Inhibition of ZFP36, ZFP36L1, and Z

Inhibition of ZFP36, ZFP36L1, and ZFP36L2 gene expression in cultured keratinocytes. HaCaT keratinocytes were transfected with specific siRNAs directed against ZFP36or ZFP36L1, an unspecific (“scrambled”) negative control, or left untreated. (A) To assess the efficiency of the transfection procedure, the cells were first transfected with aFITC-labelled “scrambled” siRNA and analyzed by FACS sorting. (B) After inhibition of expression of ZFP36 or ZFP36L1 via siRNA transfection, cells were rendered quiescentby serum starvation and subsequently scratch-wounded. Expression of ZFP36 and ZFP36L1 was analyzed by qPCR. Data are expressed as means +/− SD (n = 2). *: p < 0.05; **:p < 0.01. (C) ZFP36L1 expression was also analyzed by Western blot 24 h after transfection (without scratching). GAPDH levels were assessed as a control for equal loading.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การยับยั้งการแสดงออกของยีน ZFP36, ZFP36L1 และ ZFP36L2 ใน keratinocytes ล้าง HaCaT keratinocytes ถูก transfected กับ siRNAs ที่ระบุโดยตรงต่อ ZFP36or ZFP36L1 เป็น unspecific ("กวน") ลบควบคุม หรือไม่ถูกรักษาซ้าย (ก) การประเมินประสิทธิภาพของกระบวนการ transfection เซลล์แรกถูก transfected กับ aFITC มีป้าย siRNA "กวน" และวิเคราะห์ โดยเรียง FACS (ข) หลังการยับยั้งในการแสดงออกของ ZFP36 หรือ ZFP36L1 ผ่าน siRNA transfection เซลล์ถูกแสดง quiescentby เซรั่มความอดอยาก และบาด เจ็บรอยขีดข่วนในเวลาต่อมา แสดงออกของ ZFP36 และ ZFP36L1 ถูกวิเคราะห์ โดย qPCR ข้อมูลจะแสดงเป็น ++ − SD (n = 2) *: p < 0.05 **: 0.01 < p ZFP36L1 (C) นิพจน์ถูกวิเคราะห์ โดยตะวันตกซับ 24 h หลัง transfection (ไม่เกา) มีประเมินระดับ GAPDH เป็นตัวควบคุมสำหรับการโหลดเท่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ยับยั้งการ ZFP36, ZFP36L1 และยีน ZFP36L2 แสดงออกใน keratinocytes เพาะเลี้ยง keratinocytes HaCaT ถูก transfected กับ siRNAs เฉพาะผู้กำกับกับ ZFP36or ZFP36L1 เป็น unspecific ( "ตะกาย") การควบคุมเชิงลบหรือซ้ายได้รับการรักษา (A) เพื่อประเมินประสิทธิภาพของขั้นตอนการ transfection ที่เซลล์ถูก transfected ครั้งแรกกับ aFITC ป้าย "ตะกาย" siRNA และวิเคราะห์โดยมาซึ่งการเรียงลำดับ (B) หลังจากการยับยั้งการแสดงออกของ ZFP36 หรือ ZFP36L1 ผ่าน siRNA transfection เซลล์ถูกแสดงผล quiescentby ความอดอยากในซีรั่มและต่อรอยขีดข่วนได้รับบาดเจ็บ การแสดงออกของ ZFP36 และ ZFP36L1 ถูกวิเคราะห์โดย qPCR ข้อมูลที่จะแสดงเป็นวิธี +/- SD (n = 2) *: p <0.05; **: p <0.01 (C) ZFP36L1 แสดงออกนอกจากนี้ยังได้รับการวิเคราะห์โดยดวงตะวัน 24 ชั่วโมงหลังจาก transfection (ไม่มีรอยขีดข่วน) ระดับ GAPDH มีการประเมินการควบคุมสำหรับการโหลดเท่ากัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การยับยั้ง zfp36 zfp36l1 , และ zfp36l2 ยีนเลี้ยงคีราติโนไซต์ . hacat คีราติโนไซต์เป็น transfected เฉพาะ sirnas กำกับกับ zfp36or zfp36l1 , กำกวม ( " กวน " ) ควบคุมลบ หรือซ้ายไม่ถูกรักษา ( 1 ) เพื่อศึกษาประสิทธิภาพของกระบวนการสำหรับ เซลล์แรก transfected กับ afitc labelled " กวน " ของบริษัท และวิเคราะห์ข้อมูลโดย facs การเรียงลำดับ ( ข ) หลังจากการยับยั้งการแสดงออกของ zfp36 หรือ zfp36l1 ผ่านบริษัท transfection เซลล์ที่มีการแสดงผล quiescentby ซีรั่ม ความอดอยาก และต่อมาข่วนบาดเจ็บ และการแสดงออกของ zfp36 zfp36l1 โดยใช้ qpcr . ข้อมูลที่แสดงเป็นค่าเฉลี่ย + / − SD ( n = 2 ) * * * * : p < 0.05 ; * * * * * * * * : p < 0.01 ( c ) การแสดงออก zfp36l1 ยังวิเคราะห์โดย Western blot 24 ชั่วโมงหลังจาก transfection ( โดยไม่ต้องเกา ) gapdh ระดับการประเมินเป็นควบคุมน้ำหนักที่เท่ากัน