- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
Pierce et al. (2008) developed a me
Pierce et al. (2008) developed a method based on fungal biofilm
development. In their model, biofilms of medically-important
moulds and yeasts grown in a 96-well microtiter plate were subjected
to antifungal drugs. The tetrazolium salt was added to
measure the metabolic activities of cells within the biofilm. By this
method, the rate of biofilm formation was shown to be reproducible
and there were no statistical differences in replicate values of
the susceptibility tests.
Clausen and Yang (2011) optimized parameters for the XTT
microassay and demonstrated that the variability between fungal
species can be used to demonstrate the relative resistance of
different fungal species to several antifungal agents. Since isothiazolinone
is commonly used by the wood preservation industry
to inhibit mould growth on preservative treated wood, it was
selected as the model compound for this study to compare laboratory
mould resistance test methods.
The objectives of this study were 1) to compare the MIC90 for
isothiazolinone using the XTT assay with the MIC90 for two standardized
laboratory methods, 2) to verify XTT results with ATP
production, and 3) to assess fungicidal versus fungistatic activity of
isothiazolinone against mould spores using the XTT assay.
2. Materials and methods
2.1. XTT assay reagents
Growth medium supporting spore germination was RPMI 1640
medium (Moore et al., 1967) without sodium bicarbonate supplemented
with L-glutamine and buffered with 165 mM morpholinepropanesulfonic
(MOPS) acid, pH 7.0 (SigmaeAldrich, St. Louis,
MO) (Pierce et al., 2008). The tetrazolium salt, 2,3-bis(2-methoxy-
4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenyl-amino)carbonyl]-2H-tetrazolium
hydroxide (hereafter called XTT) (SigmaeAldrich) was diluted
in phosphate buffered saline, (PBS; 10 mM phosphate buffer,
2.7 mM potassium chloride, 137 mM sodium chloride, pH 7.4)
(SigmaeAldrich) to a concentration of 0.5 g l-1, filter-sterilized and
stored in 10 ml aliquots protected from light at 70 C. A 10 mM
stock of menadione (2-methyl-1,4 naphthoquinone) (Sigmae
Aldrich) was prepared in 100% acetone and stored in 50 ml
aliquots at 70 C. Isothiazolinone (SUPATIMBER H.E.14, supplied
by Viance, Charlotte, NC) served as the model mould inhibitor. Twofold
dilutions of isothiazolinone were prepared resulting in
concentrations ranging 0e800 ppm. Isothiazolinone was diluted in
RPMI for the XTT assay and in water for the American Wood
Protection Association Standards (AWPA) and American Society for
Testing Materials (ASTM) standardized test methods.
2.2. Spore inoculum
Mould fungi, Aspergillus niger 2.242 (provided by the University
of Virginia School of Medicine, Charlottesville, Virginia, USA),
Penicillium chrysogenum PH02 (provided by the USDA Forest
Products Laboratory, Madison, Wisconsin, USA) and Trichoderma
atroviride ATCC 20476 were maintained on 2% malt extract agar
(Difco Laboratories, Detroit, Michigan, USA) and stored at 5 C.
Individual isolates were grown on 2% malt extract agar in Petri
dishes and incubated at 27 C for two weeks. Two different spore
suspensions were prepared as described below:
For the XTT assay, spores from individual test fungi were
collected by flooding the surface of a two-week-old culture with
10 ml of sterile PBS plus 0.025% Tween-20. The resulting spore
suspension was removed via aspiration to a sterile container,
washed twice in sterile PBS and collected by centrifugation at
3000 g for 15 min each at 4 C. Spores suspended in RPMI 1640
were counted with a hemocytometer and further diluted in RPMI to
development. In their model, biofilms of medically-important
moulds and yeasts grown in a 96-well microtiter plate were subjected
to antifungal drugs. The tetrazolium salt was added to
measure the metabolic activities of cells within the biofilm. By this
method, the rate of biofilm formation was shown to be reproducible
and there were no statistical differences in replicate values of
the susceptibility tests.
Clausen and Yang (2011) optimized parameters for the XTT
microassay and demonstrated that the variability between fungal
species can be used to demonstrate the relative resistance of
different fungal species to several antifungal agents. Since isothiazolinone
is commonly used by the wood preservation industry
to inhibit mould growth on preservative treated wood, it was
selected as the model compound for this study to compare laboratory
mould resistance test methods.
The objectives of this study were 1) to compare the MIC90 for
isothiazolinone using the XTT assay with the MIC90 for two standardized
laboratory methods, 2) to verify XTT results with ATP
production, and 3) to assess fungicidal versus fungistatic activity of
isothiazolinone against mould spores using the XTT assay.
2. Materials and methods
2.1. XTT assay reagents
Growth medium supporting spore germination was RPMI 1640
medium (Moore et al., 1967) without sodium bicarbonate supplemented
with L-glutamine and buffered with 165 mM morpholinepropanesulfonic
(MOPS) acid, pH 7.0 (SigmaeAldrich, St. Louis,
MO) (Pierce et al., 2008). The tetrazolium salt, 2,3-bis(2-methoxy-
4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenyl-amino)carbonyl]-2H-tetrazolium
hydroxide (hereafter called XTT) (SigmaeAldrich) was diluted
in phosphate buffered saline, (PBS; 10 mM phosphate buffer,
2.7 mM potassium chloride, 137 mM sodium chloride, pH 7.4)
(SigmaeAldrich) to a concentration of 0.5 g l-1, filter-sterilized and
stored in 10 ml aliquots protected from light at 70 C. A 10 mM
stock of menadione (2-methyl-1,4 naphthoquinone) (Sigmae
Aldrich) was prepared in 100% acetone and stored in 50 ml
aliquots at 70 C. Isothiazolinone (SUPATIMBER H.E.14, supplied
by Viance, Charlotte, NC) served as the model mould inhibitor. Twofold
dilutions of isothiazolinone were prepared resulting in
concentrations ranging 0e800 ppm. Isothiazolinone was diluted in
RPMI for the XTT assay and in water for the American Wood
Protection Association Standards (AWPA) and American Society for
Testing Materials (ASTM) standardized test methods.
2.2. Spore inoculum
Mould fungi, Aspergillus niger 2.242 (provided by the University
of Virginia School of Medicine, Charlottesville, Virginia, USA),
Penicillium chrysogenum PH02 (provided by the USDA Forest
Products Laboratory, Madison, Wisconsin, USA) and Trichoderma
atroviride ATCC 20476 were maintained on 2% malt extract agar
(Difco Laboratories, Detroit, Michigan, USA) and stored at 5 C.
Individual isolates were grown on 2% malt extract agar in Petri
dishes and incubated at 27 C for two weeks. Two different spore
suspensions were prepared as described below:
For the XTT assay, spores from individual test fungi were
collected by flooding the surface of a two-week-old culture with
10 ml of sterile PBS plus 0.025% Tween-20. The resulting spore
suspension was removed via aspiration to a sterile container,
washed twice in sterile PBS and collected by centrifugation at
3000 g for 15 min each at 4 C. Spores suspended in RPMI 1640
were counted with a hemocytometer and further diluted in RPMI to
0/5000
เพียร์ซ et al. (2008) พัฒนาวิธีการขึ้นอยู่กับเชื้อรา biofilmการพัฒนา ในรูปแบบของพวกเขา biofilms ทางสำคัญแม่พิมพ์และ yeasts โตในจาน microtiter 96 ดีถูกต้องให้ยาต้านเชื้อรา มีเพิ่มเกลือ tetrazoliumวัดกิจกรรมเผาผลาญของเซลล์ภายใน biofilm โดยการนี้วิธี อัตราการก่อตัวของ biofilm ที่แสดงจะจำลองและมีไม่แตกต่างกันทางสถิติค่า replicateไก่ทดสอบClausen และยาง (2011) เพิ่มประสิทธิภาพพารามิเตอร์สำหรับ XTTmicroassay และสาธิตที่สำหรับความผันผวนระหว่างเชื้อราสามารถใช้ชนิดแสดงให้เห็นถึงความต้านทานที่ญาติของสายพันธุ์เชื้อราต่าง ๆ ไปหลายตัวแทนต้านเชื้อรา ตั้งแต่ isothiazolinoneโดยทั่วไปใช้ โดยอุตสาหกรรมไม้อนุรักษ์ยับยั้งการเจริญเติบโตของแม่พิมพ์บนไม้ preservative บำบัด มันเป็นเลือกเป็นแบบผสมสำหรับการศึกษานี้เพื่อเปรียบเทียบการปฏิบัติการแม่พิมพ์วิธีการทดสอบความต้านทานวัตถุประสงค์ของการศึกษา 1) เพื่อเปรียบเทียบ MIC90 สำหรับisothiazolinone ที่ใช้ทดสอบ XTT MIC90 ที่สองมาตรฐานห้องปฏิบัติการวิธีการ 2) เพื่อตรวจสอบผล XTT ATPผลิต และ 3) เพื่อประเมิน fungicidal กับกิจกรรม fungistatic ของเพาะเฟิร์น isothiazolinone กับแม่พิมพ์ที่ใช้ทดสอบ XTT2. วัสดุและวิธีการ2.1. XTT reagents วิเคราะห์เจริญเติบโตปานกลางสนับสนุนสปอร์การงอกมี RPMI 1640ปานกลาง (มัวร์ et al., 1967) โดยโซเดียมไบคาร์บอเนตเสริมwith L-glutamine and buffered with 165 mM morpholinepropanesulfonic(MOPS) acid, pH 7.0 (SigmaeAldrich, St. Louis,MO) (Pierce et al., 2008). The tetrazolium salt, 2,3-bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenyl-amino)carbonyl]-2H-tetrazoliumhydroxide (hereafter called XTT) (SigmaeAldrich) was dilutedin phosphate buffered saline, (PBS; 10 mM phosphate buffer,2.7 mM potassium chloride, 137 mM sodium chloride, pH 7.4)(SigmaeAldrich) to a concentration of 0.5 g l-1, filter-sterilized andstored in 10 ml aliquots protected from light at 70 C. A 10 mMstock of menadione (2-methyl-1,4 naphthoquinone) (SigmaeAldrich) was prepared in 100% acetone and stored in 50 mlaliquots at 70 C. Isothiazolinone (SUPATIMBER H.E.14, suppliedby Viance, Charlotte, NC) served as the model mould inhibitor. Twofolddilutions of isothiazolinone were prepared resulting inconcentrations ranging 0e800 ppm. Isothiazolinone was diluted inRPMI for the XTT assay and in water for the American WoodProtection Association Standards (AWPA) and American Society forTesting Materials (ASTM) standardized test methods.2.2. Spore inoculumMould fungi, Aspergillus niger 2.242 (provided by the Universityof Virginia School of Medicine, Charlottesville, Virginia, USA),Penicillium chrysogenum PH02 (provided by the USDA ForestProducts Laboratory, Madison, Wisconsin, USA) and Trichodermaatroviride ATCC 20476 were maintained on 2% malt extract agar(Difco Laboratories, Detroit, Michigan, USA) and stored at 5 C.Individual isolates were grown on 2% malt extract agar in Petridishes and incubated at 27 C for two weeks. Two different sporesuspensions were prepared as described below:For the XTT assay, spores from individual test fungi werecollected by flooding the surface of a two-week-old culture with10 ml of sterile PBS plus 0.025% Tween-20. The resulting sporesuspension was removed via aspiration to a sterile container,washed twice in sterile PBS and collected by centrifugation at3000 g for 15 min each at 4 C. Spores suspended in RPMI 1640were counted with a hemocytometer and further diluted in RPMI to
การแปล กรุณารอสักครู่..
Pierce et al. (2008) developed a method based on fungal biofilm
development. In their model, biofilms of medically-important
moulds and yeasts grown in a 96-well microtiter plate were subjected
to antifungal drugs. The tetrazolium salt was added to
measure the metabolic activities of cells within the biofilm. By this
method, the rate of biofilm formation was shown to be reproducible
and there were no statistical differences in replicate values of
the susceptibility tests.
Clausen and Yang (2011) optimized parameters for the XTT
microassay and demonstrated that the variability between fungal
species can be used to demonstrate the relative resistance of
different fungal species to several antifungal agents. Since isothiazolinone
is commonly used by the wood preservation industry
to inhibit mould growth on preservative treated wood, it was
selected as the model compound for this study to compare laboratory
mould resistance test methods.
The objectives of this study were 1) to compare the MIC90 for
isothiazolinone using the XTT assay with the MIC90 for two standardized
laboratory methods, 2) to verify XTT results with ATP
production, and 3) to assess fungicidal versus fungistatic activity of
isothiazolinone against mould spores using the XTT assay.
2. Materials and methods
2.1. XTT assay reagents
Growth medium supporting spore germination was RPMI 1640
medium (Moore et al., 1967) without sodium bicarbonate supplemented
with L-glutamine and buffered with 165 mM morpholinepropanesulfonic
(MOPS) acid, pH 7.0 (SigmaeAldrich, St. Louis,
MO) (Pierce et al., 2008). The tetrazolium salt, 2,3-bis(2-methoxy-
4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenyl-amino)carbonyl]-2H-tetrazolium
hydroxide (hereafter called XTT) (SigmaeAldrich) was diluted
in phosphate buffered saline, (PBS; 10 mM phosphate buffer,
2.7 mM potassium chloride, 137 mM sodium chloride, pH 7.4)
(SigmaeAldrich) to a concentration of 0.5 g l-1, filter-sterilized and
stored in 10 ml aliquots protected from light at 70 C. A 10 mM
stock of menadione (2-methyl-1,4 naphthoquinone) (Sigmae
Aldrich) was prepared in 100% acetone and stored in 50 ml
aliquots at 70 C. Isothiazolinone (SUPATIMBER H.E.14, supplied
by Viance, Charlotte, NC) served as the model mould inhibitor. Twofold
dilutions of isothiazolinone were prepared resulting in
concentrations ranging 0e800 ppm. Isothiazolinone was diluted in
RPMI for the XTT assay and in water for the American Wood
Protection Association Standards (AWPA) and American Society for
Testing Materials (ASTM) standardized test methods.
2.2. Spore inoculum
Mould fungi, Aspergillus niger 2.242 (provided by the University
of Virginia School of Medicine, Charlottesville, Virginia, USA),
Penicillium chrysogenum PH02 (provided by the USDA Forest
Products Laboratory, Madison, Wisconsin, USA) and Trichoderma
atroviride ATCC 20476 were maintained on 2% malt extract agar
(Difco Laboratories, Detroit, Michigan, USA) and stored at 5 C.
Individual isolates were grown on 2% malt extract agar in Petri
dishes and incubated at 27 C for two weeks. Two different spore
suspensions were prepared as described below:
For the XTT assay, spores from individual test fungi were
collected by flooding the surface of a two-week-old culture with
10 ml of sterile PBS plus 0.025% Tween-20. The resulting spore
suspension was removed via aspiration to a sterile container,
washed twice in sterile PBS and collected by centrifugation at
3000 g for 15 min each at 4 C. Spores suspended in RPMI 1640
were counted with a hemocytometer and further diluted in RPMI to
development. In their model, biofilms of medically-important
moulds and yeasts grown in a 96-well microtiter plate were subjected
to antifungal drugs. The tetrazolium salt was added to
measure the metabolic activities of cells within the biofilm. By this
method, the rate of biofilm formation was shown to be reproducible
and there were no statistical differences in replicate values of
the susceptibility tests.
Clausen and Yang (2011) optimized parameters for the XTT
microassay and demonstrated that the variability between fungal
species can be used to demonstrate the relative resistance of
different fungal species to several antifungal agents. Since isothiazolinone
is commonly used by the wood preservation industry
to inhibit mould growth on preservative treated wood, it was
selected as the model compound for this study to compare laboratory
mould resistance test methods.
The objectives of this study were 1) to compare the MIC90 for
isothiazolinone using the XTT assay with the MIC90 for two standardized
laboratory methods, 2) to verify XTT results with ATP
production, and 3) to assess fungicidal versus fungistatic activity of
isothiazolinone against mould spores using the XTT assay.
2. Materials and methods
2.1. XTT assay reagents
Growth medium supporting spore germination was RPMI 1640
medium (Moore et al., 1967) without sodium bicarbonate supplemented
with L-glutamine and buffered with 165 mM morpholinepropanesulfonic
(MOPS) acid, pH 7.0 (SigmaeAldrich, St. Louis,
MO) (Pierce et al., 2008). The tetrazolium salt, 2,3-bis(2-methoxy-
4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenyl-amino)carbonyl]-2H-tetrazolium
hydroxide (hereafter called XTT) (SigmaeAldrich) was diluted
in phosphate buffered saline, (PBS; 10 mM phosphate buffer,
2.7 mM potassium chloride, 137 mM sodium chloride, pH 7.4)
(SigmaeAldrich) to a concentration of 0.5 g l-1, filter-sterilized and
stored in 10 ml aliquots protected from light at 70 C. A 10 mM
stock of menadione (2-methyl-1,4 naphthoquinone) (Sigmae
Aldrich) was prepared in 100% acetone and stored in 50 ml
aliquots at 70 C. Isothiazolinone (SUPATIMBER H.E.14, supplied
by Viance, Charlotte, NC) served as the model mould inhibitor. Twofold
dilutions of isothiazolinone were prepared resulting in
concentrations ranging 0e800 ppm. Isothiazolinone was diluted in
RPMI for the XTT assay and in water for the American Wood
Protection Association Standards (AWPA) and American Society for
Testing Materials (ASTM) standardized test methods.
2.2. Spore inoculum
Mould fungi, Aspergillus niger 2.242 (provided by the University
of Virginia School of Medicine, Charlottesville, Virginia, USA),
Penicillium chrysogenum PH02 (provided by the USDA Forest
Products Laboratory, Madison, Wisconsin, USA) and Trichoderma
atroviride ATCC 20476 were maintained on 2% malt extract agar
(Difco Laboratories, Detroit, Michigan, USA) and stored at 5 C.
Individual isolates were grown on 2% malt extract agar in Petri
dishes and incubated at 27 C for two weeks. Two different spore
suspensions were prepared as described below:
For the XTT assay, spores from individual test fungi were
collected by flooding the surface of a two-week-old culture with
10 ml of sterile PBS plus 0.025% Tween-20. The resulting spore
suspension was removed via aspiration to a sterile container,
washed twice in sterile PBS and collected by centrifugation at
3000 g for 15 min each at 4 C. Spores suspended in RPMI 1640
were counted with a hemocytometer and further diluted in RPMI to
การแปล กรุณารอสักครู่..
เพียร์ซ et al . ( 2008 ) พัฒนาวิธีการพัฒนาตามฟิล์ม
รา ในรูปแบบของไบโอฟิล์มของแม่พิมพ์ที่สำคัญทางการแพทย์และยีสต์
โตในจาน 96 ดีไมโครถูก
ให้ยาต้านเชื้อรา . การ tetrazolium เกลือเพิ่ม
วัดกิจกรรมการเผาผลาญอาหารเซลล์ภายในฟิล์ม . โดยวิธีนี้
, อัตราการสร้างไบโอฟิล์มเป็น 10
เป็นและไม่มีความแตกต่างทางสถิติในการทดสอบความไวของเลียนแบบค่า
.
เคลาเซิ่นหยาง ( 2011 ) ปรับพารามิเตอร์สำหรับ xtt
microassay และแสดงให้เห็นว่าความผันแปรระหว่างเชื้อรา
ชนิดสามารถใช้เพื่อแสดงให้เห็นถึงความต้านทานของญาติ
ชนิดของเชื้อราที่แตกต่างกันหลายยาต้านเชื้อรา . ตั้งแต่ isothiazolinone
เป็นที่ใช้กันทั่วไปโดยไม้รักษาอุตสาหกรรม
ยับยั้งแม่พิมพ์ของสารกันบูดรักษาไม้ มัน
เลือกเป็นสารประกอบรูปแบบการศึกษานี้เพื่อเปรียบเทียบวิธีการทดสอบแม่พิมพ์ต้านทานห้องปฏิบัติการ
.
วัตถุประสงค์ของการศึกษาครั้งนี้ 1 ) เพื่อเปรียบเทียบ mic90 สำหรับ
isothiazolinone ใช้ xtt ) กับ mic90 สองวิธี ห้องปฏิบัติการมาตรฐาน
2 ) เพื่อยืนยันผลด้วย
xtt เอทีพีผลิต และ 3 ) เพื่อประเมิน fungistatic fungicidal กับกิจกรรม
isothiazolinone กับแม่พิมพ์สปอร์ใช้ xtt assay .
2 วัสดุและวิธีการ
2.1 . xtt assay เพื่อสนับสนุนการเจริญเติบโตปานกลาง การงอกของสปอร์
RPMI 1640 เป็น
ขนาดกลาง ( Moore et al . , 1967 ) โดยโซเดียมไบคาร์บอเนตอาหาร
กับ 2 กับ 165 มม. และ Glutamine morpholinepropanesulfonic
( ไม้ถูพื้น ) กรด pH 70 ( sigmaealdrich เซนต์หลุยส์
โม ) ( แทง et al . , 2008 ) การ tetrazolium เกลือ 2,3-bis ( 2-methoxy -
4-nitro-5-sulfophenyl ) - 5 - [ ( เฟนิลคาร์บอนิลอะมิโน ) ] - 2h tetrazolium
โซดาไฟ ( ต่อจากนี้เรียก xtt ) ( sigmaealdrich ) ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือเจือจาง
( PBS 10 mM ฟอสเฟต บัฟเฟอร์
2.7 มม. โพแทสเซียมคลอไรด์ , 137 มม. โซเดียมคลอไรด์พีเอช 7.4 )
( sigmaealdrich ) ความเข้มข้น 0.5 กรัม L-1 ,
รา ในรูปแบบของไบโอฟิล์มของแม่พิมพ์ที่สำคัญทางการแพทย์และยีสต์
โตในจาน 96 ดีไมโครถูก
ให้ยาต้านเชื้อรา . การ tetrazolium เกลือเพิ่ม
วัดกิจกรรมการเผาผลาญอาหารเซลล์ภายในฟิล์ม . โดยวิธีนี้
, อัตราการสร้างไบโอฟิล์มเป็น 10
เป็นและไม่มีความแตกต่างทางสถิติในการทดสอบความไวของเลียนแบบค่า
.
เคลาเซิ่นหยาง ( 2011 ) ปรับพารามิเตอร์สำหรับ xtt
microassay และแสดงให้เห็นว่าความผันแปรระหว่างเชื้อรา
ชนิดสามารถใช้เพื่อแสดงให้เห็นถึงความต้านทานของญาติ
ชนิดของเชื้อราที่แตกต่างกันหลายยาต้านเชื้อรา . ตั้งแต่ isothiazolinone
เป็นที่ใช้กันทั่วไปโดยไม้รักษาอุตสาหกรรม
ยับยั้งแม่พิมพ์ของสารกันบูดรักษาไม้ มัน
เลือกเป็นสารประกอบรูปแบบการศึกษานี้เพื่อเปรียบเทียบวิธีการทดสอบแม่พิมพ์ต้านทานห้องปฏิบัติการ
.
วัตถุประสงค์ของการศึกษาครั้งนี้ 1 ) เพื่อเปรียบเทียบ mic90 สำหรับ
isothiazolinone ใช้ xtt ) กับ mic90 สองวิธี ห้องปฏิบัติการมาตรฐาน
2 ) เพื่อยืนยันผลด้วย
xtt เอทีพีผลิต และ 3 ) เพื่อประเมิน fungistatic fungicidal กับกิจกรรม
isothiazolinone กับแม่พิมพ์สปอร์ใช้ xtt assay .
2 วัสดุและวิธีการ
2.1 . xtt assay เพื่อสนับสนุนการเจริญเติบโตปานกลาง การงอกของสปอร์
RPMI 1640 เป็น
ขนาดกลาง ( Moore et al . , 1967 ) โดยโซเดียมไบคาร์บอเนตอาหาร
กับ 2 กับ 165 มม. และ Glutamine morpholinepropanesulfonic
( ไม้ถูพื้น ) กรด pH 70 ( sigmaealdrich เซนต์หลุยส์
โม ) ( แทง et al . , 2008 ) การ tetrazolium เกลือ 2,3-bis ( 2-methoxy -
4-nitro-5-sulfophenyl ) - 5 - [ ( เฟนิลคาร์บอนิลอะมิโน ) ] - 2h tetrazolium
โซดาไฟ ( ต่อจากนี้เรียก xtt ) ( sigmaealdrich ) ในฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือเจือจาง
( PBS 10 mM ฟอสเฟต บัฟเฟอร์
2.7 มม. โพแทสเซียมคลอไรด์ , 137 มม. โซเดียมคลอไรด์พีเอช 7.4 )
( sigmaealdrich ) ความเข้มข้น 0.5 กรัม L-1 ,
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- ใส่ใจ
- เราย้ายไปอยู่กันคนละมหาลัย
- ( ..)φメモメモ
- อนาคต ฉันอยากเปิดร้านเบอเกอร์รี่
- ım lıke mature women :9
- ความห่วงใย
- ติดกับไปรษณีย์
- ผลที่คาดว่าจะได้รับ1. วัยรุ่นและประชาชน
- วัฒนธรรมที่น่าสนใจ
- đời.
- @Harry_Styles: Lest we forget.
- They wanted to see the manager.Her sales
- นวลปาน
- I'm also a pretty girl ; why ma i not go
- problems
- เจ้าหญิง
- ฝนตกหนักไม ได้ยินข่าวว่าฝนตกทางบ้านคุณ ด
- ผลลัพธ์ (ภาษาอังกฤษ) 1:Today, I don't kn
- คุณพูดภาษาอังกฤษเป็นไหม
- I don't like UK. London is kind of ok, b
- ฉันได้รู้จักกับเธอ
- すいじょうマーケット
- was employed
- We must be one
