2.2. Antibody to hen-egg white lyso

2.2. Antibody to hen-egg white lysozyme
Blood from 169 cows (see Section 2.4) was collected
using a Vacutainer® containing ethylenediaminetetraacetic
(EDTA) on days 0, 14 and 21 and serum anti-HEWL
IgG was assessed by enzyme-linked immunosorbent assay
(ELISA) using a modified protocol (Hernández et al., 2003).
Flat bottomed 96-well polystyrene plates (Immulon II,
Fisher Scientific Co. Ltd., Unionville, Ontario, Canada) were
coated with HEWL dissolved in carbonate–bicarbonate
buffer (3.11 × 10−5 M solution) and incubated at 4 ◦C for
48 h. After blocking for 1 h, controls and samples (1/50
and 1/200 dilutions) were incubated for 2 h. Alkaline
phosphatase-conjugated rabbit anti-bovine IgG (whole
molecule; Sigma–Aldrich Canada Ltd., Oakville, Ontario,
Canada) was incubated for 1 h. p-Nitrophenyl phosphate
disodium (p-NPP, Sigma–Aldrich Canada Ltd., Oakville,
Ontario, Canada) was incubated for 30 min. Plates were
read with an ELISA plate reader (EL808, Bio-Tek Instruments,
Inc., Winooski, VT, USA) at 405 nm absorbance and
the optical density values (OD) were obtained using an
ELISA software package (Kcjunior, Bio-Tek Instruments,
Inc., Winooski, VT, USA) and corrected as previously
described (Heriazon et al., 2009a).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.2. แอนติบอดีเพื่อไข่ไก่ขาว lysozyme(ดูหัวข้อ 2.4) รวบรวมเลือดจากวัว 169ใช้® Vacutainer ที่ประกอบด้วย ethylenediaminetetraacetic(EDTA) ในวันที่ 0, 14 และ 21 และเซรั่มต่อต้าน-HEWLIgG ถูกประเมิน โดยเอนไซม์ลิงค์ immunosorbent assay(ELISA) ใช้โพรโทคอแก้ไข (Hernández et al., 2003)96 ดีโฟมแผ่นแบน bottomed (Immulon IIFisher วิทยาศาสตร์ จำกัด Unionville, Ontario ประเทศแคนาดา) ได้เคลือบ ด้วย HEWL ละลายในไบคาร์บอเนตคาร์บอเนตบัฟเฟอร์ (3.11 × 10−5 M โซลูชัน) และ incubated ที่ ◦C 4 สำหรับ48 h หลังจากการบล็อกสำหรับ 1 h ควบคุม และตัวอย่าง (1/50และ 1/200 dilutions) ที่ incubated สำหรับ 2 h. Alkalineกระต่ายฟอสฟาเตสกลวงป้องกัน bovine IgG (ทั้งหมดโมเลกุล ซิกมา-Aldrich แคนาดา จำกัด Oakville ออนตาริโอแคนาดา) ที่ incubated สำหรับฟอสเฟต p Nitrophenyl 1 h.หัว (p-NPP ซิก-Aldrich แคนาดา จำกัด Oakvilleออนตาริโอ แคนาดา) ที่ incubated สำหรับแผ่น 30 นาทีได้อ่านอ่านมีจาน ELISA (EL808 เครื่องมือชีวภาพ-TekInc., Winooski, VT สหรัฐอเมริกา) ที่ 405 nm absorbance และค่าความหนาแน่นออปติคอล (OD) ได้รับมาใช้เป็นชุดซอฟต์แวร์ ELISA (Kcjunior เครื่องมือชีวภาพ-TekInc., Winooski, VT สหรัฐอเมริกา) และแก้ไขเป็นก่อนหน้านี้อธิบาย (Heriazon et al., 2009a)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2 แอนติบอดีเพื่อไก่ไข่ lysozyme สีขาว
เลือดจาก 169 วัว (ดูมาตรา 2.4) ถูกเก็บรวบรวม
โดยใช้Vacutainer®มี ethylenediaminetetraacetic
(EDTA) ในวันที่ 0, 14 และ 21 และซีรั่มต่อต้าน HEWL
IgG ได้รับการประเมินโดยเอนไซม์ที่เชื่อมโยงอิมมูโน assay
(ELISA ) โดยใช้โปรโตคอลแก้ไข (Hernández et al., 2003).
แบนจุดต่ำสุดแผ่นสไตรีน 96 หลุม (Immulon II,
Fisher Scientific จำกัด ยูเนียน, Ontario, Canada) ได้รับการ
เคลือบด้วย HEWL ละลายในคาร์บอเนตไบคาร์บอเนต
บัฟเฟอร์ (3.11 × 10-5 แก้ปัญหา M) และบ่มที่อุณหภูมิ 4 ◦Cสำหรับ
48 ชั่วโมง หลังจากที่ปิดกั้นเป็นเวลา 1 ชั่วโมงควบคุมและตัวอย่าง (1/50
และ 1/200 เจือจาง) ถูกบ่มเป็นเวลา 2 ชั่วโมง อัลคาไลน์
กระต่าย phosphatase-ผัน IgG ป้องกันวัว (ทั้ง
โมเลกุล; Sigma-Aldrich แคนาดา จำกัด , Oakville, Ontario,
แคนาดา) ถูกบ่มเป็นเวลา 1 ชั่วโมง P-Nitrophenyl ฟอสเฟต
disodium (P-NPP, Sigma-Aldrich แคนาดา จำกัด , Oakville,
Ontario, Canada) ได้รับการบ่มเป็นเวลา 30 นาที แผ่นถูก
อ่านด้วยเครื่องอ่านแผ่นวิธี ELISA (EL808, Bio-Tek เครื่องดนตรี,
Inc. , นุ, เวอร์มอนต์สหรัฐอเมริกา) ที่ดูดกลืนแสงที่ 405 นาโนเมตรและ
ค่าความหนาแน่นของแสง (OD) ที่ได้รับการใช้
แพคเกจซอฟต์แวร์ ELISA (Kcjunior ไบโอเต็ก เครื่องดนตรี,
Inc. , นุ, เวอร์มอนต์สหรัฐอเมริกา) และก่อนหน้านี้ได้รับการแก้ไขเป็น
ที่อธิบาย (Heriazon et al., 2009A)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.2 . แอนติบอดีในเลือดไลโซไซม์
ไข่ขาวจาก 169 วัว ( ดูมาตรา 5 ) เก็บข้อมูลโดยใช้ vacutainer ®บอน

( EDTA ) ที่มีในวันที่ 0 , 14 และ 21 ระดับ IgG anti hewl

ถูกประเมินโดย enzyme-linked immunosorbent assay ( ELISA ) โดยใช้การแก้ไขของ เอร์นันเดซ . kgm ndez et al . , 2003 ) .
แบน bottomed 96 ด้วยโฟมแผ่น ( immulon II
ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ จำกัดUnionville Ontario , แคนาดา )
เคลือบด้วย hewl ละลายแคลเซียมคาร์บอเนตไบคาร์บอเนตบัฟเฟอร์ (
( 3.11 × 10 − 5 เอ็ม โซลูชั่น ) และบ่มที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง ◦
หลังจากบล็อกเป็นเวลา 1 ชั่วโมง การควบคุม และตัวอย่าง ( 1 / 50
1 / 200 เจือจาง ) บ่มเป็นเวลา 2 ชั่วโมง ด่าง
กระต่ายวัว IgG anti phosphatase conjugated ( ทั้ง
โมเลกุล ; Sigma –ดิชแคนาดาจำกัด Oakville Ontario , แคนาดา )
) 1 ชั่วโมงp-nitrophenyl
โซเดียมฟอสเฟต ( p-npp , Sigma –ดิชแคนาดาจำกัด Oakville ,
Ontario , แคนาดา ) คือบ่มเป็นเวลา 30 นาที แผ่นถูก
อ่านกับอ่านป้าย ELISA ( el808 เครื่องมือ เทคไบโอ
อิงค์ Winooski , VT , USA ) ที่ 405 nm ค่าแสงและค่าความหนาแน่น
( OD ) ได้แก่ ได้รับการใช้เป็นแพคเกจซอฟต์แวร์
ELISA ( kcjunior เครื่องมือ เทคไบโอ
อิงค์ Winooski , VT ,สหรัฐอเมริกา ) และแก้ไขตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้
( heriazon et al . , 2009a )