DNA Extraction and Amplification an

DNA Extraction and Amplification and Phylogenetic Analysis
DNA was extracted from 200 μL of baboon serum by using the QIAamp DNA Blood Mini Kit (QIAGEN, Hilden, Germany) according to the manufacturer’s instructions. DNA was also extracted from baboon liver tissue by using a phenol-chloroform extraction method (18). Extracted DNA was quantified by using spectrophotometric analysis with a NanoDrop ND-1000 Spectrophotometer (NanoDrop Technologies Inc., Wilmington, DE, USA).
Subgenomic nested PCR amplifications of the precore/core (nt 1732–2045 and nt 1765–1968), core (nt 1687–2498 and nt 2267–2436), polymerase (nt 2540–2896 and nt 2566–2858), and surface (nt 255–759 and nt 459–710) regions were used to confirm the presence of HBV DNA in the serum extracts by using 40 cycles (16). The sensitivity of these amplifications is 40–400 HBV genomes/mL (19).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การสกัดดีเอ็นเอและการขยายและการวิเคราะห์สายวิวัฒนาการ
dna ถูกสกัดจาก 200 ไมโครลิตรของลิงบาบูนซีรั่มโดยใช้ qiaamp dna ชุดมินิเลือด (QIAGEN, ฮิลเดน, เยอรมนี) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต dna ก็ถูกสกัดจากเนื้อเยื่อตับลิงบาบูนโดยใช้วิธีการสกัดฟีนอล-คลอโรฟอร์ม (18)dna สกัดถูกวัดโดยใช้การวิเคราะห์ที่มีสเปก nanodrop ครั้ง-1000 สเปก (เทคโนโลยี nanodrop inc., วิลมิงเด, usa).
subgenomic amplifications PCR ที่ซ้อนกันของ precore / แกน (1732-2045 NT และ NT 1765-1968) แกน (1687-2498 NT และ NT 2267-2436) โพลิเมอร์ (NT 2540-2896 และ NT 2566-2858)และพื้นผิว (NT 255-759 และ 459-710 NT) ภูมิภาคถูกนำมาใช้เพื่อยืนยันการปรากฏตัวของไวรัสตับอักเสบบีดีเอ็นเอในซีรั่มสารสกัดโดยใช้ 40 รอบ (16) ความไวของ amplifications เหล่านี้เป็นไวรัสตับอักเสบบีจีโนม 40-400 / ml (19)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สกัดดีเอ็นเอ และขยาย และ วิเคราะห์ Phylogenetic
ดีเอ็นเอที่สกัดจาก μL 200 ของลิงบาบูนซีรั่มโดยการ QIAamp DNA เลือดมินิชุด (QIAGEN, Hilden เยอรมนี) ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ยังดีเอ็นเอที่สกัดจากเนื้อเยื่อตับลิงบาบูน โดยใช้วิธีสกัดวางคลอโรฟอร์ม (18) แยกดีเอ็นเอถูก quantified โดย spectrophotometric วิเคราะห์ด้วยเครื่องทดสอบกรดเป็น NanoDrop ND-1000 ด่าง (NanoDrop เทคโนโลยี อิงค์ วิลมิ DE สหรัฐอเมริกา) .
Subgenomic ซ้อน amplifications PCR precore/หลัก (nt 1732–2045 และ nt 1765–1968), หลัก (nt 1687–2498 และ nt 2267–2436) พอลิเมอเรส (nt 2540–2896 และ nt 2566–2858), และพื้นที่ผิว (nt 255–759 และ nt 459–710) ถูกใช้เพื่อยืนยันสถานะของดีเอ็นเอด้วยขั้นในสารสกัดซีรั่มโดยรอบ 40 (16) ความไวของ amplifications เหล่านี้เป็น 40–400 ด้วยขั้น genomes/mL (19)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ดีเอ็นเอเลือดและการขยายเสียงและ phylogenetic
ซึ่งจะช่วยการวิเคราะห์ดีเอ็นเอก็ถูกดึงมาจาก 200 μl ของเจลมาสก์มอยเจอร์ไรเซอร์ลิงหน้าหมูโดยใช้ qiaamp ดีเอ็นเอเลือดมินิชุด( qiagen hilden เยอรมัน)ตามคำแนะนำของผู้ผลิต ดีเอ็นเอก็ถูกดึงมาจากตับลิงหน้าหมูโดยใช้วิธีการสกัดฟีนอล - ยุคต้นๆ( 18 )สกัดดีเอ็นเอได้คำนวณออกมาเป็นรูปธรรมได้หรือโดยใช้การวิเคราะห์ spectrophotometric ด้วย nanodrop . - 1000 ที่มีหน่วยความจำตรวจสอบ( nanodrop Technologies , Inc ., Wilmington , DE , USA )..
subgenomic ซ้อน pcr amplifications ของ precore / Core ( NT 1732 - 2045 และ NT 1765 - 1968 ), core ( NT 1687 - .2498 และ NT 2267 - 2436 ), polymerase ( NT 2540 - 2896 และ NT 2566 - 2858 ),และมีพื้นผิว( NT 255-759 และ NT 459-710 )เขตพื้นที่ได้ถูกใช้เพื่อยืนยันการมีอยู่ของ hbv ดีเอ็นเอในสารสกัดจากสาหร่ายซีรัมโดยใช้ 40 รอบ( 16 ) ความไวของ amplifications เหล่านี้คือ 40-400 hbv genomes / ML ( 19 )