2.3. HPLC analysis and LC–MS identi

2.3. HPLC analysis and LC–MS identification

PSPA extracts were dissolved in water containing 0.05% hydrochloric acid and passed through a 0.22-μm syringe filter (Jinteng Experiment Equipment Co., Ltd, Tianjin, China) prior to HPLC analysis using a Shimadzu LC-20 HPLC system (Shimadzu Corp., Kyoto, Japan) equipped with an SPD-M20A diode array detector (DAD), two LC-20AD pumps, a CTO-20A column oven, a DGU-20A3R degasser and an SIL-20A autosampler, all controlled with LCsolution (Version 1.24 SP1, Tokyo, Japan). The separations were carried out on a Kromasil C18 column (150 × 4.6 mm; Eka Chemicals AB, Bohus, Sweden) equipped with a Kromasil guard column kit. The injection volume was 10 μL and a binary gradient elution mixture, composed of water with trifluoroacetic acid (99.5/0.5, v/v) (A) and acetonitrile (B) was applied to the column, as follows: 0–8 min, 12–16% B; 8–12 min, 16–17% B; 12–16 min, 17–19% B; 16–20 min, 19% B; 20–22 min, 19–20% B; and 22–30 min, 20% B. The mobile phase flow rate was 1.0 mL/min, the temperature of the column oven was set to 30 °C and the DAD was set to 530 nm for acquiring chromatograms recorded from 200 to 800 nm.

Liquid chromatography–electrospray ionisation–mass spectrometry (LC–ESI–MS) analysis was performed on a Shimadzu UFLC XR system connected to a Shimadzu LC MS-8030 triple quadrupole mass spectrometer. The HPLC column, column oven temperature and conditions of the mobile phase gradient for this analysis were as described above for the HPLC analysis. Mass spectra with an m/z range of 500–1500 were obtained in positive-ion mode. The conditions of the ESI source were optimised as follows: nitrogen was used as the nebulising gas and drying gas, with flow rates of 3.0 and 15.0 L/min, respectively. The temperatures of the heat block and desolvation line were set at 400 and 250 °C, respectively. LC–MS/MS analysis was performed with the same instrument and conditions as described above, with collision energies from 10 to 25 eV.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 การวิเคราะห์ HPLC และ LC-MS ประจำตัวของสารสกัดจากPSPA ถูกละลายในน้ำที่มี 0.05% กรดไฮโดรคลอและผ่านตัวกรองเข็มฉีดยา 0.22 ไมครอน (Jinteng ทดลองอุปกรณ์ จำกัด , เทียนจิน, จีน) ก่อนที่จะมีการวิเคราะห์โดยใช้วิธี HPLC Shimadzu LC-20 ระบบ HPLC (Shimadzu คอร์ป, เกียวโตญี่ปุ่น) พร้อมกับไดโอด SPD-M20A อาร์เรย์เครื่องตรวจจับ (DAD) สองปั๊ม LC-20AD, เตาอบคอลัมน์ CTO-20A เป็น degasser DGU-20A3R และฉีดตัวอย่างอัตโนมัติ SIL-20A ทั้งหมด ควบคุมด้วย LCsolution (เวอร์ชั่น 1.24 SP1, กรุงโตเกียวประเทศญี่ปุ่น) แยกได้ดำเนินการในคอลัมน์ Kromasil C18 (150 × 4.6 มม Eka สารเคมี AB, Bohus, สวีเดน) พร้อมกับชุดคอลัมน์ยาม Kromasil ปริมาณการฉีดเป็น 10 ไมโครลิตรและส่วนผสมชะลาดไบนารีประกอบด้วยน้ำที่มีกรด TRIFLUOROACETIC (99.5 / 0.5, v / v) (A) และ acetonitrile (B) ถูกนำไปใช้คอลัมน์ดังนี้ 0-8 นาที 12-16% B; 8-12 นาที, 16-17% B; 12-16 นาที, 17-19% B; 16-20 นาที, 19% B; 20-22 นาที, 19-20% B; และ 22-30 นาที, 20% บีอัตราการไหลของเฟสเคลื่อนที่ได้ 1.0 มิลลิลิตร / นาทีอุณหภูมิของเตาอบคอลัมน์ถูกกำหนดให้วันที่ 30 องศาเซลเซียสและ DAD ถูกตั้งค่าให้ 530 นาโนเมตรสำหรับการซื้อ chromatograms บันทึก 200-800 นาโนเมตร . เหลวโค-electrospray spectrometry Ionisation มวล (LC-ESI-MS) การวิเคราะห์ที่ได้ดำเนินการในระบบ Shimadzu UFLC XR เชื่อมต่อกับ Shimadzu LC MS-8030 สาม quadrupole สเปกโตรมิเตอร์มวล คอลัมน์ HPLC อุณหภูมิเตาอบคอลัมน์และเงื่อนไขของการไล่ระดับสีเฟสเคลื่อนที่สำหรับการวิเคราะห์ครั้งนี้มีอธิบายไว้ข้างต้นสำหรับการวิเคราะห์ HPLC สเปกตรัมมวลที่มีช่วงม. / z ของ 500-1500 ที่ได้รับในโหมดบวกไอออน เงื่อนไขของแหล่งที่มาของ ESI ถูกปรับให้เหมาะสมดังนี้ไนโตรเจนที่ใช้เป็นก๊าซ nebulising และก๊าซการอบแห้งที่มีอัตราการไหลของ 3.0 และ 15.0 ลิตร / นาทีตามลำดับ อุณหภูมิของบล็อกความร้อนและสาย desolvation ที่ตั้งอยู่ที่ 400 และ 250 องศาเซลเซียสตามลำดับ การวิเคราะห์ LC-MS / MS ได้ดำเนินการในเครื่องเดียวกันและเงื่อนไขตามที่อธิบายไว้ข้างต้นมีพลังชน 10-25 eV

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 เทคนิคการวิเคราะห์และ LC ( MS ตัว

pspa สารถูกละลายในน้ำที่มี 0.05 % กรดและผ่าน 0.22 - μ M เข็มตัวกรอง ( Jinteng ทดลอง Equipment Co . , Ltd , เทียนจิน , จีน ) ก่อนการวิเคราะห์ HPLC โดยใช้ HPLC Shimadzu lc-20 ระบบ ( Shimadzu คอร์ป , เกียวโต , ญี่ปุ่น ) พร้อมกับ spd-m20a ไดโอดเรย์ตรวจจับ ( พ่อ ) , สอง lc-20ad ปั๊มเป็น cto-20a คอลัมน์เตาอบ , degasser dgu-20a3r และ sil-20a autosampler ทั้งหมดควบคุมด้วย lcsolution ( เวอร์ชั่น 1.24 SP1 , โตเกียว , ญี่ปุ่น ) โดยแยกศึกษาใน kromasil คอลัมน์ C18 150 × 4.6 มม. ; เคมีภัณฑ์ eka AB , bohus , สวีเดน ) พร้อมกับ kromasil ยามคอลัมน์ kit ปริมาณการฉีดได้ 10 μ L และไบนารี ( สีผสมประกอบด้วยน้ำที่มีกรดไตรฟลูออโรอะซิติก ( 99.5 / 0.5 V / V ) ( ก ) และ ( ข ) ไนใช้คอลัมน์เป็นดังนี้ : 0 – 8 นาที 12 – 16 % B ; 8 – 12 นาที 16 – 17 % B ; 12 – 16 นาที 17 – 19 % B ; 16 – 20 นาที , 19 % B ; 20 – 22 นาที 19 – 20 % B ; 22 – 30 นาที 20 % B . อัตราการไหลของเฟสเคลื่อนที่คือ 1.0 มล. / นาทีอุณหภูมิของเตาอบ ตั้งไว้ที่ 30 องศา คอลัมน์ C และพ่อตั้ง 530 nm สำหรับการรับกลิ่นที่บันทึกไว้จาก 200 ถึง 800 nm .

liquid chromatography ) โดยวิธีพ่นละอองไฟฟ้า ionisation Mass Spectrometry ( LC - ESI ( MS ) การวิเคราะห์ใน Shimadzu uflc 9000 ระบบเชื่อมต่อกับ Shimadzu LC ms-8030 สามคำแมสสเปกโตรมิเตอร์ พบคอลัมน์คอลัมน์เตาอบอุณหภูมิและสภาวะของการไล่ระดับสีเฟสเคลื่อนที่สำหรับการวิเคราะห์นี้เป็นอธิบายไว้ข้างต้นในการวิเคราะห์ปริมาณซูโครส มวลสเปกตรัมด้วย M / Z ช่วง 500 - 1500 ได้ในโหมดอิออนบวก เงื่อนไขของ ESI แหล่งมีประสิทธิภาพดังนี้ ไนโตรเจนใช้เป็น nebulising ก๊าซและก๊าซแห้ง กับอัตราการไหลของ 3.0 และ 15.0 L / min ตามลำดับอุณหภูมิของความร้อนที่ป้องกันและศูนยากาศเส้นตั้งที่ 400 และ 250 ° C ตามลำดับ LC MS / MS และการวิเคราะห์ด้วยเครื่องมือเดียวกันและเงื่อนไขตามที่อธิบายไว้ข้างต้นกับการปะทะพลังจาก 10 ถึง 25 ปีที่ .