2.9.5. Cecal microbiota (Bifidobacterium, Lactobacillus, Enterobacteriaceae,
total aerobics)
Feces samples were homogenized in peptone water (100 mg mL−1
)
and then ten-fold serial dilutions were made in the same medium.
Aliquots of 0.1 mL of the appropriate dilution were spread onto the
884 J.K. da Silva et al. / Food Research International 53 (2013) 882–890
MRS agar media for Lactobacillus count and supplemented MRS agar
(0.5 mg L−1 dicloxacillin, 1 g L−1 LiCl and 0.5 g L−1 L-cysteine hydrochloride)
for Bifidobacterium. Culture plates were incubated in anaerobic
condition at 37 °C for 24–48 h. Similarly, 1 mL of the diluted sample
was spread onto specific count plates Petrifilm (3M®, São Paulo, MN)
for Enterobacteriaceae and total aerobic. Plates were incubated at 37 °C
for 24–48 h. After the incubation, the specific colonies grown on the selective
culture media were counted and the number of viable microorganism
g−1 feces (CFU g−1
) was calculated. The mean and standard
error were calculated from the log 10 values of the CFU g−1
.
2.9.6. Short-chain fatty acids (SCFA)
Short chain fatty acids were analyzed by gas chromatography
(Zhao, Nyman, & Jonsson, 2006) using Agilent 6890N equipment
with flame ionization detector (FID) and autosampler N10149
(Agilent, EUA). A 30 m× 0.25 mm i.d.×0.25 μm NukolTM capillary
column (Supelco, Bellefonte, PA, US) was used. Chromatographic conditions
were: injector and detector temperatures set at 250 °C,
injected volume 1 μL with split ratio set to 1:10; carrier gas was hydrogen
at 1.0 mL min−1
. The column oven was programmed as follows:
kept at 100 °C for 0.5 min, then heated at 8 °C min−1 until 180 °C,
kept for 1 min, heated at 20 °C min−1 until 200 °C and kept for 5 min.
2.9.5 cecal microbiota (Bifidobacterium, แลคโตบาซิลลัส, Enterobacteriaceae,
แอโรบิกรวม)
ตัวอย่างอุจจาระถูกปั่นในน้ำเปปโตน (100 มิลลิกรัม
mL-1)
และจากนั้นสิบเท่าเจือจางอนุกรมที่ถูกสร้างขึ้นในสื่อเดียวกัน.
aliquots 0.1 มิลลิลิตรเจือจางที่เหมาะสมกระจาย บน
884 JK ดาซิลวา, et al / งานวิจัยด้านอาหารนานาชาติ 53 (2013) 882-890
MRS agar สื่อแลคโตบาซิลลัสนับและตบท้าย MRS agar
(0.5 มก. L-1 ไดคลอกซาซิลลิน 1 กรัม L-1 LiCl และ 0.5 กรัม L-1 ไฮโดรคลอไร L-cysteine)
สำหรับ Bifidobacterium แผ่นวัฒนธรรมถูกบ่มเพาะกายในสภาพที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 24-48 ชั่วโมง
ในทำนองเดียวกัน 1
มิลลิลิตรของกลุ่มตัวอย่างเจือจางแผ่ลงบนแผ่นนับเฉพาะPetrifilm (3M®Sãoเปาโล MN)
สำหรับ Enterobacteriaceae และรวมแอโรบิก แผ่นถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37
องศาเซลเซียสสำหรับ24-48 ชั่วโมง หลังจากการบ่มที่อาณานิคมเฉพาะการเติบโตในการเลือกสื่อวัฒนธรรมนับและจำนวนของจุลินทรีย์ทำงานได้G-1 อุจจาระ (CFU กรัม-1) ที่คำนวณได้ ค่าเฉลี่ยมาตรฐานและข้อผิดพลาดจะถูกคำนวณจากบันทึก 10 ค่าของโคโลนีต่อกรัม-1. 2.9.6 ห่วงโซ่สั้นกรดไขมัน (SCFA) ห่วงโซ่สั้นกรดไขมันวิเคราะห์แก๊ส chromatography (Zhao, Nyman และจอนส์สัน, 2006) โดยใช้อุปกรณ์ Agilent 6890N กับเครื่องตรวจจับเปลวไฟไอออนไนซ์ (FID) และฉีดตัวอย่างอัตโนมัติ N10149 (Agilent, เอื้อ) 30 ม. × 0.25 มมรหัส× 0.25 ไมโครเมตร NukolTM ฝอยคอลัมน์(Supelco, เบลลาฟอน, PA, สหรัฐอเมริกา) ถูกนำมาใช้ เงื่อนไขโครมาคือหัวฉีดและอุณหภูมิเครื่องตรวจจับตั้งไว้ที่ 250 องศาเซลเซียสฉีดเล่ม1 ไมโครลิตรมีอัตราส่วนการแยกชุด 1:10; เป็นผู้ให้บริการก๊าซไฮโดรเจนที่ 1.0 มิลลิลิตร 1 นาที เตาอบคอลัมน์เป็นโปรแกรมดังต่อไปนี้เก็บไว้ที่อุณหภูมิ 100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 0.5 นาทีความร้อนแล้ว ณ วันที่ 8 องศาเซลเซียสนาที 1 จนถึง 180 องศาเซลเซียสเก็บไว้เป็นเวลา1 นาที, ความร้อนที่ 20 ° C นาที 1 จนถึง 200 องศาเซลเซียสและเก็บไว้ เป็นเวลา 5 นาที
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.9.5 . ลำไส้ใหญ่ซีคัมไมโครไบโ ้า ( Bifidobacterium , Lactobacillus ผิดเพี้ยนทั้งหมด , แอโรบิก ,
)
อุจจาระจำนวนบดในน้ำ ( 100 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตรตามลำดับ− 1
) แล้วพับสิบอนุกรมเจือจางอยู่ในตัวกลางเดียวกัน .
เฉยๆ 0.1 มิลลิลิตรของการเจือจางที่เหมาะสมมีการแพร่กระจายไปยัง
884 เจ. ดา ซิลวา et al . อาหาร / วิจัยนานาชาติ 53 ( 2013 ) – 890
882นางวุ้นสื่อสำหรับแลคโตบาซิลลัสนับและเสริมนางวุ้น
( 0.5 mg L − 1 ไดคล็อกซาซิลิน 1 G L − 1 และ L − 1 20 . 0.5 กรัม แอลซิสเตอีนไฮโดรคลอไรด์ )
เพื่อครองโลก . แผ่นที่วัฒนธรรมถูกบ่มในสภาพอากาศที่ 37 ° C
24 - 48 ชั่วโมง ในทำนองเดียวกัน 1 มล. เจือจางตัวอย่าง
ก็กระจายลงบนแผ่น petrifilm ( นับเฉพาะ® 3M , เซาเปาลู , Mn )
ให้ผิดเพี้ยน และรวมแอโรบิคจานถูกบ่มที่ 37 ° C
24 - 48 ชั่วโมง หลังจากระยะเวลาอาณานิคมเฉพาะปลูกบนอาหารเลี้ยงเชื้อ selective
ถูกนับและจำนวนได้จุลินทรีย์
g ( G −− 1 อุจจาระโคโลนี 1
) คือการคำนวณ ค่าเฉลี่ยและค่าคลาดเคลื่อนมาตรฐาน
คำนวณจากค่า log CFU / กรัมของ 10 − 1
.
2.9.6 . กรดไขมันโซ่สั้น ( scfa )
กรดไขมันโซ่สั้น วิเคราะห์โดยแก๊สโครมาโตกราฟี
( Zhao nyman &จอนสัน , 2006 ) ใช้เลนต์อุปกรณ์ตรวจจับเปลวไฟ 6890n
ไอออไนเซชัน ( FID ) และ autosampler n10149
( Agilent , สหรัฐอเมริกา ) 30 m ×× 0.25 0.25 มม. บัตรμ M nukoltm ฝอย
คอลัมน์ ( supelco bellefonte , PA , สหรัฐอเมริกา ) คือใช้ เมื่อเงื่อนไข
: ฉีดและเครื่องตรวจจับไว้ที่อุณหภูมิ 250 องศา C ,
ปริมาณ 1 ลิตร ฉีดμแบ่งสัดส่วน ชุด 1 : 10 ; ขนส่งแก๊สไฮโดรเจน
ที่ 1.0 มิลลิลิตรต่อนาที− 1
คอลัมน์เตาอบโปรแกรมดังนี้
เก็บไว้ที่ 100 องศา C 0.5 นาทีแล้วให้ความร้อนที่ 8 ° C − 180 °มิน 1 จนถึง C
เก็บไว้เป็นเวลา 1 นาทีอุณหภูมิ 20 °องศาเซลเซียสมิน− 1 ถึง 200 องศา C และเก็บเป็นเวลา 5 นาที
การแปล กรุณารอสักครู่..
