3.5.2. Flow cytometry
Using flow cytometry, the ploidy levels of a total of 516 regenerated plantlets were determined (Fig. 3G–L). The fluorescence peak value of the control tissue (diploid) was 80, so a peak of 40, or half that of the control, was interpreted as indicating the presence of haploid plant tissue. The results of flow cytometric analysis showed several different ploidy levels. Among the 516 plants tested, 11 plants were haploid (2%), 336 were diploid (65%), 47 were triploid (9%), 26 were tetraploid (5%), 10 were hexaploid (2%), and 86 were mixoploid (17%). Most mixoploid plants contained both diploid and tetraploid cells. These results indicate that successful anther culture of P. forbesii can be used to produce plantlets with varied ploidy levels.
3.5.3. Cytological analysis
Chromosome number was also determined in the plants by microscopy. The root tips were cytologically examined under a microscope by counting the number of chromosomes in at least 20 clear images of metaphase-stage mitotic cells. Diploid individuals of P. forbesii had a chromosome number of 2n = 2x = 18. The chromosome numbers of the haploid (2n = x = 9), triploid (2n = 3x = 27), tetraploid (2n = 4x = 36) and hexaploid (2n = 6x = 54) plants were also consistent with the results of the flow cytometric analysis ( Fig. 3M–Q). The remaining plants were mixoploid, showing variable chromosome numbers.
3.5.2 ภาพกระแสเซลล์ใช้เซลล์ไหล ระดับพล็อยดีของจำนวน 516 สร้าง plantlets ถูกกำหนด (Fig. 3G-L) ค่าสูงสุด fluorescence ของเนื้อเยื่อควบคุม (diploid) เป็น 80 ดังนั้นสูงสุด 40 หรือครึ่งที่ควบคุม ถูกตีความเป็นการบ่งชี้สถานะของเนื้อเยื่อพืช haploid ผลลัพธ์ของการวิเคราะห์การไหล cytometric พบพล็อยดีแตกต่างกันหลายระดับ ระหว่างพืช 516 ทดสอบ พืช 11 ได้ haploid (2%), 336 ถูก diploid (65%), 47 มี triploid (9%), 26 ถูก tetraploid (5%), 10 คำ hexaploid (2%), 86 ถูก mixoploid (17%) ส่วนใหญ่ mixoploid พืชประกอบด้วยเซลล์ diploid และ tetraploid ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่า สามารถใช้วัฒนธรรม anther สำเร็จของ P. forbesii ผลิต plantlets พล็อยดีแตกต่างกันมีระดับ3.5.3. cytological วิเคราะห์จำนวนโครโมโซมยังถูกกำหนดในพืช โดย microscopy เคล็ดลับรากถูก cytologically ตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์ โดยการนับจำนวนของ chromosomes ในภาพชัดเจนน้อย 20 เซลล์ mitotic metaphase ขั้น บุคคล diploid ของ P. forbesii มีจำนวนโครโมโซม 2n = 2 x = 18 จำนวนโครโมโซม haploid (2n = x = 9), triploid (2n = 3 x = 27), tetraploid (2n = 4 x = 36) และ hexaploid (2n = 6 x = 54) พืชก็ยังสอดคล้องกับผลลัพธ์ของการวิเคราะห์กระแส cytometric (Fig. 3 เมตร – Q) พืชที่เหลือ mixoploid แสดงหมายเลขตัวแปรของโครโมโซมได้
การแปล กรุณารอสักครู่..
