2.4. Persistence of R. solanacearum

2.4. Persistence of R. solanacearum in substrate and host tissue
Forty-gram samples of disinfected substrate (mixture of peat
moss and sand as used in the previous assay with tomato plants)
were placed into two sterile glass petri plates, and a 10 ml aliquot of
R. solanacearum inoculum (106 cfu ml1; produced as described
above) was added to each sample and mixed into the medium with
a sterilized spatula. The final water content was around 60% of the
water-holding capacity of the medium. A sample of 1 g was
immediately removed and serially diluted in 9 ml of physiological
water (8.5 g NaCl L1), and 100 mlwas spread onto the surface of the
selective medium (Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC) and the
non-selective medium (Yeast Dextrose Agar, YDA). Five dilutions
and two replications were used for each dilution and growing
medium. Two glass petri plates were sealed with parafilm to
prevent moisture loss and were incubated in the dark at 25
C and
45
C, respectively, for six weeks. At periodic intervals of seven
days, 1 g sample was removed, serially diluted and plated as
described above. All plates were inverted and incubated at 28
C for
one week and colony forming units (cfu) of bacteria and separately
of R. solanaceraum were recorded.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.4 การคงอยู่ของ R. solanacearum ในเนื้อเยื่อพื้นผิวและโฮสต์ตัวอย่างพื้นผิวฆ่าเชื้อ (ส่วนผสมของพรุ 40 กรัมมอสส์และทรายที่ใช้ในการทดสอบก่อนหน้านี้กับพืชมะเขือเทศ)ถูกวางไปสองแก้วใส่ petri แผ่น และส่วนลงตัว 10 ml ของR. solanacearum inoculum (106 cfu ml 1 ผลิตดังที่เหนือ) ถูกเพิ่มเข้าไปแต่ละชิ้นงานตัวอย่าง และแบบผสมเป็นกลางด้วยพาย sterilized เนื้อหาสุดท้ายน้ำมีประมาณ 60% ของการความจุน้ำถือกลาง ตัวอย่าง 1 กรัมมีเอาออกไปทันที และแตกออกใน serially 9 ml ของสรีรวิทยาน้ำ (8.5 g NaCl L 1), และ mlwas 100 ที่กระจายบนพื้นผิวของการงานปานกลาง (Triphenyl Tetrazolium คลอไรด์ ทีทีซีจำกัด) และกลางไม่เลือก (Agar ขึ้นเชื้อยีสต์ YDA) ห้า dilutionsและระยะที่สองใช้สำหรับแต่ละการเจือจาง และเติบโตสื่อ สองแก้ว petri แผ่นถูกปิดผนึก ด้วย parafilm เพื่อป้องกันการสูญเสียความชื้น และมี incubated ในมืดที่ 25 C และ45 C ตามลำดับ ในสัปดาห์ที่หก ในช่วงเจ็ดเป็นครั้งคราววัน 1 g อย่างถูกเอาออก serially ผสม และชุบเป็นอธิบายไว้ข้างต้น กลับ และ incubated ที่ C 28 สำหรับแผ่นทั้งหมดสัปดาห์ที่หนึ่งและเป็นหน่วย (cfu) ของแบคทีเรีย และแยกโคโลนีของอาร์ solanaceraum ได้บันทึกไว้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.4 ความคงทนของอาร์ solanacearum ในพื้นผิวและเนื้อเยื่อโฮสต์
ตัวอย่างสี่สิบกรัมของพื้นผิวฆ่าเชื้อ (ซึ่งมีส่วนผสมของพีท
มอสและทรายที่ใช้ในการทดสอบก่อนหน้านี้ด้วยมะเขือเทศ)
ถูกวางลงในหมันสองจาน Petri แก้วและ 10 มล aliquot ของ
R . เชื้อ solanacearum (106 cfu มล 1;? ผลิตตามที่อธิบายไว้
ด้านบน) ถูกบันทึกอยู่ในแต่ละตัวอย่างและผสมลงในสื่อที่มี
ไม้พายผ่านการฆ่าเชื้อ ปริมาณน้ำสุดท้ายคือประมาณ 60% ของ
กำลังการผลิตน้ำถือของกลาง ตัวอย่าง 1 กรัมถูก
ลบออกทันทีและปรับลดลำดับใน 9 มิลลิลิตรสรีรวิทยา
น้ำ (8.5 กรัมโซเดียมคลอไรด์ L 1?) และ 100 mlwas แพร่กระจายบนพื้นผิวของ
สื่อที่เลือก (tetrazolium ไตรเฟนิลคลอไรด์, TTC) และ
ขนาดกลางไม่ได้รับเลือก (ยีสต์ Dextrose วุ้น, YDA) ห้าเจือจาง
และทั้งสองถูกนำมาใช้ซ้ำสำหรับแต่ละเจือจางและการเติบโต
ปานกลาง สองแก้วจาน Petri ถูกปิดผนึกด้วย parafilm เพื่อ
ป้องกันการสูญเสียความชื้นและถูกบ่มในที่มืดที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียสและ
45 องศาเซลเซียสตามลำดับเป็นเวลาหกสัปดาห์ ในช่วงระยะเจ็ด
วัน, 1 กรัมตัวอย่างจะถูกลบออกเจือจางลำดับและชุบที่
อธิบายไว้ข้างต้น แผ่นทั้งหมดถูกคว่ำและบ่มที่อุณหภูมิ 28? C เป็นเวลา
หนึ่งสัปดาห์และอาณานิคมสร้างหน่วย (CFU) ของเชื้อแบคทีเรียและแยก
ของอาร์ solanaceraum ถูกบันทึกไว้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.4 . การคงอยู่ของ R . solanacearum ในพื้นผิวและโฮสต์เนื้อเยื่อ
40 กรัมตัวอย่างฆ่าเชื้อพื้นผิว ( ผสมพีทมอสและทราย
ที่ใช้ในการทดสอบก่อนหน้านี้กับพืชมะเขือเทศ )
2 หมันแก้วถูกวางลงในจาน Petri และ 10 ml ส่วนลงตัวของ
R . solanacearum สายพันธุ์ ( 106 cfu ml  1 ; ผลิตตามที่อธิบายไว้
ข้างบน ) ที่ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละตัวอย่างและผสมลงในอาหาร
ฆ่าเชื้อไม้พาย . ปริมาณน้ำสุดท้ายประมาณ 60% ของ
น้ำถือความจุของสื่อ ตัวอย่าง 1 g
ทันทีลบออกและอนุกรม 9 มล. เจือจางในน้ำทางสรีรวิทยา
( 8.5 กรัม เกลือ 1 /  ) และ 100 mlwas กระจายลงบนพื้นผิวของ
กลางเลือก ( ไตรฟีนิล tetrazolium ( TTC ) และไม่เลือกขนาดกลาง
( ยีสต์ dextrose agar yda , ) ห้าวิธีการ
และสองซ้ำถูกใช้สำหรับแต่ละการเจือจางและเติบโต
) สองจาน Petri แก้วถูกผนึกด้วยพาราฟิล์มป้องกันการสูญเสียความชื้นและ

) ในที่มืดที่อุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียส และ


45 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 6 สัปดาห์ ในช่วงเจ็ดวัน )
1 G ตัวอย่างออกเป็นเจือจาง และชุบ
ที่อธิบายข้างต้น ทุกจานถูกคว่ำ และ บ่มที่ 28
C
หนึ่งสัปดาห์และอาณานิคมสร้างหน่วย ( CFU ) ของแบคทีเรีย และแยก
R . solanaceraum ถูกบันทึกไว้