ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา are

ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา are also called ยูกลีนา, and are
known as microorganisms that produce โพลีแซคคาไรด์ such as พาราไมลัม or the like by being cultured.
[0004]
25 Various ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา are conventionally known.
For example, ยูกลีนา gracilis strain NIES-48 is known (Patent Literature 1). [0005]
Such ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา produce โพลีแซคคาไรด์ such as พาราไมลัม by being cultured, and store the โพลีแซคคาไรด์ in their cells.
30 Further, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา can convert the stored
โพลีแซคคาไรด์ into wax esters or can further produce proteins while producing the โพลีแซคคาไรด์, depending on the culture conditions. Then, the สารประกอบอินทรีย์s such as โพลีแซคคาไรด์, ไลปิด, and proteins that are
produced and stored in the cells of the ไมโครแอลจี can be used in applications such as fuel and food.
5 [0006]
However, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา have a problem that the performance to produce an สารประกอบอินทรีย์ such as โพลีแซคคาไรด์ is not necessarily sufficient.


10 CITATION LIST
Patent Literature [0007]
Patent Literature 1: JP 1107-070207 A


15 SUMMARY
Technical Problem [0008]
In view of the above and other problems, it is an object of the present
การประดิษฐ์ to provide ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา that are capable of
20 sufficiently producing at least โพลีแซคคาไรด์. It is another object of the
การประดิษฐ์นี้ to provide a วิธีเพื่อผลิต โพลีแซคคาไรด์ that
allows the โพลีแซคคาไรด์ to be sufficiently obtained. It is still another object
of the การประดิษฐ์นี้ to provide a วิธีเพื่อผลิต an organic
compound that allows at least one สารประกอบอินทรีย์ selected from the group 25 consisting of โพลีแซคคาไรด์, ไลปิด, vitamin C, vitamin E, pigments, and
proteins to be sufficiently obtained.


Solution to Problem
[0009]
30 In order to solve the aforementioned problem, ไมโครแอลจี of the จีนัส
ยูกลีนา according to the การประดิษฐ์นี้ are characterized by being ยูกลีนา gracilis strain EOD-1 (Accession No. FERM BP-11530) or its mutant strain and being capable of producing at least โพลีแซคคาไรด์.
[0010]
A วิธีเพื่อผลิต โพลีแซคคาไรด์ according to the present
5 การประดิษฐ์ is characterized by culturing ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา that
fall under ยูกลีนา gracilis strain EOD-1 (Accession No. FERM BP-11530) or its mutant strain and that are capable of producing at least โพลีแซคคาไรด์ as โพลีแซคคาไรด์-producing organisms to produce the โพลีแซคคาไรด์.
[0011]
10 According to one aspect of the วิธีเพื่อผลิต โพลีแซคคาไรด์ of
the การประดิษฐ์นี้, a บรอธที่ใช้ ใน การเพาะเลี้ยง may contain 15 to 30 g/L of glucose.
According to another aspect of the วิธีเพื่อผลิต
โพลีแซคคาไรด์ of the การประดิษฐ์นี้, the บรอธที่ใช้ ใน การเพาะเลี้ยง may
15 contain yeast lysate.
According to อีกหนึ่งลักษณะต่อไป of the วิธีเพื่อผลิต
โพลีแซคคาไรด์ of the การประดิษฐ์นี้, the บรอธที่ใช้ ใน การเพาะเลี้ยง may have a composition of AF6 อาหารเพาะเลี้ยง.
According to อีกหนึ่งลักษณะต่อไป of the วิธีเพื่อผลิต 20 โพลีแซคคาไรด์ of the การประดิษฐ์นี้, the โพลีแซคคาไรด์ may be
พาราไมลัม.
[0012]
A วิธีเพื่อผลิต an สารประกอบอินทรีย์ according to the present
การประดิษฐ์ is characterized by culturing ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา that 25 fall under ยูกลีนา gracilis strain EOD-1 (Accession No. FERM BP-11530) or its
mutant strain and that are capable of producing at least โพลีแซคคาไรด์ to
produce at least one สารประกอบอินทรีย์ selected from the group consisting of
โพลีแซคคาไรด์, ไลปิด, vitamin C, vitamin E, pigments, and proteins.


30 BRIEF DESCRIPTION OF DRAWINGS
รูป 1 is a comparison table for base sequence of the 18S rRNA gene of
ยูกลีนา gracilis.
รูป 2 is a phylogenetic tree constructed using the 18S rRNA gene. รูป 3A is an image showing a band pattern in RAPD analysis.
5 รูป 3B is an image showing a band pattern in RAPD analysis.
รูป 3C is an image showing a band pattern in RAPD analysis.
รูป 4 is a graph showing the glucose conversion of ไมโครแอลจี and the dry weight of ไมโครแอลจี in heterotrophic culture.
รูป 5 is a graph showing the culture period of ไมโครแอลจี and the dry 10 weight of ไมโครแอลจี in photoheterotrophic culture.
รูป 6 is a graph showing the culture period of ไมโครแอลจี and the dry
weight of ไมโครแอลจี in photoheterotrophic culture using culture media under different pH conditions.
รูป 7 is a graph showing the culture period of ไมโครแอลจี and the dry 15 weight of ไมโครแอลจี in photoheterotrophic culture using culture media under
different pH conditions.
รูป 8A is a graph showing the culture period of ไมโครแอลจี and the พาราไมลัม content per cell when the conditions change from aerobic to anaerobic in photoheterotrophic culture.
20 รูป 8B is a graph showing the culture period of ไมโครแอลจี and the
พาราไมลัม amount per บรอธ when the conditions change from aerobic to anaerobic in photoheterotrophic culture.
รูป 9A is a graph showing the culture period of ไมโครแอลจี and the ไลปิด content per cell when the conditions change from aerobic to anaerobic in
25 photoheterotrophic culture.
รูป 9B is a graph showing the culture period of ไมโครแอลจี and the
ไลปิด amount per บรอธ when the conditions change from aerobic to anaerobic in photoheterotrophic culture.


30 DESCRIPTION OF EMBODIMENTS

5
Hereinafter, an embodiment of ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา according to the การประดิษฐ์นี้ is described in detail.
[0015]
The ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา according to this embodiment
5 (hereinafter, simply referred to as ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา or
ไมโครแอลจี) are ยูกลีนา gracilis strain EOD -1 (Accession No. FERM BP-11530) or its mutant strain and that are capable of producing at least โพลีแซคคาไรด์.
The ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา of this embodiment has an effect of enabling at least โพลีแซคคาไรด์ to be sufficiently produced.
10 [0016]
The ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา are organisms that inhabit while floating in water. Further, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา are
unicellular micro algae with a size of about 10 pm to 50 pm, which differs
depending on strains.
15 The properties of the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา are described in
detail below. [0017]
Morphological properties of ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา
The vegetative cells of the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา have
20 flagellum and actively move. Further, each cell has an almost fusiform shape.
The cell includes a red organelle called eyespot in addition to general organelles such as the nucleus, chloroplasts, and mitochondria.
[0018]
Physiological or biochemical properties of ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา
25 (1) อาหารเพาะเลี้ยง: A บรอธ mainly composed of freshwater can be used
for growth (organic matter derived from wastewater also can be used for growth).
(2) Photosynthetic ability: Photoautotrophic growth by photosynthesis is possible.
30 (3) Contained pigments: Chlorophyll a, chlorophyll b, and other
carotenoids are contained.
(4) Anabolic storage substances: Proteins, ไลปิด (wax esters), and โพลีแซคคาไรด์ (พาราไมลัม)
(5) Growth temperature range: 15°C to 35°C (optimum temperature:
25°C)
5 (6) pH range suitable for growth: pH 3.5 to 5.5 (however, growth is
possible at a pH outside the aforementioned range) [0019]
Genetic information of ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา
The ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา have the 18S rDNA (18S rRNA 10 gene) represented by Sequence No. 1.
The 18S rRNA gene can be analyzed by a method commonly used as a method for identifying ไมโครแอลจี. Specifically, the 18S rRNA gene can be analyzed, for example, by a method described in EXAMPLES.
[0020]
15 The base sequence of the 18S rRNA gene of the ไมโครแอลจี of the จีนัส
ยูกลีนา can be compared with the base sequence of the 18S rRNA gene of known ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา obtained from GenBank using the BLAST homology search. The results of the comparison with the known
ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา on the sequence homology matching degree 20 will be shown in EXAMPLES below.
As the database, EMBL and DDBJ can be also used, for example.
Further, a molecular phylogenetic tree can be constructed using a
molecular phylogenetic tree drawing software Mega 5 program (Tamura et al.,
2011, Mol. Biol. Evol. 28: 2731-2739) by the maximum-likelihood method. The 25 constructed molecular phylogenetic tree will be shown in detail in EXAMPLES
below.
[0021]
Using t

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ไมโครแอลจีจีนัสยูกลีนาเรียกว่ายูกลีนา และมีเรียกว่าจุลินทรีย์โพลีแซคคาไรด์ที่ผลิตเช่นพาราไมลัมหรือเช่น โดยการอ่าง[0004]25 ไมโครแอลจีต่าง ๆ ของจีนัสยูกลีนาเป็นที่รู้จักกันดีตัวอย่าง ยูกลีนาจระเข้ต้องใช้ NIES 48 มีชื่อเสียง (1 เอกสารประกอบการจดสิทธิบัตร) [0005]เช่นไมโครแอลจีจีนัสยูกลีนาผลิตโพลีแซคคาไรด์เช่นพาราไมลัม โดยมีอ่าง และโพลีแซคคาไรด์จัดเก็บในเซลล์ต่อ 30 ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาสามารถแปลงที่เก็บไว้โพลีแซคคาไรด์ esters ไขหรือเพิ่มเติมสามารถผลิตโปรตีนขณะผลิตโพลีแซคคาไรด์ ขึ้นอยู่กับสภาพวัฒนธรรม แล้ว สารประกอบอินทรีย์s เช่นโพลีแซคคาไรด์ ไลปิด และโปรตีนที่ ผลิต และจัดเก็บอยู่ในเซลล์ของไมโครแอลจีสามารถใช้ในโปรแกรมประยุกต์เช่นน้ำมันและอาหารได้5 [0006]อย่างไรก็ตาม ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนามีปัญหาว่า ไม่จำเป็นเพียงพอประสิทธิภาพในการผลิตเป็นสารประกอบอินทรีย์เช่นโพลีแซคคาไรด์รายการอ้างอิงที่ 10สิทธิบัตรสาขาวรรณกรรม [0007]สิทธิบัตรเอกสารประกอบการ 1: JP 1107-070207 Aสรุป 15ปัญหาทางเทคนิค [0008]มุมมองด้านบนและปัญหาอื่น ๆ เป็นวัตถุของปัจจุบัน การประดิษฐ์ให้ไมโครแอลจีของยูกลีนาจีนัสที่มีความสามารถในการ พอผลิตน้อย 20 โพลีแซคคาไรด์ เป็นวัตถุอื่น การประดิษฐ์นี้ให้วิธีเพื่อผลิตโพลีแซคคาไรด์ที่ โพลีแซคคาไรด์จะพอรับได้ เป็นวัตถุอื่นยัง ของการประดิษฐ์นี้เพื่อให้วิธีเพื่อผลิตเป็นอินทรีย์ สารประกอบที่ให้สารประกอบอินทรีย์ที่เลือกจากกลุ่ม 25 ประกอบด้วยโพลีแซคคาไรด์ ไลปิด วิตามินซี วิตามินอี สี และ โปรตีนที่ได้รับเพียงพอวิธีแก้ไขปัญหา[0009]30 เพื่อแก้ปัญหาดังกล่าว ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาตามการประดิษฐ์นี้มีลักษณะเป็น ยูกลีนาต้องใช้จระเข้ EOD-1 (หมายเลขทะเบียน FERM BP 11530) หรือต้องใช้การกลายพันธุ์และการผลิตน้อยสามารถโพลีแซคคาไรด์[0010]โพลีแซคคาไรด์วิธีเพื่อผลิตตามปัจจุบัน5 การประดิษฐ์เป็นลักษณะ culturing ไมโครแอลจีจีนัสยูกลีนาที่ตกอยู่ภายใต้ยูกลีนาจระเข้ต้องใช้ EOD-1 (หมายเลขทะเบียน FERM BP 11530) หรือต้องใช้การกลายพันธุ์และมีความสามารถในการผลิตน้อยโพลีแซคคาไรด์เป็นสิ่งมีชีวิตที่ผลิตโพลีแซคคาไรด์โพลีแซคคาไรด์ที่ผลิต [0011]10 ตามแง่มุมหนึ่งของโพลีแซคคาไรด์วิธีเพื่อผลิตของการประดิษฐ์นี้ การเพาะเลี้ยงในการบรอธที่ใช้อาจประกอบด้วย 15 ถึง 30 g/L ของกลูโคสตามของวิธีเพื่อผลิตโพลีแซคคาไรด์ของการการประดิษฐ์นี้ บรอธที่ใช้ในการเพาะเลี้ยงอาจ15 ประกอบด้วยยีสต์ lysateตามอีกหนึ่งลักษณะต่อไปของวิธีเพื่อผลิตโพลีแซคคาไรด์ของการการประดิษฐ์นี้ บรอธที่ใช้ในการเพาะเลี้ยงอาจมีองค์ประกอบของ AF6 อาหารเพาะเลี้ยงตามอีกหนึ่งลักษณะต่อไปโพลีแซคคาไรด์ 20 วิธีเพื่อผลิตของการการประดิษฐ์นี้ โพลีแซคคาไรด์อาจ พาราไมลัม[0012]วิธีเพื่อผลิตที่สารประกอบอินทรีย์ตามปัจจุบัน การประดิษฐ์เป็นลักษณะ culturing ไมโครแอลจียูกลีนาจีนัสที่อยู่ 25 ยูกลีนาจระเข้ต้องใช้ EOD-1 (หมายเลขทะเบียน FERM BP 11530) หรือการ ต้องใช้กลายพันธุ์และมีความสามารถในการผลิตน้อยโพลีแซคคาไรด์ไป ผลิตสารประกอบอินทรีย์ที่เลือกจากกลุ่มประกอบด้วย โพลีแซคคาไรด์ ไลปิด วิตามิน C วิตามิน E สี และโปรตีนคำอธิบายย่อเกี่ยวกับ 30 ภาพวาดรูปที่ 1 เป็นตารางเปรียบเทียบสำหรับลำดับของยีนใน rRNA 18S ของฐานยูกลีนา gracilis.รูป 2 is a phylogenetic tree constructed using the 18S rRNA gene. รูป 3A is an image showing a band pattern in RAPD analysis.5 รูป 3B is an image showing a band pattern in RAPD analysis.รูป 3C is an image showing a band pattern in RAPD analysis.รูป 4 is a graph showing the glucose conversion of ไมโครแอลจี and the dry weight of ไมโครแอลจี in heterotrophic culture.รูป 5 is a graph showing the culture period of ไมโครแอลจี and the dry 10 weight of ไมโครแอลจี in photoheterotrophic culture. รูป 6 is a graph showing the culture period of ไมโครแอลจี and the dryweight of ไมโครแอลจี in photoheterotrophic culture using culture media under different pH conditions.รูป 7 is a graph showing the culture period of ไมโครแอลจี and the dry 15 weight of ไมโครแอลจี in photoheterotrophic culture using culture media under different pH conditions.รูป 8A is a graph showing the culture period of ไมโครแอลจี and the พาราไมลัม content per cell when the conditions change from aerobic to anaerobic in photoheterotrophic culture.20 รูป 8B is a graph showing the culture period of ไมโครแอลจี and theพาราไมลัม amount per บรอธ when the conditions change from aerobic to anaerobic in photoheterotrophic culture.รูป 9A is a graph showing the culture period of ไมโครแอลจี and the ไลปิด content per cell when the conditions change from aerobic to anaerobic in25 photoheterotrophic culture.รูป 9B is a graph showing the culture period of ไมโครแอลจี and theไลปิด amount per บรอธ when the conditions change from aerobic to anaerobic in photoheterotrophic culture.30 DESCRIPTION OF EMBODIMENTS 5Hereinafter, an embodiment of ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา according to the การประดิษฐ์นี้ is described in detail. [0015]The ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา according to this embodiment5 (hereinafter, simply referred to as ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา orไมโครแอลจี) are ยูกลีนา gracilis strain EOD -1 (Accession No. FERM BP-11530) or its mutant strain and that are capable of producing at least โพลีแซคคาไรด์. The ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา of this embodiment has an effect of enabling at least โพลีแซคคาไรด์ to be sufficiently produced.10 [0016]The ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา are organisms that inhabit while floating in water. Further, the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา are unicellular micro algae with a size of about 10 pm to 50 pm, which differs depending on strains.15 The properties of the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา are described indetail below. [0017]Morphological properties of ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนาThe vegetative cells of the ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา have20 flagellum and actively move. Further, each cell has an almost fusiform shape.The cell includes a red organelle called eyespot in addition to general organelles such as the nucleus, chloroplasts, and mitochondria.[0018]Physiological or biochemical properties of ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา25 (1) อาหารเพาะเลี้ยง: A บรอธ mainly composed of freshwater can be usedfor growth (organic matter derived from wastewater also can be used for growth).(2) Photosynthetic ability: Photoautotrophic growth by photosynthesis is possible.30 (3) Contained pigments: Chlorophyll a, chlorophyll b, and othercarotenoids are contained. (4) Anabolic storage substances: Proteins, ไลปิด (wax esters), and โพลีแซคคาไรด์ (พาราไมลัม)(5) Growth temperature range: 15°C to 35°C (optimum temperature:25°C)5 (6) pH range suitable for growth: pH 3.5 to 5.5 (however, growth ispossible at a pH outside the aforementioned range) [0019]Genetic information of ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนาThe ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา have the 18S rDNA (18S rRNA 10 gene) represented by Sequence No. 1.The 18S rRNA gene can be analyzed by a method commonly used as a method for identifying ไมโครแอลจี. Specifically, the 18S rRNA gene can be analyzed, for example, by a method described in EXAMPLES.[0020]15 The base sequence of the 18S rRNA gene of the ไมโครแอลจี of the จีนัสยูกลีนา can be compared with the base sequence of the 18S rRNA gene of known ไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา obtained from GenBank using the BLAST homology search. The results of the comparison with the knownไมโครแอลจี of the จีนัส ยูกลีนา on the sequence homology matching degree 20 will be shown in EXAMPLES below.As the database, EMBL and DDBJ can be also used, for example.Further, a molecular phylogenetic tree can be constructed using amolecular phylogenetic tree drawing software Mega 5 program (Tamura et al., 2011, Mol. Biol. Evol. 28: 2731-2739) by the maximum-likelihood method. The 25 constructed molecular phylogenetic tree will be shown in detail in EXAMPLES below.[0021]Using t

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาจะเรียกว่ายูกลีนาและ
เรียกว่า จุลินทรีย์ที่ผลิตโพลีแซคคาไรด์เช่นพาราไมลัมหรือชอบโดยการเพาะเลี้ยง .
[ ]
25 ไมโครแอลจีจดจําต่าง ๆของจีนัสยูกลีนาเป็นโดยทั่วไปรู้จัก
ตัวอย่างเช่น ยูกลีนา glandulifera เมื่อย nies-48 เป็นที่รู้จัก ( สิทธิบัตรวรรณกรรม ( 1 )[ 0005 ]
เช่นไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาผลิตโพลีแซคคาไรด์เช่นพาราไมลัมโดยการเพาะเลี้ยง และเก็บโพลีแซคคาไรด์ในเซลล์ของพวกเขา
30 เพิ่มเติม ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาสามารถแปลงเก็บไว้
โพลีแซคคาไรด์เป็นเอสเทอร์ขี้ผึ้งหรือสามารถผลิตโปรตีนในขณะที่การผลิตโพลีแซคคาไรด์ขึ้นอยู่กับสภาพวัฒนธรรม แล้ว สารประกอบอินทรีย์เช่นโพลีแซคคาไรด์ไลปิด , และโปรตีนที่
ผลิต และเก็บไว้ในเซลล์ของไมโครแอลจีสามารถใช้ในงาน เช่น เชื้อเพลิงและอาหาร 0006
[ ]
5อย่างไรก็ตาม ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนามีปัญหาประสิทธิภาพในการผลิตสารประกอบอินทรีย์เช่นโพลีแซคคาไรด์ไม่จําเป็นต้องเพียงพอ


10 อ้างอิงรายชื่อวรรณคดี [ 0007 ]

สิทธิบัตรสิทธิบัตรวรรณคดี 1 : JP 1107-070207 เป็น


15 สรุปปัญหาทางเทคนิค 0008
[ ]
ในมุมมองของข้างต้นและ ปัญหาอื่น ๆมันเป็นวัตถุของการประดิษฐ์ปัจจุบัน
ให้ไมโครแอลจีของจีนัสยูกลีนาที่มีความสามารถของ
20 พอผลิตอย่างน้อยโพลีแซคคาไรด์ . มันเป็นวัตถุอีก
การประดิษฐ์นี้ให้โพลีแซคคาไรด์วิธีเพื่อผลิตที่
ช่วยให้โพลีแซคคาไรด์จะเพียงพอได้ มันยังมีอีกวัตถุ
ของการประดิษฐ์นี้ให้วิธีเพื่อผลิตอินทรีย์
สารประกอบที่ช่วยให้อย่างน้อยหนึ่งสารประกอบอินทรีย์เลือกจากกลุ่ม 25 ประกอบด้วยโพลีแซคคาไรด์ไลปิด , วิตามิน C , วิตามิน E , สี , และ
โปรตีนให้เพียงพอได้ แก้ปัญหา



[ ]
0009 30 เพื่อแก้ปัญหาดังกล่าว ไมโครแอลจีของจีนัส
ยูกลีนาตามการการประดิษฐ์นี้มีลักษณะเป็นยูกลีนา glandulifera เมื่อย eod-1 ( ชนิดไม่มี bp-11530 ) หรือกลายพันธุ์สายพันธุ์และมีความสามารถในการผลิตอย่างน้อยโพลีแซคคาไรด์ .