Fig. 1 shows the changes in activit

Fig. 1 shows the changes in activities of the calpain system extracted during frozen storage of meat at −20 and −80 °C in experiment 1. The stability was similar at the two storage temperatures for all three components of the calpain system. The extractable activity of μ-calpain and m-calpain did not change during the storage period indicating that the enzymes were stable at both storage temperatures. The activity of calpastatin was constant in the first few weeks of the storage period, thereafter the activity decreased until day 123. The decreased activity of calpastatin is in agreement with Koohmaraie, 1990, Whipple and Koohmaraie, 1992 and Duckett et al., 1998 and Ingolfsson and Dransfield (1991). The previous studies, however, observed a more rapid decrease in calpastatin activity during frozen storage than reported in Fig. 1. Meat samples are stored at −80 °C because chemical and biological events are expected to be negligible at this temperature. Thus, it is surprising that calpastatin seems to be unstable at this temperature and that no difference is observed between storage at −20 and −80 °C. The rates of chemical reactions are normally highly dependent on temperature. Fig. 2 shows that the activity of the m-calpain stock solution decreased during storage in 30% glycerol at 4 °C due to inactivation of the m-calpain molecules. The observed decrease in calpastatin activity (Fig. 1) was related to the change in activity of the m-calpain stock solution, i.e., the lower the activity of m-calpain stock solution, the lower the measured activity of calpastatin (Fig. 3). To test whether this relation was causal, the activity of calpastatin in meat stored at −80 °C for 143 days was assayed using both the original stock solution of m-calpain and a newly purified stock solution. The resulting calpastatin activity using the new stock solution was similar with the initial levels observed at the start of the storage period (Table 1). The new stock solution gave a 44% higher calpastatin activity at a meat storage time of 143 days than the original stock solution and there was no difference between the calpastatin activity originally measured at day 0 and calpastatin activity measured at day 143 using the new stock solution. Thus, the observed decrease in calpastatin activity during frozen storage of meat (Fig. 1) appears related to the instability of the m-calpain stock solution. The second experiment tested whether the measured calpastatin activity of meat stored at either −20 or −80 °C was influenced by the storage temperature of the m-calpain stock solution (Fig. 4). As found in experiment 1 (Fig. 1), no effect of storage temperature of meat was observed. The samples measured using m-calpain stored at 4 °C had a constant level of calpastatin in the first half of the storage period followed by a decreased calpastatin activity in the second half of the period. This is in accordance with the results presented in Fig. 1 except the calpastatin levels was constant for a longer period in Fig. 4 before the activity decreased. This might be due to a higher initial activity of the m-calpain stock solution used in experiment 2 (Fig. 2). As also observed in experiment 1, there was a relationship between the activity of the m-calpain stock solution and the measured calpastatin activity (Fig. 3); however, only below an activity of approximately 60 U/mL, above this no relation to calpastatin activity was observed. If the partially purified m-calpain stock solution was stored at −80 °C, then the activity of the stock solution did not change during the storage period (results not shown). The calpastatin activities measured using m-calpain stored at −80 °C were constant during the whole storage period of the meat stored at both −20 and −80 °C (Fig. 4). The results obtained in the present study support the conclusion that the decrease in calpastatin activity during frozen storage of meat is due to instability of the m-calpain stock solution and not due to instability of calpastatin in the meat during frozen storage.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Fig. 1 แสดงการเปลี่ยนแปลงกิจกรรมของระบบ calpain แยกระหว่างการเก็บรักษาแช่แข็งเนื้อใน −20 และ −80 ° C ในทดลอง 1 ความมั่นคงที่ที่อุณหภูมิเก็บสองคอมโพเนนต์ที่สามทั้งหมดของ calpain ไม่ได้เปลี่ยนกิจกรรม extractable ของμ-calpain m-calpain ในระหว่างรอบระยะเวลาเก็บข้อมูลที่แสดงว่า เอนไซม์มีเสถียรภาพทั้งการเก็บในอุณหภูมิ กิจกรรมของ calpastatin คงที่ในสองสามสัปดาห์แรกของรอบระยะเวลาเก็บข้อมูล กิจกรรมหลังจากนั้นลดลงจนถึงวันที่ 123 กิจกรรมการลดลงของ calpastatin จะยังคง Koohmaraie, 1990 วิพเพิล และ Koohmaraie, 1992 และ Duckett และ al., 1998 และ Ingolfsson และ Dransfield (1991) การศึกษาก่อนหน้านี้ อย่างไรก็ตาม สังเกตมากขึ้นอย่างรวดเร็วลดลง calpastatin กิจกรรมระหว่างการเก็บรักษาแช่แข็งมากกว่ารายงานใน Fig. 1 เนื้อตัวอย่างจะเก็บไว้ที่ −80 ° C เนื่องจากเคมี และชีวภาพคาดว่าจะเป็นระยะที่อุณหภูมินี้ ดังนั้น จึงน่าแปลกใจที่ calpastatin น่าจะเสถียรที่อุณหภูมินี้ และที่ไม่แตกต่างคือสังเกตระหว่างเก็บที่ −20 และ −80 องศาเซลเซียส อัตราของปฏิกิริยาเคมีเป็นปกติสูงขึ้นอยู่กับอุณหภูมิ Fig. 2 แสดงที่กิจกรรมของ m-calpain หุ้นโซลูชั่นลดลงระหว่างการเก็บรักษาในกลีเซอร 30% ที่ 4 ° C เนื่องจากยกเลิกการเรียกโมเลกุล m-calpain ลดสังเกตในกิจกรรม calpastatin (Fig. 1) ที่สัมพันธ์กับการเปลี่ยนแปลงในกิจกรรมของโซลูชันหุ้น m-calpain,, ลดลงกิจกรรมของ m-calpain หุ้นโซลูชั่น ล่างวัดกิจกรรมของ calpastatin (Fig. 3) เช่น การทดสอบความสัมพันธ์นี้ถูกสาเหตุ การ calpastatin ในเนื้อเก็บไว้ที่ −80 ° C 143 วันถูก assayed ใช้โซลูชันหุ้นเดิมของ m-calpain และปัญหาหุ้นใหม่บริสุทธิ์ กิจกรรม calpastatin ได้ใช้โซลูชันหุ้นใหม่คล้ายกับระดับเริ่มต้นสังเกตที่จุดเริ่มต้นของรอบระยะเวลาเก็บข้อมูล (ตาราง 1) โซลูชันใหม่หุ้นให้เป็น 44% สูง calpastatin กิจกรรมทีเก็บเนื้อของวันกว่าโซลูชันเดิมหุ้น และมีกิจกรรม calpastatin ที่วัดเดิม ในวันที่ 0 และกิจกรรม calpastatin วัน 143 ใช้โซลูชันหุ้นใหม่ที่วัดแตกต่างกันไม่ ดังนั้น ลดสังเกตในกิจกรรม calpastatin ระหว่างการเก็บรักษาแช่แข็งเนื้อ (Fig. 1) ปรากฏที่เกี่ยวข้องกับความไม่แน่นอนของ m-calpain หุ้นโซลูชัน การทดลองที่สองทดสอบว่ากิจกรรมวัด calpastatin เนื้อเก็บไว้ที่ −20 หรือ −80 ° C มีผลมาจากอุณหภูมิการจัดเก็บของ m-calpain หุ้นโซลูชั่น (Fig. 4) ผลของอุณหภูมิในการเก็บของเนื้อไม่ถูกตรวจสอบเป็นที่พบในการทดลอง 1 (Fig. 1), ตัวอย่างการวัดโดยใช้ m-calpain เก็บที่ 4 ° C ได้ในระดับที่คงที่ของ calpastatin ในครึ่งแรกของรอบระยะเวลาการเก็บตามกิจกรรม calpastatin ลดลงในครึ่งหลังของรอบระยะเวลา นี้เป็นไปตามผลที่แสดงใน 1 Fig. ยกเว้น calpastatin ระดับคงที่สำหรับใน Fig. 4 ก่อนกิจกรรมลดลง นี้อาจเป็น เพราะกิจกรรมการเริ่มต้นที่สูงของ m-calpain หุ้นโซลูชั่นที่ใช้ในการทดลอง 2 (Fig. 2) เป็นนอกจากนี้ยังพบในการทดลอง 1 มีความสัมพันธ์ระหว่างกิจกรรม m-calpain หุ้นโซลูชันและกิจกรรมวัด calpastatin (Fig. 3); อย่างไรก็ตาม เท่านั้นต่ำกว่ากิจกรรมของ U 60 mL ข้างต้นนี้ไม่สัมพันธ์กับ calpastatin กิจกรรมที่ดำเนินการ ถ้าโซลูชันหุ้น m-calpain บริสุทธิ์บางส่วนถูกเก็บไว้ที่ −80 ° C แล้วการแก้ปัญหาสินค้าคงคลังได้ไม่เปลี่ยนแปลงในระหว่างรอบระยะเวลาเก็บข้อมูล (ไม่แสดงผล) กิจกรรม calpastatin ที่วัดโดยใช้ m-calpain เก็บที่ −80 ° C ได้คงช่วงทั้งเก็บเนื้อเก็บไว้ที่ −20 และ −80 ° C (Fig. 4) ผลลัพธ์ได้รับการสนับสนุนการศึกษาปัจจุบันบทสรุปที่ calpastatin กิจกรรมระหว่างการเก็บรักษาแช่แข็งของเนื้อลดลงเนื่อง จากความไม่แน่นอนของ m-calpain หุ้นโซลูชัน และไม่เนื่อง จากความไม่แน่นอนของ calpastatin ในเนื้อระหว่างการเก็บรักษาแช่แข็ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

มะเดื่อ. 1 แสดงการเปลี่ยนแปลงในกิจกรรมของระบบ calpain สกัดระหว่างการเก็บแช่แข็งของเนื้อสัตว์ที่ -20 และ -80 ° C ในการทดลอง 1. ความมั่นคงเป็นใกล้เคียงที่สองอุณหภูมิการเก็บรักษาสำหรับทั้งสามองค์ประกอบของระบบ calpain กิจกรรมที่สกัดของμ-calpain และ m-calpain ไม่เปลี่ยนแปลงในช่วงระยะเวลาการจัดเก็บข้อมูลแสดงให้เห็นว่าเอนไซม์ที่มีเสถียรภาพทั้งอุณหภูมิการเก็บรักษา กิจกรรมของ calpastatin เป็นอย่างต่อเนื่องในช่วงไม่กี่สัปดาห์แรกของรอบระยะเวลาการจัดเก็บหลังจากนั้นกิจกรรมลดลงจนกว่าจะถึงวัน 123 กิจกรรมที่ลดลงของ calpastatin อยู่ในข้อตกลงกับ Koohmaraie 1990 วิปเปิ้ลและ Koohmaraie, 1992 และ Duckett et al., 1998 และ Ingolfsson และ Dransfield (1991) การศึกษาก่อนหน้านี้ แต่สังเกตเห็นการลดลงอย่างรวดเร็วมากขึ้นในกิจกรรมการ calpastatin ระหว่างการเก็บรักษาแช่แข็งกว่ารายงานในรูป 1. ตัวอย่างเนื้อสัตว์จะถูกเก็บไว้ที่ -80 องศาเซลเซียสเพราะสารเคมีชีวภาพและเหตุการณ์ที่คาดว่าจะมีเพียงเล็กน้อยที่อุณหภูมินี้ ดังนั้นจึงเป็นที่น่าแปลกใจที่ calpastatin น่าจะเป็นความไม่แน่นอนที่อุณหภูมินี้และที่ไม่แตกต่างกันเป็นที่สังเกตระหว่างการเก็บรักษาที่อุณหภูมิ -20 และ -80 องศาเซลเซียส อัตราการเกิดปฏิกิริยาทางเคมีที่เป็นปกติมากขึ้นอยู่กับอุณหภูมิ มะเดื่อ. 2 แสดงให้เห็นว่ากิจกรรมของการแก้ปัญหาสต็อกม calpain ลดลงระหว่างการเก็บรักษาในกลีเซอรีน 30% ที่ 4 ° C เนื่องจากการใช้งานของโมเลกุลม calpain การลดลงของการปฏิบัติในกิจกรรม calpastatin (รูปที่ 1). ที่เกี่ยวข้องกับการเปลี่ยนแปลงในกิจกรรมของการแก้ปัญหาสต็อกม calpain คือการลดกิจกรรมของการแก้ปัญหาสต็อกม calpain ที่ต่ำกว่ากิจกรรมวัด calpastatin (รูปที่ 3. ) เพื่อทดสอบว่ามีความสัมพันธ์เชิงสาเหตุนี้เป็นกิจกรรมของ calpastatin ในเนื้อสัตว์ที่เก็บไว้ที่ -80 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 143 วันที่ได้รับการวิเคราะห์โดยใช้วิธีการแก้ปัญหาทั้งหุ้นเดิมของม calpain และเป็นทางออกที่บริสุทธิ์หุ้นใหม่ กิจกรรม calpastatin ส่งผลให้การใช้วิธีการแก้ปัญหาหุ้นใหม่ที่คล้ายกันที่มีระดับเริ่มต้นที่สังเกตได้ในช่วงเริ่มต้นของระยะเวลาการจัดเก็บข้อมูล (ตารางที่ 1) วิธีการแก้ปัญหาสินค้าใหม่ให้ 44% กิจกรรม calpastatin ที่สูงขึ้นในการเก็บรักษาเนื้อสัตว์ 143 วันกว่าการแก้ปัญหาหุ้นเดิมและมีความแตกต่างระหว่างกิจกรรม calpastatin วัดเดิมในวันที่ 0 และกิจกรรม calpastatin วัดในวันที่ 143 โดยใช้วิธีการแก้ปัญหาหุ้นใหม่ . ดังนั้นการลดลงของการปฏิบัติในกิจกรรม calpastatin ระหว่างการเก็บรักษาแช่แข็งจากเนื้อสัตว์ (รูปที่ 1). ปรากฏขึ้นที่เกี่ยวข้องกับความไม่แน่นอนของ M-calpain แก้ปัญหาสต็อก การทดลองที่สองทดสอบว่ากิจกรรม calpastatin วัดของเนื้อสัตว์อย่างใดอย่างหนึ่งเก็บไว้ที่ -20 หรือ -80 องศาเซลเซียสได้รับอิทธิพลจากอุณหภูมิการเก็บรักษาของการแก้ปัญหาสต็อกม calpain (รูปที่. 4) ที่พบในการทดลองที่ 1 (รูปที่ 1). ไม่มีผลกระทบของอุณหภูมิการเก็บรักษาเนื้อสัตว์พบว่า กลุ่มตัวอย่างที่ใช้วัดม calpain เก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียสมีระดับคงที่ของ calpastatin ในช่วงครึ่งแรกของรอบระยะเวลาการจัดเก็บข้อมูลตามด้วยกิจกรรม calpastatin ลดลงในช่วงครึ่งหลังของรอบระยะเวลา ซึ่งเป็นไปตามที่มีผลที่นำเสนอในรูป 1 ยกเว้น calpastatin ระดับคงที่เป็นระยะเวลานานในรูป กิจกรรมที่ 4 ก่อนที่จะลดลง นี้อาจจะเป็นเพราะเป็นกิจกรรมที่เริ่มต้นที่สูงขึ้นของการแก้ปัญหาสต็อกม calpain ที่ใช้ในการทดลองที่ 2 (รูปที่. 2) ในฐานะที่เป็นข้อสังเกตในการทดลองที่ 1 มีความสัมพันธ์ระหว่างกิจกรรมของการแก้ปัญหาสต็อกม calpain และกิจกรรม calpastatin วัด (รูปที่ 3.); แต่เพียงด้านล่างกิจกรรมประมาณ 60 U / มิลลิลิตรที่ดังกล่าวข้างต้นนี้ความสัมพันธ์กับกิจกรรม calpastatin ไม่เป็นที่สังเกต ถ้าการแก้ไขปัญหาหุ้นบริสุทธิ์บางส่วนของ m-calpain ถูกเก็บไว้ที่ -80 ° C แล้วกิจกรรมของการแก้ปัญหาหุ้นไม่เปลี่ยนแปลงในช่วงระยะเวลาการจัดเก็บข้อมูล (ผลไม่แสดง) กิจกรรม calpastatin วัดโดยใช้ม calpain เก็บไว้ที่ -80 องศาเซลเซียสได้อย่างต่อเนื่องในช่วงระยะเวลาการจัดเก็บข้อมูลทั้งหมดของเนื้อสัตว์ที่เก็บไว้ทั้ง -20 และ -80 ° C (รูปที่. 4) ผลที่ได้รับในการสนับสนุนการศึกษาครั้งนี้สรุปได้ว่าลดลงในกิจกรรม calpastatin ระหว่างการเก็บรักษาเนื้อสัตว์แช่แข็งเป็นเนื่องจากความไม่แน่นอนของการแก้ปัญหาสต็อกม calpain และไม่ได้เกิดจากความไม่แน่นอนของ calpastatin ในเนื้อสัตว์แช่แข็งระหว่างการเก็บรักษา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

รูปที่ 1 แสดงการเปลี่ยนแปลงในกิจกรรมต่างๆของระบบในคาลสกัดแช่เย็น เนื้อที่ 80 °−− 20 องศาเซลเซียส ในการทดลองที่ 1 ความมั่นคงคือที่คล้ายกันสองระดับอุณหภูมิของทั้งสามองค์ประกอบของระบบคาล .กิจกรรมของμ - คาล m-calpain สกัดและไม่เปลี่ยนแปลงในช่วงระยะเวลาการเก็บรักษาที่ระบุว่าเอนไซม์มีเสถียรภาพในระดับอุณหภูมิ กิจกรรมของ calpastatin เป็นค่าคงที่ในสองสามสัปดาห์แรกของช่วงกระเป๋า หลังจากนั้นกิจกรรมลดลงจนถึงวันที่ 123 การลดกิจกรรมของ calpastatin สอดคล้องกับ koohmaraie , 2533 ,วิปเปิ้ล และ koohmaraie 1992 และดักคิต et al . , 1998 และ ingolfsson และ dransfield ( 1991 ) การศึกษาก่อนหน้านี้ อย่างไรก็ตาม สังเกตการลดลงอย่างรวดเร็วในช่วงกิจกรรม calpastatin แช่เย็นมากกว่าที่รายงานในรูปที่ 1 ตัวอย่างเนื้อจะถูกเก็บไว้ที่ 80 ° C −เพราะสารเคมีและชีวภาพ ซึ่งเหตุการณ์ที่คาดว่าจะอยู่ที่อุณหภูมินี้ ดังนั้นมันน่าแปลกใจที่ calpastatin ดูจะไม่เสถียรที่อุณหภูมินี้ และไม่มีความแตกต่างระหว่างกระเป๋าที่สังเกตและ 80 °−− 20 องศาเซลเซียสอัตราของปฏิกิริยาทางเคมีโดยปกติจะสูง ขึ้นอยู่กับอุณหภูมิ รูปที่ 2 แสดงให้เห็นว่ากิจกรรมของ m-calpain โซลูชั่นหุ้นลดลงระหว่างการเก็บรักษาใน 30 % กลีเซอรอลที่ 4 ° C เนื่องจากการยับยั้งของ m-calpain โมเลกุลจากการลดลงในกิจกรรม calpastatin ( รูปที่ 1 ) มีความสัมพันธ์กับการเปลี่ยนแปลงในกิจกรรมของ m-calpain หุ้นโซลูชั่น เช่น ลดกิจกรรมของสารละลาย Stock m-calpain , ลดวัดกิจกรรมของ calpastatin ( รูปที่ 3 ) เพื่อทดสอบว่าความสัมพันธ์นี้คือสาเหตุ ,กิจกรรมของ calpastatin เนื้อ 80 องศา C อุณหภูมิ− 143 วันซีรั่มใช้ทั้งต้นฉบับและหุ้นโซลูชั่นของ m-calpain ใหม่บริสุทธิ์หุ้นโซลูชั่น ผลการ calpastatin กิจกรรมออกหุ้นใหม่ ใกล้เคียงกับระดับเริ่มต้นตรวจสอบที่เริ่มต้นของระยะเวลาการจัดเก็บข้อมูล ( ตารางที่ 1 )ออกหุ้นใหม่ให้ 44 % กิจกรรม calpastatin สูงกว่าในเนื้อกระเป๋าเวลา 143 วัน มากกว่าจะแก้ปัญหาหุ้นเดิม และไม่มีความแตกต่างกันระหว่าง calpastatin กิจกรรมแต่เดิมวัดในวันที่ 0 และ calpastatin กิจกรรมที่วัด วันนี่ใช้โซลูชั่นหุ้นใหม่ ดังนั้น จากการลดลงในกิจกรรม calpastatin ในระหว่างแช่เย็นเนื้อ ( ฟิค1 ) ปรากฏที่เกี่ยวข้องกับความไม่แน่นอนของ m-calpain หุ้นโซลูชั่น การทดลองที่สอง ทดสอบว่า วัด calpastatin กิจกรรมเนื้อเก็บไว้ที่−− 20 หรือ 80 ° C เป็นอิทธิพลจากอุณหภูมิของ m-calpain หุ้นโซลูชั่น ( รูปที่ 4 ) ที่พบในการทดลองที่ 1 ( รูปที่ 1 ) ผลของอุณหภูมิของอาหาร )ตัวอย่างการวัดโดยใช้ m-calpain เก็บรักษาที่อุณหภูมิ 4 องศา C ได้ในระดับคงที่ของ calpastatin ในครึ่งปีแรกของระยะเวลาการเก็บรักษา ตามด้วยการลดลง calpastatin กิจกรรมในครึ่งหลังของรอบระยะเวลา นี้สอดคล้องกับผลลัพธ์ที่แสดงในรูปที่ 1 ยกเว้นระดับ calpastatin ได้คงที่ในระยะยาวในรูปที่ 4 ก่อนกิจกรรมลดลงนี้อาจจะเนื่องจากการเริ่มต้นที่สูงกว่ากิจกรรมของ m-calpain หุ้นโซลูชั่น ที่ใช้ในการทดลองที่ 2 ( รูปที่ 2 ) ที่พบในการทดลองที่ 1 มีความสัมพันธ์ระหว่างกิจกรรมของ m-calpain หุ้นโซลูชั่น และวัด calpastatin กิจกรรม ( รูปที่ 3 ) ; อย่างไรก็ตาม , เพียงด้านล่างมีกิจกรรมประมาณ 60 U / ml ข้างต้นนี้ไม่มีส่วนเกี่ยวข้องกับกิจกรรม calpastatin ถูกสังเกตถ้าบริสุทธิ์บางส่วน m-calpain โซลูชั่นหุ้นถูกเก็บไว้ที่− 80 ° C แล้วกิจกรรมของโซลูชั่นหุ้นไม่เปลี่ยนแปลงในช่วงระยะเวลาการจัดเก็บ ( ผลลัพธ์ไม่แสดง ) การ calpastatin กิจกรรมการวัดอุณหภูมิ− m-calpain 80 ° C เป็นค่าคงที่ตลอดระยะเวลาการเก็บรักษาเนื้อเก็บไว้ทั้ง 20 และ−− 80 ° C ( รูปที่ 4 )ผลลัพธ์ที่ได้ในการศึกษานี้สนับสนุนข้อสรุปที่ลดลงในกิจกรรม calpastatin แช่เย็นเนื้อสัตว์เนื่องจากความไม่แน่นอนของ m-calpain หุ้นโซลูชั่น และไม่เนื่องจากความไม่แน่นอนของ calpastatin ในเนื้อระหว่างแช่เย็น