3.2 Method validation The described

3.2 Method validation
The described SPE-HPLC method was validated with respect to specificity, linearity, accuracy, precision, LOD and LOQ. The method specificity was assured by checking the peak purity of the analytes in the HPLC chromatogram; no interferences co-eluted with the analytes were detected.
The investigated compounds were quantified by integration of peak areas at 210 nm using an internal standard method. The calibration curve of each compound was performed with at least six appropriate concentrations in triplicate. Least-squares linear regression was used to determine the calibration parameters for each of the three standards. A summary of the calibration studies for the three analytes is presented in Table 2. The linearity of all calibration curves was determined by calculating the correlation coefficients (r 2 ), which varied from 0.998 8 for epicatechin to 0.999 8 for gallic acid.
The dilute solution of the standard mixture solution was further diluted to a series of concentrations with 30% methanol for the gain of the LOD and LOQ. As shown in Table 1, LODs and LOQs were less than 0.466 and 0.800 g•mL1 in DAD at 210 nm, respectively.
The overall RSD precision value (intra-and inter-day) for the retention times and peak-areas were better than 0.12% and 2.23%, respectively.
The accuracy was expressed as percentage recovery of the three different concentrations. The mean recoveries of the analytes were calculated at three concentration levels as reported in Table 2. The overall mean recovery ranged from 87.9% to 103%, showing the developed method is reproducible with good accuracy.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.2 ตรวจสอบวิธี วิธี SPE HPLC อธิบายถูกตรวจสอบเกี่ยวกับความ เส้นตรง ถูกต้อง แม่นยำ ลอดและ LOQ. วิธีที่ความมั่นใจ โดยการตรวจสอบความบริสุทธิ์สูงสุดวิเคราะห์ใน HPLC chromatogram ตรวจพบ interferences ไม่ร่วม eluted กับวิเคราะห์ สารประกอบ investigated ถูกวัด โดยรวมของพื้นที่สูงสุดที่ 210 nm โดยใช้วิธีการมาตรฐานภายใน ดำเนินการโค้งเทียบของแต่ละบริเวณ มีความเข้มข้นที่เหมาะสมน้อยหกลข้อ ถดถอยเชิงเส้นสี่เหลี่ยมอย่างน้อยถูกใช้เพื่อกำหนดพารามิเตอร์การสอบเทียบแต่ละมาตรฐานสาม สรุปการศึกษาการสอบเทียบสำหรับสามวิเคราะห์แสดงในตารางที่ 2 เส้นตรงของกราฟสอบเทียบทั้งหมดที่ถูกกำหนด โดยการคำนวณค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ (r 2), ซึ่งแตกต่างจาก 8 0.998 สำหรับ epicatechin 0.999 8 สำหรับกรด gallicเพิ่มเติมถูกเจือจาง dilute โซลูชันโซลูชันมาตรฐานผสมเป็นชุดของความเข้มข้นกับเมทานอล 30% สำหรับกำไรของ LOD และ LOQ. ดังแสดงในตารางที่ 1, LODs และ LOQs ได้ 0.800 และ 0.466 น้อยกว่า g•mL1 ในพ่อที่ 210 nm ตามลำดับ ค่าความแม่นยำ RSD โดยรวม (ภายใน-ระหว่างวัน) สำหรับเก็บข้อมูลเวลาและพื้นที่สูงได้ดีกว่า 0.12% และ 2.23% ตามลำดับ ความถูกต้องถูกแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์การกู้คืนของความเข้มข้นแตกต่างกันสาม ฟื้นตัวหมายถึงการวิเคราะห์ได้คำนวณสามระดับตามที่รายงานในตารางที่ 2 โดยรวมหมายถึง การกู้คืนที่อยู่ในช่วงจาก 87.9% 103% วิธีพัฒนาจำลองความแม่นยำดี

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.2 การตรวจสอบวิธีการ
ที่อธิบายวิธี SPE-HPLC ถูกตรวจสอบด้วยความเคารพต่อความจำเพาะเชิงเส้นความถูกต้องแม่นยำและ LOQ ล็อด วิธีการเฉพาะเจาะจงก็มั่นใจโดยการตรวจสอบความบริสุทธิ์สูงสุดของการวิเคราะห์ใน chromatogram HPLC นั้น รบกวนไม่มีชะร่วมกับสารที่ถูกตรวจพบ.
สารประกอบสอบสวนถูกวัดโดยการรวมกลุ่มของพื้นที่สูงสุดที่ 210 นาโนเมตรโดยใช้วิธีการมาตรฐานภายใน เส้นโค้งการสอบเทียบของสารประกอบแต่ละชนิดได้ดำเนินการกับอย่างน้อยหกความเข้มข้นที่เหมาะสมในการเพิ่มขึ้นสามเท่า อย่างน้อยสี่เหลี่ยมถดถอยเชิงเส้นถูกใช้ในการกำหนดค่าพารามิเตอร์การสอบเทียบสำหรับแต่ละสามมาตรฐาน บทสรุปของการศึกษาการสอบเทียบสำหรับสามวิเคราะห์จะนำเสนอในตารางที่ 2 เป็นเส้นตรงเส้นโค้งของการสอบเทียบที่ถูกกำหนดโดยการคำนวณค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ (r 2) ซึ่งแตกต่างจาก 0.998 8 สำหรับ epicatechin เพื่อ 0.999 8 สำหรับฝรั่งเศสกรด.
เจือจาง วิธีการแก้ปัญหาของการแก้ปัญหาส่วนผสมมาตรฐานถูกเจือจางต่อไปยังชุดของความเข้มข้นที่มี 30% เมทานอลเพื่อผลประโยชน์ของล็อดและ LOQ ดังแสดงในตารางที่ 1 LODs และ LOQs น้อยกว่า 0.466 และ 0.800 กรัม• ML1 ใน DAD ที่ 210 นาโนเมตรตามลำดับ.
โดยรวม RSD ค่าความแม่นยำ (ภายในและระหว่างวัน) สำหรับเวลาการเก็บรักษาและสูงสุดพื้นที่ได้ดีกว่า 0.12% และ 2.23% ตามลำดับ.
ความถูกต้องที่ได้รับการแสดงเป็นร้อยละของการกู้คืนสามความเข้มข้นที่แตกต่างกัน กลับคืนเฉลี่ยของสารที่ถูกคำนวณในสามระดับความเข้มข้นตามที่รายงานในตารางที่ 2 การฟื้นตัวของค่าเฉลี่ยโดยรวมตั้งแต่ 87.9% ถึง 103% แสดงให้เห็นถึงวิธีการพัฒนาคือทำซ้ำได้ด้วยความถูกต้องดี