Birds were individually identified

Birds were individually identified by a wing band and
housed in experimental pens from 01 to 25 days of age.
Birds received feed and water ad libitum during the entire
experimental period. The nutritional levels of diets (Table
1) were analyzed according to the methodology of the Brazilian
Compendium of Animal Feeding (2005).
Broilers were weighed at one, seven, 14, 21 and 25 days
of age. On days 7 and 14, each birds received by eye drop
0.03 mL of commercial vaccines against Newcastle Disease
Virus (NDV) HB1 strain (New-Vaxin®-Schering-Plough),
containing 105.5 infective doses, and against Infection Bursal
Virus Disease (IBVD) HVT-FC 126 strain (Gumborek®-Schering-Plough),
containing 103.0 infective doses.
On day 7, broilers were also orally vaccinated against coccidiosis
with a commercial vaccine (Bio-CoccivetR®-
Biovet) containing approximately 400 viable oocysts of E.
acervulina, E.brunetti, E. maxima, E. necatrix, E. praecox,
E. tenella and E. mitis.
Blood was weekly collected from the jugular vein and
placed in duly identified tubes with anticoagulant (heparin)
for serum analysis.
The following assays were performed in the serum: total
protein level by the biuret method, albumin level by Bromocresol
Green method, and globulin level was calculated
as the mathematical difference between total protein and
albumin. These assays were performed using Automatic
Biochemical System CELM SBA-200. Total erythrocytes,
hematocrit, hemoglobin, and plasma total protein were determined
in total blood, as well as the white series, in which
total leukocytes were determined and differentiated in heterophils,
lymphocytes, monocytes, eosinophils and basophils.
Antibody titers were determined using a commercial
ELISA (Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay) kit
(Idexx®) and read in Biotek EL800® micro plate reader.
NDV antibody titers were determined by hemagglutinationinhibition
(HI) test performed according to Cunnigham
(1971). On days 21 and 25, five birds per treatment were
euthanized using barbiturates, and necropsied to evaluate
coccidiosis by lesion scoring, according to Johnson and
Reid (1970). Liver, duodenum, and cecum samples were
collected in buffered formalin solution (10%) for histological,
morphometric and immunohistochemistry (only duodenum
and cecum) analyses.
Duodenum and cecum samples were processed for histology
and stained with hematoxylin-eosin. Villi height and
crypt depth were measured according to Maiorka et al.
(2000), using an image-analyzing system (Motic Images
Plus 2.0) coupled to a microscope (Olympus BH2).
Liver samples were analyzed for normal morphology and
presence of lymphoid clusters. Sections with lymphoid
clusters were quantified with a microscope (Olympus BH2)
at 10X magnification. Sections for immunohistochemistry
were dewaxed and re-hydrated. Antigen was retrieved using
citrate buffer at pH 6.0 and blocking of endogenous peroxidase
with hydrogen peroxide at 3% and blocking protein,
Anti-CD3, diluted at 1:300, was the primary antibody used.
Anti-mice and anti-rabbit secondary antibodies were combined
in the same amplification system and used to detect
the reaction. Intra-epithelial CD3+ cells in duodenum villi
tips were counted and expressed as number of CD3+
per
field (100X). The presence lymphoid clusters were analyzed
in cecal tissues.
Results were analyzed using statistical program Statistix
for Windows Copyright (C) 1985. Antibody titers measured
by ELISA and hemaglutination-inhibition tests were Log10
transformed. Data were submitted to analysis of variance
(ANOVA) at P

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

นกแต่ละระบุ โดยวงปีก และห้องพักในปากกาทดลองจาก 01 เป็นวันที่ 25 ของอายุนกได้รับอาหารและน้ำที่ ad libitum ระหว่างทั้งหมดรอบระยะเวลาทดลอง ระดับคุณค่าทางโภชนาการของอาหาร (ตาราง1) ได้วิเคราะห์ตามวิธีการที่บราซิลย่อของสัตว์ให้อาหาร (2005)ออกได้หลายที่หนึ่ง 7, 14, 21 และ 25 วันอายุ ในวันที่ 7 และ 14 นกแต่ละรับฝากตา0.03 mL ของรู้ค้ากับโรคนิวคาสเซิลต้องใช้ HB1 ไวรัส (NDV) (นิว-Vaxin ®-เมอร์ค),ประกอบด้วยปริมาณ infective 105.5 และติดเบอร์ซ่าอักเสบติดต่อโรคไวรัส (IBVD) ต้องใช้ 126 HVT FC (Gumborek ®-เมอร์ค),ประกอบด้วยปริมาณ infective 103.0ในวันที่ 7 ออกเนื้อหายังฉีดกับ coccidiosisด้วยวัคซีนพาณิชย์ (ไบ CoccivetR ®-Biovet) มีประมาณ 400 ได้ oocysts ของอีacervulina, E.brunetti, E. แมก E. necatrix, praecox ตะวันออกTenella ตะวันออกและฝั่งตะวันออก mitisรายสัปดาห์ถูกเก็บเลือดจากหลอดเลือดดำ jugular และวางท่อที่รับรองสำเนาถูกต้องระบุกับ anticoagulant (เฮพาริน)สำหรับการวิเคราะห์ซีรั่มดำเนิน assays ต่อในซีรั่ม: รวมระดับโปรตีน โดยวิธี biuret ระดับ albumin โดย Bromocresolสีเขียว วิธีการ และคำนวณระดับกลอบูลินเป็นความแตกต่างทางคณิตศาสตร์ระหว่างโปรตีนรวม และalbumin Assays เหล่านี้ได้ดำเนินการใช้โดยอัตโนมัติSBA CELM ระบบชีวเคมี-200 ทั้งหมด erythrocytesกำหนด hematocrit ฮีโมโกลบิน และพลาสมาโปรตีนรวมในเลือดรวม ชุดขาว ที่leukocytes รวมกำหนด และแตกต่างกันใน heterophilslymphocytes, monocytes, eosinophils แล้ว basophilsTiters แอนติบอดีถูกกำหนดใช้การพาณิชย์ELISA (เอนไซม์เชื่อมโยง Immuno ดูดซับ Assay) ชุด(Idexx ®) และอ่านในเครื่องอ่านแผ่นไมโคร® Biotek EL800Titers NDV แอนติบอดีถูกกำหนด โดย hemagglutinationinhibition(HI) ทดสอบปฏิบัติตาม Cunnigham(1971) ในวันที่ 21 และ 25 นกห้าต่อการรักษาได้euthanized ใช้ barbiturates และ necropsied ในการประเมินcoccidiosis โดยแผลคะแนน ตาม Johnson และReid (1970) ตัวอย่างตับ duodenum และ cecum มีรวบรวมไว้ในโซลูชัน formalin ถูกบัฟเฟอร์ (10%) สำหรับสรีรวิทยาmorphometric และ immunohistochemistry (เฉพาะ duodenumและ cecum) วิเคราะห์ตัวอย่างของ duodenum และ cecum ถูกประมวลผลสำหรับมิญชวิทยาและทิ้งคราบกับ hematoxylin eosin ความสูงของ villi และความลึก crypt ถูกวัดตาม Maiorka et al(2000), ใช้เป็นภาพการวิเคราะห์ระบบ (ภาพ Moticบวก 2.0) ควบคู่กับกล้องจุลทรรศน์ (BH2 โอลิมปัส)มีวิเคราะห์ตัวอย่างตับสำหรับสัณฐานวิทยาปกติ และสถานะของคลัสเตอร์ lymphoid ส่วนกับ lymphoidคลัสเตอร์ถูก quantified ด้วยกล้องจุลทรรศน์ (BH2 โอลิมปัส)ที่อัตราขยาย 10 เท่า ส่วนสำหรับ immunohistochemistrydewaxed และผลิตภัณฑ์ใหม่ ตรวจหาถูกเรียกใช้ซิเตรตบัฟเฟอร์ที่ pH 6.0 และบล็อกของ endogenous peroxidaseด้วยไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ 3% และโปรตีนบล็อกป้องกัน-CD3 ผสมใน 1:300 แอนติบอดีหลักที่ใช้ได้ป้องกันหนูและกระต่ายป้องกันการแอนตี้รองถูกรวมในการขยายระบบเดียวกัน และใช้ในการตรวจสอบปฏิกิริยาการ ภายใน epithelial CD3 + เซลล์ duodenum villiตรวจนับ และแสดงเป็นเลขของ CD3 + เคล็ดลับ ต่อฟิลด์ (100 X) มีวิเคราะห์กลุ่ม lymphoid สถานะในเนื้อเยื่อ cecalผลลัพธ์ที่ได้วิเคราะห์โดยใช้สถิติโปรแกรม Statistixสำหรับ Windows ลิขสิทธิ์ (C) 1985 วัด titers แอนติบอดีโดย hemaglutination ยับยั้งและ ELISA ทดสอบถูก Log10แปลง ส่งมาที่วิเคราะห์ผลต่างของข้อมูล(การวิเคราะห์ความแปรปรวน) ที่ P < 0.05 และวิธีถูกเปรียบเทียบ โดยการทดสอบของ Tukey

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

นกเป็นรายบุคคลที่ถูกระบุโดยวงดนตรีปีกและตั้งอยู่ในปากกาทดลอง 01-25 วันอายุ. นกได้รับอาหารและน้ำกินอย่างเต็มที่ตลอดทั้งระยะเวลาการทดลอง ระดับคุณค่าทางโภชนาการของอาหาร (ตารางที่1) ถูกนำมาวิเคราะห์ตามวิธีการของบราซิลย่อของการให้อาหารสัตว์(2005). ไก่ถูกชั่งน้ำหนักที่หนึ่งในเจ็ด, 14, 21 และ 25 วันอายุ ในวันที่ 7 และ 14 นกแต่ละคนได้รับด้วยตาลดลง0.03 มิลลิลิตรของวัคซีนในเชิงพาณิชย์กับนิวคาสเซิโรคไวรัส(NDV) สายพันธุ์ HB1 (ใหม่Vaxin® Schering-Plough-) ที่มีปริมาณ 105.5 ติดเชื้อและต่อการติดเชื้อ Bursal โรคไวรัส (IBVD ) HVT-126 สายพันธุ์เอฟซี (Gumborek®-Schering-Plough) ที่มีปริมาณ 103.0 ติดเชื้อ. ในวันที่ 7, ไก่ก็ยังรับประทานกับการฉีดวัคซีนโรคบิดมีการฉีดวัคซีนในเชิงพาณิชย์(Bio-CoccivetR®- Biovet) ที่มีประมาณ 400 oocysts ทำงานของ E . acervulina, E.brunetti, แม็กซิม่าอีอี necatrix อี praecox, อี . และ E. tenella mitis เลือดถูกเก็บรวบรวมรายสัปดาห์จากเส้นเลือดใหญ่เส้นและวางไว้ในท่อระบุรับรองสำเนาถูกต้องด้วยสารกันเลือดแข็ง (เฮ) สำหรับการวิเคราะห์ซีรั่ม. การตรวจต่อไปนี้ถูกดำเนินการในซีรั่ม: รวมระดับโปรตีนด้วยวิธีbiuret ระดับอัลบูมิโดย bromocresol วิธีการสีเขียวและระดับโกลบูลิที่คำนวณได้เป็นความแตกต่างทางคณิตศาสตร์ระหว่างโปรตีนรวมและโปรตีนชนิดหนึ่ง การตรวจเหล่านี้ถูกดำเนินการโดยใช้อัตโนมัติระบบชีวเคมี CELM SBA-200 เม็ดเลือดแดงรวม, ฮี, ฮีโมโกลและพลาสม่าโปรตีนได้รับการพิจารณาในเลือดรวมเช่นเดียวกับชุดสีขาวซึ่งในเม็ดเลือดขาวรวมได้รับการพิจารณาและความแตกต่างในheterophils, เซลล์เม็ดเลือดขาว, monocytes, eosinophils และ basophils. ระดับแอนติบอดีถูกกำหนดใช้ในเชิงพาณิชย์วิธี ELISA (เอนไซม์ที่เชื่อมโยงดูดซับ Immuno Assay) ชุด(Idexx®) และอ่านใน Biotek EL800®อ่านแผ่นไมโคร. NDV ระดับแอนติบอดีถูกกำหนดโดย hemagglutinationinhibition (ฮาวาย) ดำเนินการทดสอบตาม Cunnigham (1971) ในวันที่ 21 และ 25 ห้านกต่อการรักษาที่ถูกeuthanized ใช้ barbiturates และ necropsied การประเมินโรคบิดโดยการให้คะแนนแผลตามที่จอห์นสันและเรด(1970) ตับลำไส้เล็กส่วนต้นและตัวอย่างลำไส้ใหญ่ส่วนต้นถูกเก็บรวบรวมในการแก้ปัญหาฟอร์มาลินบัฟเฟอร์ (10%) สำหรับเนื้อเยื่อ, เมตริกและ immunohistochemistry (ต้นเพียงและลำไส้ใหญ่ส่วนต้น) วิเคราะห์. ลำไส้เล็กส่วนต้นและตัวอย่างลำไส้ใหญ่ส่วนต้นที่ถูกประมวลผลสำหรับเนื้อเยื่อและย้อมด้วยสี hematoxylin-Eosin ความสูง villi และลึกฝังศพใต้ถุนโบสถ์วัดตามMaiorka et al. (2000) โดยใช้ระบบภาพวิเคราะห์ (รูปภาพ MOTIC พลัส 2.0) คู่กับกล้องจุลทรรศน์ (โอลิมปั BH2). ตัวอย่างตับถูกนำมาวิเคราะห์หาลักษณะทางสัณฐานวิทยาปกติและการปรากฏตัวของกลุ่มต่อมน้ำเหลือง. ส่วนที่มีต่อมน้ำเหลืองกลุ่มที่ถูกวัดด้วยกล้องจุลทรรศน์ (โอลิมปั BH2) ที่กำลังขยาย 10X ส่วนสำหรับ immunohistochemistry ถูก dewaxed และอีกไฮเดรท Antigen ถูกดึงโดยใช้บัฟเฟอร์ซิเตรตที่pH 6.0 และปิดกั้นของ peroxidase ภายนอกด้วยไฮโดรเจนเปอร์ออกไซด์ที่3% และการปิดกั้นโปรตีนต่อต้านCD3 เจือจาง 1: 300 เป็นแอนติบอดีหลักที่ใช้. ป้องกันหนูและป้องกันกระต่ายแอนติบอดีรองได้ รวมในการขยายระบบเดียวกันและใช้ในการตรวจหาปฏิกิริยา CD3 ภายในเยื่อบุผิว + เซลล์ใน villi ต้นเคล็ดลับนับและแสดงเป็นจำนวนCD3 + ต่อสาขา (100X) กลุ่มต่อมน้ำเหลืองปรากฏตัวถูกนำมาวิเคราะห์ในเนื้อเยื่อ cecal. ผลที่ได้มาวิเคราะห์ทางสถิติโดยใช้โปรแกรม Statistix สำหรับ Windows ลิขสิทธิ์ (C) 1985 ระดับแอนติบอดีวัดโดยวิธีELISA และการทดสอบการยับยั้ง hemaglutination-log10 ถูกเปลี่ยน ข้อมูลถูกส่งไปวิเคราะห์ความแปรปรวน(ANOVA) ที่ระดับ P <0.05 และวิธีการเปรียบเทียบโดยการทดสอบของTukey