3.2 Optimization of the HPLC Condit

3.2 Optimization of the HPLC Condition
The chromatographic conditions were optimized so as to obtain a good separation between benzoic acid, sorbic acid and matrix interferences in noodles. Acetate and phosphate aqueous solutions with different pH and organic solvent (methanol and acetonitrile) were investigated and system suitability test (SST) parameters were performed during the development and optimization of method. Firstly, the separation was attempted and compared on a C18 column (150 mm × 4.6 mm, 5 μm) and a C18 column (50 mm × 4.6 mm, 5 μm) with a wavelength at 224 nm (for sorbic acid), 234 nm (for benzoic acid) and 254 nm using acetonitrile and 5 mM phosphate buffer (pH 7) in the ratio range from 5:95 - 30:70. Both acids were eluted quickly and could not separate from matrix interferences. Methanol was then replaced in the same ratio range but the peaks of both acids were co-eluted. Increasing of phosphate buffer concentration (5-30 mM) led to increase in analytes’ retention, decrease in tailing factor and resolution value. Consequently, ammonium acetate aqueous solution was employed instead of phosphate to achieve the best resolution. Poor resolution and peak tailing was obtained when acetonitrile was used. Separation of benzoic acid and sorbic acid was accomplished by varying the concentration of ammonium acetate (5-30 mM) and the ratio of methanol. An increase in retention and peak broadening of benzoic acid and sorbic acid was observed when higher concentration of ammonium acetate at higher pH was utilized. Hence, the aqueous component of the mobile phase was selected to be ammonium acetate 5 mM, pH 4.4.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.2 การเพิ่มประสิทธิภาพของเงื่อนไข HPLCเงื่อนไข chromatographic ถูกปรับเพื่อขอแยกดี ระหว่างกรด benzoic กรด sorbic interferences เมตริกซ์ในก๋วยเตี๋ยว Acetate และฟอสเฟตอควีโซลูชั่นที่ มีค่า pH แตกต่างกันและตัวทำละลายอินทรีย์ (เมทานอลและ acetonitrile) ถูกสอบสวน และพารามิเตอร์การทดสอบ (SST) ความเหมาะสมของระบบในระหว่างการพัฒนาและเพิ่มประสิทธิภาพของวิธีดำเนิน ประการแรก แยกพยายาม และเปรียบเทียบคอลัมน์ C18 (150 mm × 4.6 มม. 5 μm) และคอลัมน์ C18 (μm 50 มม. × 4.6 มม. 5) กับความยาวคลื่นที่ 224 nm (สำหรับ sorbic กรด), 234 nm (สำหรับกรด benzoic) และ 254 nm ใช้ acetonitrile และ 5 มม.ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7) ในอัตราส่วนตั้งแต่ 5:95 - 30:70 กรดทั้งสอง eluted อย่างรวดเร็ว และสามารถแยกออกจากเมทริกซ์ interferences ไม่ เมทานอลถูกแทนแล้วในช่วงอัตราส่วนเดียวกัน แต่กรดทั้งสองแห่งได้ร่วม eluted เพิ่มของฟอสเฟตบัฟเฟอร์ความเข้มข้น (5-30 mM) นำไปเพิ่มในเก็บข้อมูลของ analytes, tailing ค่าตัวคูณและความละเอียดลดลง ดังนั้น ละลายแอมโมเนีย acetate ถูกจ้างแทนฟอสเฟตเพื่อให้บรรลุการแก้ปัญหาที่ดีที่สุด ความละเอียดต่ำและสูงสุด tailing ได้รับเมื่อใช้ acetonitrile แยกกรด benzoic และกรด sorbic ได้สำเร็จ โดยแตกต่างกันที่ความเข้มข้นของแอมโมเนีย acetate (5-30 มม.) และอัตราส่วนของเมทานอล การเพิ่มเงินวางประกันและยอด broadening ของกรด benzoic และกรด sorbic ถูกตรวจสอบเมื่อมีใช้ความเข้มข้นสูงของแอมโมเนีย acetate ที่ pH สูงกว่า ดังนั้น ส่วนประกอบอควีของเฟสเคลื่อนที่ถูกเลือกให้เป็น acetate แอมโมเนีย 5 มม pH 4.4

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3.2 การเพิ่มประสิทธิภาพของ HPLC
สภาพเงื่อนไขโครมาถูกที่ดีที่สุดเพื่อที่จะได้รับการแยกที่ดีระหว่างกรดเบนโซอิกกรดซอร์บิกและการรบกวนเมทริกซ์ในก๋วยเตี๋ยว Acetate และการแก้ปัญหาน้ำที่มีค่า pH ฟอสเฟตที่แตกต่างกันและตัวทำละลายอินทรีย์ (เมทานอลและ acetonitrile) ได้รับการตรวจสอบและการทดสอบความเหมาะสมของระบบ (SST) พารามิเตอร์ได้ดำเนินการในระหว่างการพัฒนาและการเพิ่มประสิทธิภาพของวิธีการ ประการแรกการแยกความพยายามและเมื่อเทียบกับในคอลัมน์ C18 (150 มิลลิเมตร× 4.6 มม 5 ไมครอน) และคอลัมน์ C18 (50 มม× 4.6 มม 5 ไมครอน) ที่มีความยาวคลื่น 224 นาโนเมตร (กรดซอร์บิค) ที่ 234 นาโนเมตร (สำหรับกรดเบนโซอิก) และ 254 นาโนเมตรโดยใช้ acetonitrile และ 5 มิลลิฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7) อยู่ในช่วงจากอัตราส่วน 5:95 - 30:70 กรดทั้งสองถูกชะได้อย่างรวดเร็วและไม่สามารถแยกออกจากการรบกวนเมทริกซ์ เมทานอลถูกแทนที่แล้วในช่วงอัตราส่วนเหมือนกัน แต่ยอดของกรดทั้งสองได้ร่วมชะ การเพิ่มความเข้มข้นของฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (5-30 มิลลิ) นำไปสู่การเพิ่มขึ้นในการเก็บข้อมูลวิเคราะห์ 'ลดลงใน tailing ปัจจัยที่มีความละเอียดและความคุ้มค่า ดังนั้นแอมโมเนียมอะซิเตทสารละลายถูกจ้างมาแทนฟอสเฟตเพื่อให้บรรลุละเอียดที่ดีที่สุด ความละเอียดสูงสุดที่ยากจนและ tailing ที่ได้รับเมื่อ acetonitrile ถูกนำมาใช้ แยกกรดเบนโซอิกและกรดซอร์บิกก็ประสบความสำเร็จโดยการเปลี่ยนแปลงความเข้มข้นของแอมโมเนียมอะซิเตท (5-30 มิลลิเมตร) และอัตราส่วนของเมทานอล การเพิ่มขึ้นของการเก็บรักษาและการขยายจุดสูงสุดของกรดเบนโซอิกและกรดซอร์บิกพบว่าเมื่อความเข้มข้นที่สูงขึ้นของแอมโมเนียมอะซิเตทที่ pH สูงมาใช้ ดังนั้นองค์ประกอบน้ำของเฟสเคลื่อนที่ที่ถูกเลือกให้เป็นแอมโมเนียมอะซิเตท 5 มิลลิพีเอช 4.4

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3.2 เพิ่มประสิทธิภาพของเทคนิคภาพ
เงื่อนไขและเหมาะสมเพื่อให้ได้การแยกระหว่างกรดเบนโซอิก , กรดซอร์บิค และการแทรกแซงของเมทริกซ์ในก๋วยเตี๋ยวอะซิเตท และโซลูชั่นที่มีฟอสเฟต pH ที่แตกต่างกันและตัวทำละลายอินทรีย์ ( เมทานอลและไน ) ทำการทดสอบความเหมาะสมของระบบ ( SST ) ค่าดำเนินการในระหว่างการพัฒนาและการเพิ่มประสิทธิภาพของวิธีการ ประการแรก คือ พยายามแยก และเมื่อเทียบกับคอลัมน์ C18 150 มิลลิเมตร× 4.6 มม. , 5 μ M ) และคอลัมน์ C18 50 มม. × 4.5 มม.5 μ M ) ที่มีความยาวคลื่นที่ 224 nm ( กรดซอร์บิค ) , 234 nm ( benzoic acid ) และ 254 nm ใช้ไนฟอสเฟตบัฟเฟอร์ 5 มม. ( pH 7 ) ในช่วงต่อจาก 5:95 - 30 ต่อ 70 . มีทั้งชนิดตัวอย่างได้อย่างรวดเร็วและไม่สามารถแยกจากการแทรกแซงเมทริกซ์ เมทานอลถูกแทนที่ในช่วงอัตราส่วนเดียวกัน แต่ยอดของทั้งกรดคาร์บอนไดออกไซด์ 3 ตัวอย่าง .การเพิ่มความเข้มข้นของฟอสเฟตบัฟเฟอร์ ( 5-30 มม. ) ทำให้เพิ่มสาร ' ความคงทนลดลงตามปัจจัยและค่าความละเอียด ดังนั้นสารละลายแอมโมเนียมอะซิเตตใช้แทนฟอสเฟตเพื่อบรรลุความละเอียดที่ดีที่สุด จนความละเอียดสูงสุด และ ติดตามได้ไน เมื่อใช้การแยกกรดเบนโซอิก และกรดซอร์บิคได้ ที่ความเข้มข้นของแอมโมเนียมอะซิเตท ( 5-30 มม. ) และอัตราส่วนของเมทานอล เพิ่มความคงทนสูงสุดของกรดเบนโซอิกและกรดซอร์บิคขยายและพบว่าเมื่อความเข้มข้นของแอมโมเนียมอะซิเตตที่ระดับ pH ใช้ . ดังนั้นส่วนสารละลายของเฟสเคลื่อนที่ได้รับเลือกเป็น mm , acetate แอมโมเนีย 5 pH 4.4 .