Superoxide dismutase (SOD, EC 1.15.1.1) activity was assayed by the method of Duan et al. (2011). Fresh peel tissues (2.0 g) from ten fingers withdrawn randomly from each treatment were homogenized with 10 mL of 50 mM sodium phosphate buffer (pH 7.0) containing 0.3 g insoluble polyvinylpolypyrrolidone (Sigma, St. Louis, MO) and then centrifuged at 15,000 × g for 45 min (Sigma 3K-15, Instrument Co. Ltd., Germany). The supernatant was collected to assay enzymatic activity. All steps in the preparation of enzymatic extract were carried out at 4 °C. Enzyme extract (50 μL) was mixed with 3 mL of reaction buffer solution consisting of 1.3 μM riboflavin, 13 mM methionine, 63 μM nitro blue tetrazolium (NBT) and 0.66 mM EDTA-Na2 in 0.05 M sodium phosphate buffer (pH 7.0). The reaction was started under 4000 lx irradiance at 25 °C for 30 min. A non-irradiated reaction mixture that did not develop color was used as the control. One unit (U) of SOD activity was defined as the amount of enzyme required to cause a 50% inhibition of the reduction of NBT as monitored at 560 nm
superoxide dismutase (SOD, EC 1.15.1.1) กิจกรรมได้รับการวิเคราะห์โดยวิธีด้วนและคณะ (2011) เนื้อเยื่อเปลือกสด (2.0 กรัม) จากสิบนิ้วมือถอนตัวออกสุ่มจากการรักษาแต่ละถูกหดหายกับ 10 มิลลิลิตร 50 มมโซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.0) ที่มี 0.3 กรัม polyvinylpolypyrrolidone ที่ไม่ละลายน้ำ (Sigma, เซนต์หลุยส์, MO) แล้วหมุนเหวี่ยงที่ 15,000 × กรัมเป็นเวลา 45 นาที (Sigma 3K-15, เครื่องมือ จำกัด , เยอรมนี) ใสถูกเก็บรวบรวมเพื่อ assay เอนไซม์ ทุกขั้นตอนในการเตรียมสารสกัดเอนไซม์ที่ได้รับการดำเนินการที่ 4 ° C สารสกัดจากเอนไซม์ (50 ไมโครลิตร) ผสมกับ 3 มิลลิลิตรของสารละลายบัฟเฟอร์ปฏิกิริยาประกอบด้วย 1.3 ไมโครโม riboflavin, 13 มิลลิ methionine, 63 ไมโครโมไนโตร tetrazolium สีฟ้า (NBT) และ 0.66 มิลลิ EDTA-Na2 ใน 0.05 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.0) ปฏิกิริยาเริ่มต้นภายใต้ 4000 LX รังสีที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 30 นาที ผสมปฏิกิริยาที่ไม่ผ่านการฉายรังสีที่ไม่ได้พัฒนาสีที่ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุม หนึ่งหน่วย (U) ของกิจกรรม SOD ถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ที่จำเป็นในการก่อให้เกิดการยับยั้ง 50% ของการลดลงของ NBT เป็นตรวจสอบที่ 560 นาโนเมตร
การแปล กรุณารอสักครู่..

Superoxide Dismutase ( SOD , EC 1.15.1.1 ) กิจกรรมในซีรั่มโดยวิธีด้วน et al . ( 2011 ) เนื้อเยื่อเปลือกสด ( 2.0 G ) จากสิบนิ้วถอนแบบสุ่มจากการรักษาแต่ละถูกบดกับ 10 มิลลิลิตร 50 มิลลิโมลาร์โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0 ) ที่มีการ polyvinylpolypyrrolidone 0.3 กรัม ( Sigma , St . Louis , MO ) และระดับที่ 15000 × G สำหรับ 45 นาที ( 3k-15 Sigma ,อุปกรณ์ จำกัด , เยอรมัน ) และน่านรวบรวมการทดสอบเอนไซม์ . ขั้นตอนในการเตรียมสารสกัดเอนไซม์ได้ทดลองที่ 4 ° C เอนไซม์สกัด ( 50 μลิตร ) ผสมกับ 3 มิลลิลิตรปฏิกิริยาสารละลายบัฟเฟอร์ที่ประกอบด้วยμ 1.3 M Riboflavin , methionine 13 มม. , 63 μ M Nitro สีฟ้า tetrazolium ( NBT ) และ 0.66 มม. edta-na2 ใน 0.05 M โซเดียมฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 7.0 )ปฏิกิริยาเริ่มต้นภายใต้อุณหภูมิ 25 ° C 4000 LX ดังกล่าวเป็นเวลา 30 นาที ที่ไม่ฉายรังสีปฏิกิริยาผสมที่ไม่ได้พัฒนาสี ที่ใช้ในการควบคุม หนึ่งหน่วย ( U ) ของกิจกรรมสดถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ ต้องทำให้เกิดการยับยั้งการลด 50% NBT เป็นตรวจสอบที่ 560 นาโนเมตร
การแปล กรุณารอสักครู่..
