Gal4, PR/Gal4 and PRm/Gal4 sequence

Gal4, PR/Gal4 and PRm/Gal4 sequences were amplified by PCR for the production of the transient expression vectors pcDNA-Gal4, pcDNA-PR/Gal4 and pcDNA-PRm/Gal4, respectively. For this purpose, the constructs pMA236, pHP236 and pHP236m [22] were used as templates together with the Gal4 forward primer with extending HindIII and NotI sites ACGCACGCaagcttgcggccgcccaccATGAAGCTACTGT​CTTCTATC and the Gal4 reverse primer with extending SalI site ATAGCTGCGTGCGTGCGTgtcgacttactctttttttggg​tttgg. PCR products were digested with HindIII and SalI and ligated into pcDNA™3.1/Zeocin (Invitrogen, Carlsbad CA). pFR-eGFP, modified from pFR-Luc (Stratagene) was kindly provided by Rainer de Martin (University of Vienna).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ลำดับที่ PR/Gal4, Gal4 และ PRm/Gal4 ถูกขยาย โดย PCR สำหรับการผลิตนิพจน์แบบฉับพลันเวกเตอร์ pcDNA-Gal4, pcDNA-PR/Gal4 และ pcDNA-PRm/Gal4 ตามลำดับ สำหรับวัตถุประสงค์นี้ โครงสร้าง pMA236, pHP236 และ pHP236m [22] ถูกใช้เป็นแม่แบบกับ Gal4 ไปข้างหน้ารองพื้น ด้วยขยายไซต์ HindIII และ NotI ACGCACGCaagcttgcggccgcccaccATGAAGCTACTGT CTTCTATC และ Gal4 กลับพื้นกับขยายสลี่ไซต์ ATAGCTGCGTGCGTGCGTgtcgacttactctttttttggg tttgg ผลิตภัณฑ์ PCR เจ่า HindIII และสลี่ และควบเป็น pcDNA ™ 3.1 / Zeocin (Invitrogen, CA คาร์ลส) pFR eGFP การปรับเปลี่ยนจาก pFR-ลุค (Stratagene) ได้กรุณาโดยมาร์ตินเดอ Rainer (มหาวิทยาลัยเวียนนา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

GAL4, PR / GAL4 และ PRM / GAL4 ลำดับถูกขยายโดยวิธี PCR สำหรับการผลิตของการแสดงออกชั่วคราวเวกเตอร์ pcDNA-GAL4, pcDNA-PR / GAL4 และ pcDNA-PRM / GAL4 ตามลำดับ เพื่อจุดประสงค์นี้สร้าง pMA236, pHP236 และ pHP236m [22] ถูกนำมาใช้เป็นแม่แบบร่วมกับไพรเมอร์ไปข้างหน้าด้วยการขยาย GAL4 HindIII และเว็บไซต์ Noti ACGCACGCaagcttgcggccgcccaccATGAAGCTACTGT CTTCTATC และไพรเมอร์ GAL4 กลับมีการขยายเว็บไซต์สาลี่ ATAGCTGCGTGCGTGCGTgtcgacttactctttttttggg tttgg ผลิตภัณฑ์ PCR ถูกย่อยด้วย HindIII และสาลี่และ ligated เข้า pcDNA ™ 3.1 / Zeocin (Invitrogen, Carlsbad CA) PFR-EGFP แก้ไขจาก PFR-Luc (Stratagene) ได้ให้ความกรุณาโดยเรนเนอร์เดอมาร์ติน (มหาวิทยาลัยเวียนนา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

gal4 , ประชาสัมพันธ์ / gal4 PRM และ / gal4 ลำดับถูกขยายโดยวิธี PCR สำหรับการผลิตของ pcdna-gal4 เวกเตอร์การแสดงออกชั่วคราว pcdna PR / gal4 pcdna PRM และ / gal4 ตามลำดับ สำหรับวัตถุประสงค์นี้ pma236 , โครงสร้าง ,และ php236 php236m [ 22 ] ถูกใช้เป็นแม่แบบ ด้วยกันกับ gal4 ไปข้างหน้าด้วยการรองพื้นและเว็บไซต์ - เก็บไว้ตรงไหนก็ได้ acgcacgcaagcttgcggccgcccaccatgaagctactgt ​ cttctatc และ gal4 ย้อนกลับกับเว็บไซต์ atagctgcgtgcgtgcgtgtcgacttactctttttttggg รองพื้น ( สาลี่​ tttgg . ผลิตภัณฑ์ทั้งหมดจะถูกย่อยด้วย และสาลี่ - และผูกเป็น pcdna ™ 3.1/zeocin ( Invitrogen Carlsbad , CA ) egfp PFR ,ดัดแปลงจาก PFR ลุค ( stratagene ) ได้กรุณาให้โดย Rainer เดอมาร์ติน ( มหาวิทยาลัยเวียนนา )