกรวยกรองบุชเนอร์ภายใต้สุญญากาศของแข็งถูกขูดเป็น 150 กรัมของ 80% อะซิโตนและบดอีกครั้งเป็นเวลา 3 นาทีก่อน refiltering . หนักถูกกู้คืนและระเหยใช้เครื่องโรตารี่ 45 ° C ถึงน้อยกว่าร้อยละ 10 ของปริมาณเริ่มต้นที่ยังคงอยู่ สารสกัดที่ได้ถึง 50 ml ด้วยน้ำกลั่นและแช่แข็งที่ - 40 องศา C ถึงการวิเคราะห์ เปลือกแอปเปิ้ลสกัดก็ใช้ 25 กรัมของเปลือกสารสกัดทั้งหมดให้ทั้งสามใบ
การแปล กรุณารอสักครู่..
