To determine the total bacterial counts, water sam-
ples were taken from all culturing bins at every
3 days. Direct quantification of total bacteria was
carried out by epifluorescent direct count method
(Hobbie, Daley & Jasper 1977) using 4′, 6-diamidino-
2-phenylindole (DAPI, Sigma-Aldrich, USA) staining.
One mL samples were fixed with 25 lL formaldehyde
solution (2% v/v). The samples were stained with
75 lL DAPI (100 lg mL1 final concentration) and
incubated for 10 min at room temperature. After
staining, the samples were vacuum-filtered onto 25-
mm-diameter black polycarbonate membrane filters
with a 0.2-lm-pore-size (ADVANTEC, Tokyo, Japan).
These filters were mounted on slide glasses with
immersion oil and fluorescing cells were counted
using an ocular graticule. Ten random fields per slide
were counted at 10009 magnification (Z1 fluores-
cence microscope; Carl Zeiss, Oberkochen, Baden-
Wurttemberg, Germany). Bacterial numbers were €
calculated as described by Kirchman, Sigda, Kapu-
scinski and Mitchell (1982).
เพื่อตรวจสอบปริมาณแบคทีเรียรวมน้ำ sam-
Ples ถูกนำมาจากถังเพาะเลี้ยงทั้งหมดในทุก3 วัน ปริมาณโดยตรงของแบคทีเรียทั้งหมดได้รับการดำเนินการโดยวิธีการนับ epifluorescent โดยตรง (Hobbie เลย์และแจสเปอร์ 1977) โดยใช้ 4 '6 diamidino- 2 phenylindole (DAPI, Sigma-Aldrich สหรัฐอเมริกา) การย้อมสี. หนึ่งตัวอย่างมิลลิลิตรได้รับการแก้ไขที่มี 25 ดีไฮด์จะแก้ปัญหา(2% v / v) กลุ่มตัวอย่างที่ถูกย้อมด้วยสี75 จะ DAPI (100 LG ML1 ความเข้มข้นสุดท้าย) และบ่มเป็นเวลา10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง หลังจากการย้อมสีที่กลุ่มตัวอย่างเป็นสูญญากาศกรองลง 25 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลางกรองเมมเบรนโพลีคาร์บอเนตสีดำกับ 0.2-LM-รูขุมขนขนาด (ADVANTEC โตเกียวประเทศญี่ปุ่น). ตัวกรองเหล่านี้ถูกติดตั้งอยู่บนแว่นตาภาพนิ่งที่มีน้ำมันแช่และเรืองแสงเซลล์นับใช้ graticule ตา สิบสาขาสุ่มต่อสไลด์นับที่ 10009 ขยาย (Z1 fluores- กล้องจุลทรรศน์ cence; Carl Zeiss, Oberkochen, Baden- Wurttemberg, เยอรมนี) จำนวนแบคทีเรีย€ถูกคำนวณตามที่อธิบาย Kirchman, Sigda, Kapu- scinski และมิทเชล (1982)
การแปล กรุณารอสักครู่..

เพื่อศึกษาจุลินทรีย์ทั้งหมด , น้ำแซม -
ples ถ่ายจากถังขยะที่เพาะเลี้ยง
ทุก 3 วัน ปริมาณแบคทีเรียทั้งหมด
โดยตรงดำเนินการโดยวิธีนับตรง epifluorescent
( งานอดิเรก ดาลีย์&แจสเปอร์ , 1977 ) โดยใช้ 4 นั้น 6-diamidino , -
2-phenylindole ( dapi ซิกม่า Aldrich , USA ) . .
1 มล. จำนวนคงที่ด้วย 25 จะเกิด
% v / v ( 2 โซลูชั่น )จำนวน 75 จะ dapi ย้อมด้วย
( 100 ) ml1 สุดท้ายความเข้มข้น ) และ
) สำหรับ 10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง หลังจาก
การย้อมสีจำนวนเครื่องดูดฝุ่นกรองลง 25 -
มม. เส้นผ่าศูนย์กลางโพลีคาร์บอเนตแผ่นกรองสีดำ
กับ 0.2-lm-pore-size ( ADVANTEC , โตเกียว , ญี่ปุ่น ) .
เหล่านี้ตัวกรองที่ติดบนสไลด์แก้วด้วย
fluorescing แช่น้ำมัน และเซลล์ก็นับ
ใช้ด้วยเสน่หาในการดู . สิบสุ่มเขตต่อภาพนิ่ง
ถูกนับที่ 10009 ขยาย ( Z1 fluores -
cence กล้องจุลทรรศน์ ; oberkochen Carl Zeiss , , บาเดน -
วึทเทมเบิร์ก , เยอรมนี ) จากตัวเลขเป็นลูกค้า
) ตามที่อธิบายไว้โดย Kirchman sigda Kapu , -
scinski และมิเชล ( 1982 )
การแปล กรุณารอสักครู่..
