Contaminated NEW samples were incubated at 4 °C for 2 and 5 min afterwards 0.1 ml was diluted in 9.9 ml of sterile saline solution to dilute free chlorine potentially still having antimicrobial activity. Surviving bacteria were enumerated after incubation (24 h at 30 °C) of PCA plates seeded with decimal dilution, in sterile saline, of 1:100 NEW samples. Each strain was assayed three times, independently (N = 3). Based on results, 14 spoilage Pseudomonas strains, as well as, P. aeruginosa DSM939, were used for an additional in vitro assay by using the most probable number (MPN) method for enumeration of viable microbial cells. Three samples of NEW, produced from potassium chloride as electrolyte, were prepared after 2 h of electrolysis (4000 mg/L free chlorine, pH = 8.2, ORP = 846 mV). The NEW, diluted to 400, 200, and 100 mg/L of free chlorine, was inoculated as previously reported and incubated at 4 °C for 2 min. Inoculated NEW samples were decimally diluted four times in mPCB. Occurrence of visible microbial growth was recorded after 24 h at 25 °C; un-treated bacterial suspensions were used as a positive control. Absorbance value of test tubes without visible growth was recorded at 600 nm and compared with un-inoculated (blank) tubes. Test tubes were considered positive when OD600 readings were 0.050 higher than blank tubes. Calculation of MPN was obtained comparing the results with MPN tables ( Man, 1983). In order to avoid false negative results deriving from chlorine stressed cells, test tubes were incubated for additional 24 h at 30 °C. In this case the assay was performed a single time with three repetition for each strain (N = 3).
ตัวอย่างใหม่ปนเปื้อนถูก incubated ที่ 4 ° C สำหรับ 2 และ 5 นาทีหลังจากนั้น 0.1 ml ถูกทำให้เจือจางในมล 9.9 ของเกลือใส่ไป dilute คลอรีนอิสระที่อาจยังคงมีกิจกรรมจุลินทรีย์ เชื้อแบคทีเรียที่รอดตายได้ระบุหลังจากบ่ม (24 ชมที่ 30 ° C) ของแผ่น PCA seeded กับทศนิยมเจือจาง ในน้ำเกลือฆ่าเชื้อ ตัวอย่างใหม่ของ 1: 100 ต้องใช้แต่ละถูก assayed สามครั้ง อิสระ (N = 3) ตามผลลัพธ์ สายพันธุ์ Pseudomonas เน่าเสีย 14 เป็น DSM939, P. aeruginosa ใช้สำหรับวิเคราะห์ในการเพิ่มเติม โดยใช้วิธีที่สุดน่าเป็นหมายเลข (บริษัทเอ็มพีเอ็น) สำหรับการแจงนับของเซลล์จุลินทรีย์ทำงานได้ มีเตรียมตัวอย่างใหม่ ผลิตจากโพแทสเซียมคลอไรด์เป็นอิเล็กโทร สามหลัง h 2 ของ electrolysis (คลอรีนอิสระ 4000 mg/L, pH = 8.2, ORP = 846 mV) ใหม่ ผสม กับ 400, 200, 100 mg/L ของคลอรีนอิสระ มี inoculated ตามที่รายงานก่อนหน้านี้ และ incubated ที่ 4 ° C สำหรับตัวอย่าง Inoculated ใหม่ 2 นาทีได้ decimally ผสมสี่ครั้งใน mPCB บันทึกเหตุการณ์ของการเจริญเติบโตจุลินทรีย์ที่มองเห็นได้หลังจาก 24 ชมที่ 25 ° C บริการแบคทีเรียบำบัดยังไม่ได้ถูกใช้เป็นตัวควบคุมบวก บันทึกค่า absorbance ของหลอดทดสอบโดยมองเห็นการเจริญเติบโตที่ 600 nm และเมื่อเทียบกับหลอดยังไม่ได้ inoculated (ว่าง) หลอดทดสอบที่เป็นบวกเมื่ออ่าน OD600 ได้สูงกว่าท่อเปล่า 0.050 คำนวณของบริษัทเอ็มพีเอ็นได้รับการเปรียบเทียบผลกับตารางบริษัทเอ็มพีเอ็น (Man, 1983) เพื่อหลีกเลี่ยงผลลบเท็จบริษัทฯ จากคลอรีนที่เน้น เซลล์ หลอดทดสอบได้ incubated สำหรับ 24 ชมเพิ่มเติมที่ 30 องศาเซลเซียส ในกรณีนี้ วิเคราะห์การทำใช้เวลาเดียวกับสามซ้ำสำหรับแต่ละต้องใช้ (N = 3)
การแปล กรุณารอสักครู่..
ตัวอย่างใหม่ที่อุณหภูมิ 4 องศา C 2 และ 5 นาทีหลังจากนั้น 0.1 มิลลิลิตร เจือจางใน 1 มิลลิลิตร ปลอดเชื้อ น้ำเกลือเจือจางคลอรีนที่อาจยังคงมีฤทธิ์ต้านจุลชีพ . ที่รอดตายแบคทีเรียถูกระบุหลังจากบ่ม ( 24 H 30 ° C ) ของ PCA จานเมล็ดกับทศนิยมเจือจางในน้ำเกลือปลอดเชื้อ , 100 ตัวอย่างใหม่ แต่ละสายพันธุ์มีปริมาณ 3 ครั้งอิสระ ( n = 3 ) บนพื้นฐานของผล 14 การเน่าเสียของสายพันธุ์รวมทั้ง P . aeruginosa dsm939 ถูกใช้สำหรับเพิ่มเติมในนอร์เวย์ โดยใช้หมายเลขที่น่าจะเป็น ( MPN ) วิธีการในการใช้จุลินทรีย์เซลล์ 3 ตัวอย่างใหม่ ผลิตจากโพแทสเซียมคลอไรด์เป็นอิเล็กโทรไลต์ถูกเตรียมหลังจาก 2 H ด้วยไฟฟ้า ( 4 , 000 มิลลิกรัมต่อลิตร pH = 8.2 , คลอรีนอิสระ ,ORP = 846 MV ) ใหม่ , ประมาณ 400 , 200 และ 100 มก. / ล. คลอรีนเป็นเชื้อตามที่รายงานก่อนหน้านี้ และ บ่มที่ 4 ° C 2 นาทีจากตัวอย่างใหม่ decimally เจือจางสี่ครั้งใน mpcb . การมองเห็นได้จากการบันทึกหลัง 24 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 25 ° C ; และรักษาแบคทีเรียช่วงล่างถูกใช้เป็นตัวควบคุมบวกค่าการดูดกลืนแสงของหลอดทดลอง โดยไม่มีการปรากฏเป็นบันทึกที่ 600 นาโนเมตรและเมื่อเทียบกับสหประชาชาติ หัวเชื้อ ( ว่าง ) หลอด หลอดทดสอบถูกถือว่าเป็นบวกเมื่ออ่าน od600 เป็น 0.050 สูงกว่าหลอดเปล่า การเปรียบเทียบผลลัพธ์ที่ได้กับเมื่อได้รับตาราง MPN ( 1983 ) เพื่อหลีกเลี่ยงการใช้คลอรีนเน้นลบปลอมจากเซลล์หลอดทดสอบถูกบ่มเพิ่ม 24 H ที่ 30 องศา ในกรณีนี้ ( แสดงเวลาเดียวกับสามซ้ำสำหรับแต่ละสายพันธุ์ ( n = 3 )
การแปล กรุณารอสักครู่..