Materials and MethodsIsolation of S

Materials and Methods
Isolation of Sclerotium cepivorum from garlic fields
During the spring of 2014, the garlic fields in the province
of Hamedan, Iran were surveyed. Diseased plants showing
white rot symptoms were collected and transferred
to the laboratory so that the pathogenic agents could be
isolated. Diseased samples were processed by cutting, removing,
surface sterilising and culturing diseased pieces
of stems and bulbs on Potato Dextrose Agar (PDA) culture
medium. The grown fungal colonies were then purified
and were identified using the standard identification
keys of Barnett and Hunter (1998). Based on the abovementioned
experiments, five isolates of S. cepivorum were
identified.
The pathogenicity test (Koch postulate) was also conducted
and performed to confirm the role of the isolated
fungus in disease occurrence and symptom appearance.
The test was performed on five isolates of S. cepivorum
in a greenhouse experiment with five treatments each with
four replicates. A replicate consisted of a plastic pot containing
2 kg of garlic-field, pasteurised soil pre-inoculated
with S. cepivorum and sown with three garlic seeds (bulbs).
After the appearance of symptoms on garlic plants, the
pathogenic agent was re-isolated from the infected tissues,
identified as described in the above sections, and evaluated
for pathogenicity according to the respective disease
percent induction (Mahdizadehnaraghi et al. 2007). Based
on the above experiments, the most pathogenic isolate of
S. cepivorum was selected to be used for the rest of the study.
Preparation of antagonistic fungal isolates
Isolates of three fungal antagonists including T. flavus,
T. harzianum, and T. asperellum were obtained from the research
laboratory’s microbial collection of beneficial microorganisms,
of the Iranian Research Institute of Plant
Protection. In 2013, these isolates were isolated from the
soil of garlic and potato fields located in the province of
Hamedan, Iran. The antagonistic activities of the isolates
against some fungal pathogens, including S. cepivorum,
were previously evaluated and approved in in vitro conditions
in the above-mentioned laboratory (unpublished
data). The antagonistic fungal isolates used in the study
and their characteristics are presented in table 1.
Development and preparation of bioformulations
Twelve bioformulations were prepared using six isolates
of the above-mentioned fungal antagonists and the
organic and inorganic carriers – rice bran and talc. The
powdery compounds of the carriers were selected based
on their use in previous studies (Kakvan et al. 2013; Samavat
et al. 2014). They were steam-sterilised at 121°C for
30 min, and dried aseptically in glass trays before use.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการแยก Sclerotium cepivorum จากฟิลด์กระเทียมในช่วงฤดูใบไม้ผลิปี 2557 ฟิลด์กระเทียมในจังหวัดอิหร่าน Hamedan ได้สำรวจการ พืชเส้นแสดงอาการขาว rot ได้รวบรวม และโอนย้ายการปฏิบัติการเพื่อให้เป็นตัวแทน pathogenicแยกต่างหาก ตัวอย่างเส้นถูกประมวลผล โดยการตัด การลบsterilising ผิวและ culturing ชิ้นเส้นลำต้นและหลอดในวัฒนธรรมมันฝรั่งขึ้น Agar (PDA)สื่อ อาณานิคมเชื้อราเติบโตได้บริสุทธิ์แล้วและได้ใช้รหัสมาตรฐานคีย์ของบาร์เนตและฮันเตอร์ (1998) ตามดังกล่าวข้างต้นทดลอง ห้าแยกของ S. cepivorum ได้ระบุนอกจากนี้ยังได้ดำเนินการทดสอบ pathogenicity (คอ postulate)และทำการยืนยันบทบาทของการแยกเชื้อราในลักษณะเกิดขึ้นและอาการของโรคการทดสอบทำตามห้าแยกของ S. cepivorumในการทดลองเรือนกระจกกับห้านวดแต่ละสามารถจำลอง 4 แบบจำลองประกอบด้วยกระถางพลาสติกประกอบด้วยกก. 2 ของ ฟิลด์กระเทียม pasteurised ดินล่วงหน้า inoculatedมี S. cepivorum และหว่าน ด้วยเมล็ดกระเทียมสาม (หลอด)หลังจากปรากฏอาการในกระเทียมพืช การตัวแทน pathogenic ถูกใหม่แยกต่างหากจากเนื้อเยื่อติดเชื้อเป็นการอธิบายในส่วนด้านบน และค่าสำหรับ pathogenicity ตามโรคนั้น ๆเปอร์เซ็นต์เหนี่ยวนำ (Mahdizadehnaraghi et al. 2007) ตามon the above experiments, the most pathogenic isolate ofS. cepivorum was selected to be used for the rest of the study.Preparation of antagonistic fungal isolatesIsolates of three fungal antagonists including T. flavus,T. harzianum, and T. asperellum were obtained from the researchlaboratory’s microbial collection of beneficial microorganisms,of the Iranian Research Institute of PlantProtection. In 2013, these isolates were isolated from thesoil of garlic and potato fields located in the province ofHamedan, Iran. The antagonistic activities of the isolatesagainst some fungal pathogens, including S. cepivorum,were previously evaluated and approved in in vitro conditionsin the above-mentioned laboratory (unpublisheddata). The antagonistic fungal isolates used in the studyand their characteristics are presented in table 1.Development and preparation of bioformulationsTwelve bioformulations were prepared using six isolatesof the above-mentioned fungal antagonists and theorganic and inorganic carriers – rice bran and talc. Thepowdery compounds of the carriers were selected basedon their use in previous studies (Kakvan et al. 2013; Samavatet al. 2014). They were steam-sterilised at 121°C for30 min, and dried aseptically in glass trays before use.

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการ การแยกจาก จากสาขา cepivorum

กระเทียมในช่วงฤดูใบไม้ผลิของปี 2014 กระเทียมสาขาในจังหวัด
ของ iran . kgm อิหร่าน ผลการวิจัยพบว่า โรคพืชแสดงอาการเน่าสีขาว
การเก็บรวบรวมและโอน
ไปยังห้องปฏิบัติการเพื่อให้ตัวแทนสามารถแยกโรค
. ตัวอย่างที่ถูกประมวลผล โดยตัดเอา
ผิวทำให้การป่วยและชิ้น
ของลำต้นและหลอดไฟบนอาหารเลี้ยงเชื้อ potato dextrose agar ( PDA ) อาหารเลี้ยงเชื้อ

การปลูกเชื้อราอาณานิคมจึงบริสุทธิ์
และระบุการใช้ปุ่มมาตรฐานรหัส
ของ Barnett และฮันเตอร์ ( 1998 ) จากการทดลองดังกล่าวข้างต้น
5 ไอโซเลตของ S )

cepivorum ระบุ การทดสอบ ( Koch สัจพจน์ ) ยังดำเนินการ
และดำเนินการเพื่อยืนยันบทบาทของเชื้อราในลักษณะการแยก

และอาการโรค การทดสอบการแยก cepivorum 5 S .
ในเรือนทดลองกับห้ารักษาแต่ละ
4 ได้แก่ แบบจําลองประกอบด้วย พลาสติก หม้อที่มี
2 กิโลกรัมของดินก่อนปลูกทุ่งกระเทียม พาสเจอร์ไรซ์
กับ s และ cepivorum หว่านกับสามเมล็ดกระเทียม
( หลอดไฟ )หลังจากการปรากฏตัวของอาการพืชกระเทียม
ตัวแทน เชื้อโรค เป็นอีกครั้งที่แยกได้จากเนื้อเยื่อที่ติดเชื้อ ,
ระบุตามที่อธิบายไว้ในส่วนข้างต้น และการประเมิน
ตามแต่ละโรค
% การเหนี่ยวนำ ( mahdizadehnaraghi et al . 2007 ) โดย
ในข้างต้นนี้ เชื้อโรคส่วนใหญ่แยก
Scepivorum คือการเลือกที่จะใช้สำหรับส่วนที่เหลือของการศึกษา การแยกเชื้อราปฏิปักษ์

ไอโซเลทเชื้อราปฏิปักษ์ทั้งสาม T
T . harzianum flavus , และ ต. asperellum ได้มาจากการเก็บจุลินทรีย์งานวิจัย
ปฏิบัติการของจุลินทรีย์ที่เป็นประโยชน์ ,
ของอิหร่าน สถาบันวิจัยพืช
การป้องกัน ในปี 2013 นี้ไอโซเลทที่แยกได้จาก
ดินของกระเทียมและมันฝรั่งสาขาตั้งอยู่ในจังหวัด
iran . kgm , อิหร่าน กิจกรรมของเชื้อปฏิปักษ์ต่อเชื้อราเชื้อโรคบาง

cepivorum รวมทั้งสหรัฐอเมริกา , ก่อนหน้านี้มีการประเมินและอนุมัติในเงื่อนไข
ในปฏิบัติการดังกล่าวปลอดเชื้อ ( ข้อมูลเผยแพร่
) ส่วนเชื้อราปฏิปักษ์ไอโซเลตที่ใช้ในการศึกษาวิจัย และนำเสนอในลักษณะเป็น

โต๊ะ 1การพัฒนาและการเตรียม bioformulations
12 bioformulations เตรียมใช้หกสายพันธุ์ของเชื้อราปฏิปักษ์ดังกล่าวข้างต้น

อินทรีย์และอนินทรีและผู้ให้บริการ–น้ำมันรำข้าวและแป้งโรยตัว
สารประกอบแป้งของผู้ได้รับการคัดเลือกจาก
เมื่อใช้ในการศึกษาก่อนหน้านี้ ( kakvan et al . 2013 ; samavat
et al . 2014 ) พวกไอ sterilised ที่ 121 ° C
30 นาทีและแห้ง aseptically ในถาดแก้วก่อนที่จะใช้