Reading at 600 nm is the traditiona

Reading at 600 nm is the traditional wavelength for cell growth. However, because the absorbance noted at 600 nm is due to light scattering and because not all plate readers are equipped with a 600 nm capability, a scan of the contents of H-12 was performed to see what effect various wavelengths had on the results. The contents were transferred to a Corning 3635 UV transmissible microplate to determine if 600 nm featured a unique peak, if other wavelengths could be used, and if pathlength correction to 1 cm could be used if necessary. As noted in Figure 4, there is nothing unique regarding the 600 nm wavelength used as compared to other wavelengths. When other wavelengths are used a very similar shaped curve is observed. Theoretically, a whole variety of wavelengths could be used to measure cell growth. Note that at lower wavelengths, (e.g. 340 nm) other reagents, such as the microplate itself and dissolved solutes also absorb light and these wavelengths are not suitable for measuring light scattering. Reading at 600 nm is still the traditional wavelength however, and the one cited in the literature.

In order to directly compare the results of bacterial growth curves in microplates to those obtained in spectrophotometer cuvettes a correction for pathlength is required. Automatic BioTek pathlength correction depends on the solution having an isolated absorbance peak for the diluent. In the case of aqueous solutions, water has a peak at 977 nm. A reading at 900 nm is used to subtract nonspecific absorbance effects such as plastic. Unfortunately, this method of pathlength correction cannot be used because the actual measurement of bacterial growth is based on light scatter rather than true absorbance. As demonstrated previously, these experiments scatter light all wavelengths including 977 nm and 900 nm, which affect the pathlength correction calculations. At 977 nm, with 200 µL in the well, the absorbance of 200 µL of aqueous solution should be around 0.100 above the absorbance at 900 nm. Instead, the respective absorbance values are 0.883 and 0.870 for 977 and 900 nm respectively, a difference of 0.013 which indicates other reagents are absorbing and or scattering light at those wavelengths, a condition that negates the use of that method of pathlength correction. A more effective method of pathlength correction involves the determination of the pathlength of a specific volume of fluid using water or absorbing colored dye prior to running a bacterial growth curves. This calculated pathlength could then be used as a constant in a mathematical transformation to correct each well to a 1-cm pathlength value.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การอ่านที่ 600 นาโนเมตรเป็นความยาวคลื่นแบบดั้งเดิมสำหรับการเจริญเติบโตของเซลล์ แต่เพราะการดูดกลืนแสงที่ระบุไว้ที่ 600 นาโนเมตรเกิดจากการกระเจิงแสงและเนื่องจากไม่ได้ทั้งหมดผู้อ่านแผ่นมีการติดตั้งที่มีความสามารถ 600 นาโนเมตรสแกนเนื้อหาของ H-12 ได้ดำเนินการเพื่อดูสิ่งที่ความยาวคลื่นต่างๆผลมีผล เนื้อหาถูกโอนไปยัง Corning 3635 ยูวีถ่ายทอด microplate เพื่อตรวจสอบว่า 600 นาโนเมตรให้ความสำคัญสูงสุดที่ไม่ซ้ำกันถ้าความยาวคลื่นอื่น ๆ ที่สามารถนำมาใช้และถ้าแก้ไขยาวทางเดินถึง 1 ซม. สามารถนำมาใช้ในกรณีที่จำเป็น ดังที่ระบุไว้ในรูปที่ 4 มีที่ไม่ซ้ำกันเกี่ยวกับอะไรที่ความยาวคลื่น 600 นาโนเมตรที่ใช้เมื่อเทียบกับความยาวคลื่นอื่น ๆ เมื่อความยาวคลื่นอื่น ๆ ที่ใช้เส้นโค้งที่มีรูปร่างคล้ายกันมากเป็นที่สังเกต ในทางทฤษฎีที่หลากหลายทั้งของความยาวคลื่นที่สามารถนำมาใช้ในการวัดการเจริญเติบโตของเซลล์ โปรดทราบว่าในช่วงความยาวคลื่นที่ต่ำกว่า (เช่น 340 นาโนเมตร) สารเคมีอื่น ๆ เช่นไมโครตัวเองและสารที่ละลายในน้ำยังดูดซับแสงและความยาวคลื่นเหล่านี้จะไม่เหมาะสำหรับการวัดกระเจิงแสง การอ่านที่ 600 นาโนเมตรยังคงเป็นคลื่นแบบดั้งเดิม แต่และคนที่อ้างถึงในวรรณคดี. เพื่อที่จะได้โดยตรงเปรียบเทียบผลของการโค้งเจริญเติบโตของแบคทีเรียใน microplates ให้กับผู้ที่ได้รับใน spectrophotometer cuvettes แก้ไขสำหรับยาวทางเดินจะต้อง แก้ไข Biotek ยาวทางเดินอัตโนมัติขึ้นอยู่กับวิธีการแก้ปัญหาที่มีการดูดกลืนแสงสูงสุดที่แยกสำหรับเจือจางที่ ในกรณีของการแก้ปัญหาน้ำที่มีน้ำสูงสุดที่ 977 นาโนเมตร การอ่านที่ 900 นาโนเมตรจะใช้ในการลบผลกระทบการดูดกลืนแสงเชิญชมเช่นพลาสติก แต่น่าเสียดายที่วิธีการของการแก้ไขยาวทางเดินนี้จะไม่สามารถนำมาใช้เพราะการวัดที่แท้จริงของการเจริญเติบโตของแบคทีเรียจะขึ้นอยู่กับการกระจายแสงมากกว่าการดูดกลืนแสงที่แท้จริง แสดงให้เห็นว่าก่อนหน้านี้การทดลองเหล่านี้กระจายแสงความยาวคลื่นทั้งหมดรวมถึง 977 นาโนเมตรและ 900 นาโนเมตรซึ่งส่งผลกระทบต่อการคำนวณการแก้ไขยาวทางเดิน ที่ 977 นาโนเมตรกับ 200 ไมโครลิตรในดีในการดูดกลืนแสง 200 ไมโครลิตรของสารละลายควรจะประมาณ 0.100 ข้างต้นการดูดกลืนแสงที่ 900 นาโนเมตร แต่การดูดกลืนแสงค่านั้นเป็น 0.883 และ 0.870 สำหรับ 977 และ 900 นาโนเมตรตามลำดับความแตกต่างของ 0.013 ซึ่งบ่งชี้ว่าสารเคมีอื่น ๆ จะถูกดูดซับและกระจายแสงหรือในช่วงความยาวคลื่นเหล่านั้นสภาพที่ขัดแย้งกับการใช้วิธีการของการแก้ไขที่ยาวทางเดินที่ วิธีที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นของการแก้ไขยาวทางเดินที่เกี่ยวข้องกับการกำหนดยาวทางเดินของปริมาณที่เฉพาะเจาะจงของของเหลวโดยใช้น้ำหรือการดูดซับสีย้อมสีก่อนที่จะวิ่งเส้นโค้งเจริญเติบโตของแบคทีเรีย คำนวณยาวทางเดินนี้แล้วสามารถนำมาใช้เป็นค่าคงที่ในการเปลี่ยนแปลงทางคณิตศาสตร์ในการแก้ไขแต่ละอย่างดีเพื่อ 1 ซม. ยาวทางเดินค่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

我什么”我什么”我什么”我什么”我什么”我什么”我什么”我什么”