The samples were sectioned 4µm thic

The samples were sectioned 4µm thick and fixed in acetone (5 min at -20℃). The sections were blocked with blocking solution (85-9043, Zymed, San Francisco, CA, USA) for 30 min and then they were incubated in a humidified chamber at 4℃ for 18 hours with monoclonal anti-human PIP antibody, which detects procollagen type I C-terminal peptide (M011, 1:1,000, Takara, Shiga, Japan). After washing in PBS, the sections were incubated with biotinylated secondary antibody (85-9043, Zymed) for 15 min. The sections were incubated with streptavidin (85-9043, Zymed) for 15 min, and the color reaction was performed with AEC (3-amino-9-ethylcarbazole; 00-2007, Zymed) developing solution for 5 to 10 min. The cell nuclei were then counterstained with Mayer's hematoxylin (S3309, Dako), and the samples were mounted using Faramount Aqueous Mounting Medium (S3025, Dako, USA).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตัวอย่างดี 4µm ส่วน ๆ หนา และถาวรในอะซีโตน (5 นาทีที่ - 20℃) ส่วนบล็อกกับบล็อกโซลูชัน (85-9043, Zymed, San Francisco, CA, USA) สำหรับ 30 นาทีแล้ว พวกเขามี incubated ในห้อง humidified ที่ 4 ℃สำหรับโมโนมนุษย์ป้องกันปีบแอนติบอดี ซึ่งตรวจพบ procollagen 18 ชั่วโมงชนิดผมเปปซีเทอร์มินัล (M011, 1:1, 000, Takara ชิงะ ญี่ปุ่น) หลังจากซักผ้าใน PBS ส่วนถูกจัด incubated กับ biotinylated รองแอนติบอดี (85-9043, Zymed) สำหรับ 15 นาที ส่วนที่ incubated กับ streptavidin (85-9043, Zymed) สำหรับ 15 นาที และทำปฏิกิริยาสีกับ AEC (3-อะมิโน-9-ethylcarbazole; 00-2007, Zymed) พัฒนาโซลูชั่นสำหรับ 5-10 นาที แอลฟาเซลล์ได้แล้ว counterstained กับ hematoxylin ของเมเยอร์ (S3309, Dako), และตัวอย่างถูกติดตั้งโดยใช้ Faramount อควีติดตั้งสื่อ (S3025, Dako สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตัวอย่างถูกแบ่ง4μmหนาและการแก้ไขในอะซีโตน (5 นาทีที่อุณหภูมิ -20 ℃) ส่วนที่ถูกบล็อกกับการแก้ปัญหาการปิดกั้น (85-9043, Zymed, San Francisco, CA, USA) เป็นเวลา 30 นาทีและพวกเขาก็ถูกบ่มในห้องความชื้นที่ 4 ℃ 18 ชั่วโมงกับ PIP แอนติบอดีต่อต้านมนุษย์โมโนโคลนอลซึ่งตรวจพบ procollagen พิมพ์ผมเปปไทด์ C-ขั้ว (M0​​11, 1: 1,000 Takara ชิ, ญี​​่ปุ่น) หลังจากล้างพีบีเอสในส่วนที่ถูกบ่มกับแอนติบอดี biotinylated รอง (85-9043, Zymed) เป็นเวลา 15 นาที ส่วนที่ถูกบ่มกับ streptavidin (85-9043, Zymed) เป็นเวลา 15 นาทีและปฏิกิริยาสีได้ดำเนินการกับประชาคมเศรษฐกิจอาเซียน (3 อะมิโน-9-ethylcarbazole; 00-2007, Zymed) วิธีการแก้ปัญหาการพัฒนาเป็นเวลา 5 ถึง 10 นาที นิวเคลียสเซลล์ถูก counterstained แล้วกับเมเยอร์ hematoxylin (S3309, Dako) และกลุ่มตัวอย่างที่ได้รับการติดตั้งโดยใช้ Faramount น้ำติดกลาง (S3025, Dako สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตัวอย่าง ( ตัด 4 µ M หนาและคงที่ในอะซิโตน ( 5 นาทีที่อุณหภูมิ - 20 ℃ ) ส่วนที่ถูกบล็อกกับบล็อกโซลูชั่น ( 85-9043 zymed , ซานฟรานซิสโก , CA , USA ) เป็นเวลา 30 นาที จากนั้นทำการบ่มใน humidified ห้องที่ 4 ℃ 18 ชั่วโมงกับโมโนโคลนอลแอนติบอดีต่อต้านมนุษย์ pip ซึ่งตรวจพบโปรคอลลาเจนชนิดเปปไทด์ ( ซึ่ง m011 000 ทาการะ , , , ชิกะ , ญี่ปุ่น )หลังจากล้างพีบีเอส ส่วนที่ถูกบ่มกับระดับแอนติบอดี ( 85-9043 zymed ไล , ) เป็นเวลา 15 นาที ส่วนที่ถูกแยก streptavidin ( 85-9043 zymed , ) 15 นาที และสีปฏิกิริยาแสดงกับประชาคมเศรษฐกิจอาเซียน ( 3-amino-9-ethylcarbazole ; 00-2007 zymed , พัฒนาโซลูชั่นสำหรับ 5 ถึง 10 นาที แล้ว counterstained เซลล์นิวเคลียสกับ เมเยอร์ ก็ย้อม ( s3309 ทางหนึ่ง , )และตัวอย่างที่ติดตั้งใช้ faramount น้ำปานกลาง ( s3025 ทางหนึ่ง , ติดตั้ง , USA )