There are two common methods in whi

There are two common methods in which to construct a DNA molecular-weight size marker.[3] One such method employs the technique of partial ligation.[3] DNA ligation is the process by which linear DNA pieces are connected to each other via covalent bonds; more specifically, these bonds are phosphodiester bonds.[4] Here, a 100bp duplex DNA piece is partially ligated. The consequence of this is that dimers of 200bp, trimers of 300bp, tetramers of 400bp, pentamers of 500bp, etc. will form. Additionally, a portion of the 100bp dsDNA will remain. As a result, a DNA "ladder" composed of DNA pieces of known molecular mass is created on the gel.[3]

The second method employs the use of restriction enzymes and a recognized DNA sequence.[3] The DNA is digested by a particular restriction enzyme, resulting in DNA pieces of varying molecular masses. One of the advantages of this method is that more marker can readily be created simply by digesting more of the known DNA.[3] On the other hand, the size of the DNA pieces are based on the sites where the restriction enzyme cuts. This makes it more difficult to control the size of the fragments in the marker.[5]

More recently, another method for constructing DNA molecular-weight size markers is being employed by laboratories. This strategy involves the use of Polymerase Chain Reaction (PCR).[5] This is achieved one or two ways: 1) a DNA target is amplified at the same time via primer sets, or 2) different DNA targets are amplified independently via particular primers.[5]

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มีสองวิธีในการสร้างเครื่องหมายขนาดน้ำหนักโมเลกุลดีเอ็นเอ[3] วิธีการดังกล่าวหนึ่งใช้เทคนิคของไข่บางส่วน[3] ไข่ดีเอ็นเอเป็นกระบวนการที่ชิ้นส่วนดีเอ็นเอเส้นเชื่อมต่อกันผ่านโคเวเลนต์พันธบัตร อื่น ๆ โดยเฉพาะ พันธบัตรเหล่านี้เป็นพันธบัตร phosphodiester[4] ที่นี่ ดีเอ็นเอ 100bp สองชิ้นเป็นบางส่วนควบ สัจจะนี้คือ ว่า dimers 200bp, trimers 300bp, tetramers 400bp, pentamers 500bp ฯลฯ จะเป็น นอกจากนี้ ส่วนของ 100bp dsDNA จะยังคงอยู่ ดังนั้น "บันได" ประกอบด้วยชิ้นส่วนดีเอ็นเอของทราบมวลโมเลกุลดีเอ็นเอถูกสร้างบนเจ[3]วิธีสองมีการใช้เอนไซม์จำกัดและรู้จักลำดับดีเอ็นเอ[3] ดีเอ็นเอถูกต้อง ด้วยข้อจำกัดที่เฉพาะเอนไซม์ ในชิ้นดีเอ็นเอของมวลชนโมเลกุลแตกต่างกัน หนึ่งข้อดีของวิธีนี้คือให้การเพิ่มเติมเครื่องหมายพร้อมสามารถสร้าง โดย digesting ของดีเอ็นเอที่รู้จักเพียงแต่[3] ในทางกลับกัน ขนาดของชิ้นดีเอ็นเออยู่บนไซต์ที่ตัดเอนไซม์จำกัด ซึ่งทำให้ยากต่อการควบคุมขนาดของชิ้นส่วนในเครื่องหมาย[5]เมื่อเร็ว ๆ นี้ วิธีอื่นในการสร้างดีเอ็นเอขนาดน้ำหนักโมเลกุลเครื่องหมายจะถูกจ้าง โดยห้องปฏิบัติการ กลยุทธ์นี้เกี่ยวข้องกับการใช้ของปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรส (PCR)[5] ซึ่งสามารถทำได้หนึ่ง หรือสองวิธี: 1) ดีเอ็นเอเป้าหมายจะขยายในเวลาเดียวกันผ่านชุดรองพื้น หรือดีเอ็นเอเป้าหมาย 2) แตกต่างกันจะขยายอย่างอิสระผ่านเฉพาะไพรเมอร์[5]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

มีสองวิธีการทั่วไปที่สร้างโมเลกุลเครื่องหมายดีเอ็นเอขนาด [ 3 ] เช่น วิธีหนึ่งที่ใช้เทคนิคของ Ligation บางส่วน . [ 3 ] ดีเอ็นเอ Ligation คือ กระบวนการ ซึ่งเส้นชิ้นดีเอ็นเอที่เชื่อมต่อกับแต่ละอื่น ๆผ่านทางพันธะโควาเลนท์ ; มากขึ้นโดยเฉพาะหุ้นกู้หุ้นกู้ฟ โฟไดเ เตอร์ [ 4 ] ที่นี่ , 100bp เพล็กซ์ดีเอ็นเอชิ้นบางส่วนผูก .เพราะนี้คือ สายของ 200bp trimers 300bp tetramers , ของ , ของ 400bp pentamers ของ 500bp , ฯลฯ จะฟอร์ม นอกจากนี้ ส่วนของ 100bp dsdna จะยังคงอยู่ เป็นผลให้ดีเอ็นเอ " บันได " ประกอบด้วยดีเอ็นเอชิ้นหรือมวลโมเลกุลถูกสร้างขึ้นบนเจล [ 3 ]

วิธีที่สองจะใช้เอนไซม์ที่รู้จักดีเอ็นเอและลำดับ[ 3 ] ดีเอ็นเอจะถูกย่อยโดยเอนไซม์จำกัดเฉพาะผลดีเอ็นเอชิ้นของการเปลี่ยนแปลงโมเลกุลมวลชน . หนึ่งในข้อดีของวิธีนี้คือ เครื่องหมายเพิ่มเติมพร้อมสามารถถูกสร้างขึ้นโดยเพียงย่อยมากกว่ารู้จักดีเอ็นเอ [ 3 ] บนมืออื่น ๆ , ขนาดของชิ้นดีเอ็นเอจะขึ้นอยู่กับเว็บไซต์ที่เอนไซม์ตัดนี้จะทำให้มันมากขึ้นยากที่จะควบคุมขนาดของชิ้นส่วนในเครื่องหมาย [ 5 ]

เมื่อเร็วๆ นี้ อีกวิธีสำหรับการสร้างโมเลกุลเครื่องหมายดีเอ็นเอขนาดถูกจ้างโดยห้องปฏิบัติการ กลยุทธ์นี้เกี่ยวข้องกับการใช้เทคนิคพีซีอาร์ ( PCR ) [ 5 ] นี่คือความหนึ่งหรือสองวิธี : 1 ) ดีเอ็นเอเป้าหมายจะขยายในเวลาเดียวกันผ่านทางชุดไพรเมอร์ ,หรือ 2 ) เป้าหมายจะขยายได้อย่างอิสระผ่านทางดีเอ็นเอที่แตกต่างกันโดยเฉพาะ [ 5 ]