Ferruginene C (3) was isolated as a

Ferruginene C (3) was isolated as a brownish gum and proved to
be a mixture of C-50(R) andC-50 (S) diastereomers. It was assigned
the molecular formula C22H30O3, from theHRESIMS [M
H]

peak at m/z 341.2134 (calcd for C22H29O3 341.2122). The 13C and
1H NMR spectroscopic data of 3 were found to be similar to those
reported for 1 (see Tables 1 and 2), but the constitution of the
cyclohexane ringmoiety was different. The 13CNMRspectrumof 3
showed signals of an olefinic methine (C-8) and an olefinic
quaternary carbon (C-9), while in the 1H NMR spectrum, a signal
was revealed for an olefinic methine proton (H-8) instead of the
oxymethine proton present in 1. These observations suggested that
compound 3 has no ether bridge between C-4a and C-5a and no
hydroxy group at C-6 as in ferruginenes A (1) andB(2).The carbon
backbone of 3 was confirmed using COSY, HSQC, and HMBC
spectroscopy (Table 2).A comparison with data of 1 (Table 1)
indicated that the terpenoid side chain was equal in constitution, but
that two diastereomers were evident. The proton shifts of the
diastereomers of 3 were similar, with the exeption of shifts of H-50
in major δH 3.97 (t, J = 6.3 Hz) and minor δH 3.92 (t, J = 6.3Hz)
diastereomers. Thus, the ratio of diastereomers (6:4) could be
determined by 1H NMR spectroscopy. NOESY spectroscopic
studies and the measurement of coupling constants (J7,12 = 10.1
Hz) indicated a trans-diaxial relationship between H-7 and H-12,
similar to the results obtained for 1 and 2.
The co-occurrence and the same carbon skeleton of compounds
1 and 3 suggested that 1 was biosynthesized from 3
through epoxidation of the C-5a, C-6 double bond followed by
cyclization from one of the phenolic groups to the epoxide ring of
3. On the basis of this hypothesis, compound 1 should be
presented as a mixture of C-50(R) and C-50(S) diastereomers.
However, the 1H and 13C NMR spectroscopic data showed that
only a single diastereomer of 1 was isolated. Its diastereomer at
the position C-50 might have been lost during the purification
process due to a low amount contained by the fraction. A
proposed biosynthetic pathway for the formation of compounds
1, 2, and 3 is shown in Scheme 1.
The known compounds were identified on the basis of their
spectroscopic data and by the comparison with values of the
triterpenoids ursolic, oleanolic, corosolic, and 2,3-hydroxyursolic
acids reported in the literature.7
10 The first three of these
compounds and erythrodiol are known secondary metabolites
produced by Rhododendron species.11
15 In addition, the isolation
of 2,3-hydroxyursolic acid from the stem bark of Cussonia
bancoensis16,17 and the leaves of Lagerstroemia speciosa18 has been
reported, while farrerol and scopoletin were extracted from the
leaves of R. ferrugineum5 and the stems of R. mucronulatum,19
respectively. Corosolic acid has been isolated previously from the
leaves of Prunus zippeliana, Eriobotrta japonica, and Tiarella
polyphylla.20
22
The isolated compounds 1, 2, and 3 (mixture of diastereomers)
were tested for their cytotoxic activity against the
HL-60, HeLa-S3, and MCF-7 cancer cell lines. All compounds
gave IC50 values of >20 μMfor all cell lines, with the exception of
compound 3 in the HL-60 cell line (IC50 13.7 μM). Compound 3
provided an IC50 value of >20 μM for the HEK-293 mammalian
noncancerous cell line, thus suggesting a significant selectivity
toward the HL-60 cell line. However, the difference in activity
between the two cell lines could reside in a general stronger effect
of the compound in suspension than in adherent cultures.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

C Ferruginene (3) ถูกแยกเป็นหมากฝรั่งน้ำตาล และพิสูจน์แล้วว่ามีส่วนผสมของ C-50(R) ตามสั่ง-50 (S) diastereomers ที่กำหนดสูตรโมเลกุล C22H30O3 จาก theHRESIMS [M H]สูงสุดที่ m/z 341.2134 (คำนวณสำหรับ C22H29O3 341.2122) 13C และข้อมูลด้าน NMR 1H 3 พบว่าคล้ายคลึงกับรายงาน 1 (ดูตารางที่ 1 และ 2), แต่รัฐธรรมนูญของการcyclohexane ringmoiety มีแตกต่างกัน 13CNMRspectrumof 3แสดงให้เห็นสัญญาณของการ methine olefinic (C-8) และการ olefinicquaternary คาร์บอน (C-9), ใน 1 H NMR สเปกตรัม สัญญาณเผยสำหรับโปรตอนเป็น olefinic methine (H-8) แทนoxymethine โปรตอนใน 1 ข้อสังเกตเหล่านี้แนะนำที่3 ผสมมีสะพานไม่มีอีเทอร์ระหว่าง C-4a และ C 5a และไม่มีกลุ่มไฮดร็อกซี่ที่ C-6 เช่น ferruginenes andB(2) (1) คาร์บอนกระดูกสันหลัง 3 ได้รับการยืนยัน ใช้ซี่ HSQC, HMBCมิก (ตาราง 2) การเปรียบเทียบกับข้อมูลของ 1 (ตาราง 1)ระบุว่า โซ่ข้าง terpenoid เท่าในรัฐธรรมนูญ แต่ที่สอง diastereomers ได้ชัด โปรตอนเลื่อนของการdiastereomers 3 ก็ ด้วย exeption กะของ H-50ในหลัก δH 3.97 (t, J = 6.3 Hz) และ 3.92 รอง δH (t, J = 6.3 Hz)diastereomers ดังนั้น อาจเป็นอัตราส่วนของ diastereomers (6:4)กำหนด โดยมิก 1H NMR NOESY ด้านการศึกษาและการประเมินของ coupling คง (J7, 12 = 10.1Hz) แสดงความสัมพันธ์ระหว่าง diaxial ระหว่าง H-7 H-12คล้ายกับผลได้รับสำหรับ 1 และ 2เกิดร่วมและโครงคาร์บอนเหมือนสาร1 และ 3 แนะนำว่า 1 เป็น biosynthesized จาก 3ผ่าน epoxidation ของ C-5a, C-6 คู่พันธะตามด้วยcyclization จากกลุ่มฟีนอแหวน epoxide ของ3. บนพื้นฐานของสมมติฐานนี้ 1 สารควรเป็นส่วนผสมของ C-50(R) และ C-50 (S) diastereomersอย่างไรก็ตาม 1H และ 13C NMR ด้านข้อมูลแสดงให้เห็นว่าเพียงเดียว diastereomer 1 ถูกแยก ของ diastereomer ที่ตำแหน่ง C-50 อาจสูญหายในระหว่างการทำให้บริสุทธิ์ดำเนินการเนื่องจากจำนวนต่ำที่มีอยู่ตามเศษส่วน Aเดิน biosynthetic ที่เสนอสำหรับการก่อตัวของสารประกอบ1, 2 และ 3 จะแสดงในรูปแบบที่ 1ระบุสารที่รู้จักกันบนพื้นฐานของการด้านข้อมูล และการเปรียบเทียบกับค่าของการtriterpenoids ursolic, oleanolic, corosolic และ hydroxyursolic 2, 3กรดรายงานใน literature.7 10 สามตัวแรกของเหล่านี้สารประกอบและ erythrodiol กันสารรองโดย species.11 สวนกุหลาบพันปี 15 นอกจากนี้ การแยกกรด 2, 3 hydroxyursolic จากเปลือกลำต้นของ Cussoniabancoensis16, 17 และใบของตะแบก speciosa18 ได้รายงาน ในขณะที่ farrerol และ scopoletin สกัดจากการใบของ R. ferrugineum5 และลำต้นของ R. mucronulatum, 19ตามลาดับ กรด Corosolic ได้แยกก่อนหน้านี้จากการใบของ Prunus zippeliana ลูกตา Eriobotrta และ Tiarellapolyphylla.20 22สารแยก 1, 2 และ 3 (ส่วนผสมของ diastereomers)ทดสอบสำหรับกิจกรรม cytotoxic กับการHL-60, HeLa S3 และรายการเซลล์มะเร็ง MCF-7 สารทั้งหมดให้ค่า IC50 > μMfor 20 เส้น เซลล์ทั้งหมดด้วยข้อยกเว้นของผสม 3 ในบรรทัด HL 60 เซลล์ (IC50 13.7 ไมครอน) ผสม 3มีค่า IC50 > 20 ไมครอนสำหรับκ HEK-293เซลล์ noncancerous บรรทัด จึง แนะนำวิธีอย่างมีนัยสำคัญต่อสายเซลล์ HL-60 อย่างไรก็ตาม ความแตกต่างในกิจกรรมระหว่างเซลล์สอง บรรทัดสามารถอยู่ในเอแข็งทั่วไปสารประกอบในการระงับกว่าในวัฒนธรรมของสาวก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Ferruginene C (3) ถูกแยกออกเป็นสีน้ำตาลเหงือกและพิสูจน์ให้เห็นว่า
จะเป็นส่วนผสมของ C-50 (R) andC-50 (S) diastereomers ได้รับมอบหมาย
C22H30O3 สูตรโมเลกุลจาก theHRESIMS [M? H]
สูงสุดที่ M / z 341.2134 (calcd สำหรับ C22H29O3 341.2122) 13C และ
1H NMR ข้อมูลสเปกโทรสโก 3 พบว่ามีความคล้ายคลึงกับที่
รายงานต่อ 1 (ดูตารางที่ 1 และ 2) แต่รัฐธรรมนูญของ
ringmoiety cyclohexane ที่แตกต่างกัน 13CNMRspectrumof 3
แสดงให้เห็นสัญญาณของ methine olefinic (C-8) และ olefinic
คาร์บอนสี่ (C-9) ในขณะที่ในสเปกตรัม 1H NMR สัญญาณ
ก็ถูกเปิดเผยสำหรับโปรตอน methine olefinic (H-8) แทน
oxymethine โปรตอนในปัจจุบัน 1. ข้อสังเกตเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า
สารประกอบ 3 ไม่มีสะพานอีเทอร์ระหว่าง C-4A และ C-5A และไม่มี
กลุ่มไฮดรอกซีที่ C-6 ใน ferruginenes A (1) andB (2) ได้โดยง่ายคาร์บอน
กระดูกสันหลังของ 3 ได้รับการยืนยัน ใช้ COSY, HSQC และ HMBC
สเปกโทรสโก (ตารางที่ 2) เปรียบเทียบกับลวด Cored Metallurgical ข้อมูลที่ 1 (ตารางที่ 1)
ชี้ให้เห็นว่าโซ่ข้าง terpenoid เท่ากับในรัฐธรรมนูญ แต่
ที่สอง diastereomers ชัดเจน กะโปรตอนของ
diastereomers 3 มีความคล้ายคลึงกับ exeption ของการเปลี่ยนแปลงของ H-50
ในเมเจอร์δH 3.97 (t, J = 6.3 Hz) และรองδH 3.92 (t, J = 6.3Hz)
diastereomers ดังนั้นอัตราส่วนของ diastereomers นี้ (6: 4) อาจจะมีการ
กำหนดโดย 1H NMR สเปกโทรสโก NOESY สเปกโทรสโก
การศึกษาและการวัดค่าคงที่ของการมีเพศสัมพันธ์ (J7,12 = 10.1
Hz) ชี้ให้เห็นความสัมพันธ์ Trans-diaxial ระหว่าง H-7 และ H-12
คล้ายกับผลที่ได้รับสำหรับ 1 และ 2
ร่วมที่เกิดขึ้นและคาร์บอนเดียวกัน โครงกระดูกของสาร
1 และ 3 ชี้ให้เห็นว่า 1 biosynthesized จาก 3
ผ่าน epoxidation C-5A, C-6 พันธะคู่ตามด้วย
cyclization จากหนึ่งในกลุ่มฟีนอลที่จะแหวนอิพอกไซด์ของ
3 บนพื้นฐานของสมมติฐานนี้ซึ่งเป็นสารประกอบที่ 1 ควรจะ
นำเสนอเป็นส่วนผสมของ C-50 (R) และ C-50 (S) diastereomers.
อย่างไรก็ตาม 1H และ 13C NMR ข้อมูลสเปกโทรสโกแสดงให้เห็นว่า
เพียง diastereomer เดียวของ 1 ที่แยกได้ . diastereomer ที่
ตำแหน่ง C-50 อาจจะได้รับหายไปในระหว่างการทำให้บริสุทธิ์
กระบวนการเนื่องจากมีปริมาณต่ำโดยมีเศษ
เสนอทางเดินชีวสังเคราะห์สำหรับการสะสมของสาร
1, 2 และ 3 จะแสดงในโครงการ 1.
สารที่รู้จักกันถูกระบุบนพื้นฐานของพวกเขา
ข้อมูลสเปกโทรสโกและโดยการเปรียบเทียบกับค่าของ
triterpenoids ursolic, oleanolic, Corosolic และ 2 3 hydroxyursolic
กรดรายงานใน literature.7 หรือไม่ 10 สามตัวแรกของทั้ง
สารประกอบและเป็นที่รู้จักกัน erythrodiol สารทุติยภูมิที่
ผลิตโดย Rhododendron species.11? 15 นอกจากนี้การแยก
ของกรด 2,3-hydroxyursolic จากเปลือกต้น Cussonia
bancoensis16,17 และใบของตะแบก speciosa18 ได้รับ
รายงานในขณะที่ farrerol และ scopoletin ถูกสกัดจาก
ใบของอาร์ ferrugineum5 และลำต้นของอาร์ mucronulatum 19
ตามลำดับ กรด Corosolic ได้รับการแยกออกมาก่อนหน้านี้จาก
ใบของ Prunus zippeliana, Eriobotrta japonica และ Tiarella
polyphylla.20 22
สารประกอบที่แยก 1, 2, และ 3 (ส่วนผสมของ diastereomers)
ได้มีการทดสอบว่าเป็นกิจกรรมที่เป็นพิษของพวกเขากับ
HL-60, HeLa -S3 และ MCF-7 เซลล์มะเร็ง สารประกอบทั้งหมด
ให้ค่า IC50 ของ> 20 μMforเซลล์ทั้งหมดที่มีข้อยกเว้นของ
สารประกอบที่ 3 ในรุ่น HL-60 เส้นเซลล์ (IC50 13.7 ไมครอน) สารประกอบ 3
ให้ค่า IC50 ของ> 20 ไมครอนสำหรับ HEK-293 เลี้ยงลูกด้วยนม
สายพันธุ์ของเซลล์ไม่ใช่มะเร็งจึงแนะนำการคัดสรรอย่างมีนัยสำคัญ
ที่มีต่อเซลล์ HL-60 อย่างไรก็ตามความแตกต่างในกิจกรรม
ระหว่างสองสายพันธุ์เซลล์สามารถอาศัยอยู่ในผลมากยิ่งขึ้นโดยทั่วไป
ของสารประกอบในการระงับกว่าในวัฒนธรรมสานุศิษย์