ตรวจสอบความถูกต้องLoop-mediated iso

ตรวจสอบความถูกต้องLoop-mediated isothermal amplification (LAMP) allows rapid amplification
of nucleic acids under isothermal condition was detection of Pseudomonas aeruginosa
(P. aeruginosa) is a gram-negative bacteria and be found in many natural. P. aeruginosa is major human opportunistic pathogen and common cause of nosocomial infections. It is responsible of infections in patients with cystic fibrosis (CF) and in burned or immuno-compromised individuals. Furthermore P. aeruginosa can cause microbial keratitis because of most common corneal isolates. Previous research found contact lens contamination have shown high numbers of Gram-negative bacteria and many reports of infectious keratitis patient had who worn and purchased contact lens via the internet also found patients increased risk of microbial keratitis. This study use of the LAMP assay for amplification of
P. aeruginosa by species-specific primer to detect ecfX gene. The optimum conditions was 60 min at 65°C, MgSO4 concentration at 6.0 mM, Bst DNA polymerase 8U, dNTP mix concentration of 1.4 mM and prevent false-positive reaction, using uracil-DNA glycosylase (UDG) and dUTP was substituted for dTTP resulting show no cross-reaction with non-P.aeruginosa. In addition, the LAMP-AuNP method required 60 min for LAMP and 5 min for hybridization of LAMP products to an AuNP-labaled ssDNA probe followed by salt induced probe-particle aggregation to visualize color develpment and using biotin-labeled primer hybridization with FITC-labeled DNA probe at 5 min and result of DAN amplicon could be visualized trapped at the LFD test line within 5 min, which avoids the use of gel electrophoresis, for detect the sensitivity in pure cultures was 1.670 x 103 CFU mL-1 or 3.10 CFU reaction-1 while that of conventional PCR was 1.670 x 104 CFU mL-1 or 31.0 CFU reaction-1. In case of spiked contact lens sample was 1.080 x 102 CFU mL-1 or 2.00 CFU reaction-1 while that of conventional PCR was 1.080 x 103 CFU mL-1 or 20.0 CFU reaction-1, the LAMP-AuNP and LAMP-LFD was more sensitive than conventional PCR for detection of P. aeruginosa. Therefore, the results indicated this assay targeting ecfX gene is a simple, short analysis time, specific, high sensitivity for detection of P. aeruginosa and application to detect of other pathogen for field laboratory and control and screening.
ของประโยค

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตรวจสอบความถูกต้องห่วงพึ่งขยาย isothermal (โคมไฟ) ช่วยให้การขยายอย่างรวดเร็ว
ของกรดนิวคลีอิกภายใต้เงื่อนไข isothermal คือการตรวจหาเชื้อ Pseudomonas aeruginosa
(พี aeruginosa) เป็นเชื้อแบคทีเรียแกรมลบและพบได้ในธรรมชาติมากมาย P. aeruginosa เป็นเชื้อโรคฉวยโอกาสที่สำคัญของมนุษย์และสาเหตุของการติดเชื้อในโรงพยาบาล มันเป็นความรับผิดชอบของการติดเชื้อในผู้ป่วยที่มีโรคปอดเรื้อรัง (CF) และการเผาไหม้หรือบุคคลภูมิคุ้มกันที่ถูกบุกรุก นอกจาก aeruginosa พีสามารถทำให้เกิดจุลินทรีย์ keratitis เพราะของเชื้อที่กระจกตาที่พบมากที่สุด วิจัยก่อนหน้านี้พบว่ามีการปนเปื้อนคอนแทคเลนส์ได้แสดงให้เห็นตัวเลขที่สูงของแบคทีเรียแกรมลบและรายงานจำนวนมากของผู้ป่วยติดเชื้อ keratitis มีผู้ที่สวมใส่และซื้อคอนแทคเลนส์ผ่านทางอินเทอร์เน็ตนอกจากนี้ยังพบผู้ป่วยที่เพิ่มความเสี่ยงของจุลินทรีย์ keratitis นี้ใช้ศึกษาทดสอบโคมไฟสำหรับการขยายของ
พี aeruginosa โดยไพรเมอร์สายพันธุ์ที่เฉพาะเจาะจงในการตรวจสอบยีน ecfX สภาวะที่เหมาะสมคือ 60 นาทีที่ 65 ° C เข้มข้น MgSO4 ที่ 6.0 มิลลิ Bst ดีเอ็นเอโพลิเมอร์ 8U เข้มข้นผสม dNTP 1.4 มิลลิและป้องกันไม่ให้เกิดปฏิกิริยาบวกเท็จใช้ glycosylase uracil ดีเอ็นเอ (UDG) และ dUTP ถูกสับเปลี่ยนสำหรับผล dTTP แสดงปฏิกิริยาข้ามที่ไม่ใช่การตรวจพบเชื้อ นอกจากนี้วิธีการ LAMP-AuNP ต้อง 60 นาทีสำหรับโคมไฟและ 5 นาทีสำหรับการผสมพันธุ์ของผลิตภัณฑ์โคมไฟเพื่อ AuNP-labaled สอบสวน ssDNA ตามด้วยเกลือเหนี่ยวนำให้เกิดการรวมตัวสอบสวนอนุภาคที่จะเห็นภาพ develpment สีและการใช้ไพรเมอร์ไฮบริไบโอตินที่มีข้อความที่มี FITC- สอบสวนดีเอ็นเอที่มีข้อความใน 5 นาทีและผลการ amplicon DAN อาจจะมองเห็นติดอยู่ที่สายการทดสอบ LFD ภายใน 5 นาทีซึ่งหลีกเลี่ยงการใช้เจลอิเล็กสำหรับตรวจสอบความไวในวัฒนธรรมที่บริสุทธิ์เป็น 1.670 x 103 CFU mL-1 หรือ 3.10 CFU ปฏิกิริยา-1 ในขณะที่การชุมนุม PCR เป็น 1.670 x 104 CFU mL-1 หรือ 31.0 CFU ปฏิกิริยา-1 ในกรณีของกลุ่มตัวอย่างคอนแทคเลนส์ถูกแทงเป็น 1.080 x 102 CFU mL-1 หรือ 2.00 CFU ปฏิกิริยา-1 ในขณะที่ได้รับการ PCR ธรรมดา 1.080 x 103 CFU mL-1 หรือ 20.0 CFU ปฏิกิริยา-1, โคมไฟและโคมไฟ AuNP-LFD เป็น ไวกว่าเดิม PCR ในการตรวจหา aeruginosa พี ดังนั้นผลการทดสอบแสดงให้เห็นกำหนดเป้าหมายนี้เป็นยีน ecfX ง่ายเวลาวิเคราะห์ระยะสั้นเฉพาะความไวสูงในการตรวจหาพี aeruginosa และการประยุกต์ใช้ในการตรวจสอบของเชื้อโรคอื่น ๆ สำหรับห้องปฏิบัติการภาคสนามและการควบคุมและการตรวจคัดกรอง.
ของประโยค

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ตรวจสอบความถูกต้องห่วง ( ( ( ไฟ ) ให้คำนวณ
ขยายอย่างรวดเร็วของกรดนิวคลีอิก ภายใต้สภาพอุณหภูมิคือการตรวจหา Pseudomonas aeruginosa
( P . aeruginosa ) เป็นแบคทีเรียแกรมลบ และจะพบมากในธรรมชาติ P . aeruginosa เป็นเชื้อฉวยโอกาสที่สำคัญของมนุษย์และเป็นสาเหตุของการติดเชื้อในโรงพยาบาล .มันเป็นความรับผิดชอบของการติดเชื้อในผู้ป่วยโรคซิสติกไฟโบรซิส ( CF ) และในการเผาหรือมมูโนละเมิดบุคคล นอกจากนี้พี aeruginosa สามารถก่อให้เกิด keratitis จุลินทรีย์ เพราะส่วนใหญ่ปัญหาเชื้องานวิจัยก่อนหน้านี้ พบการปนเปื้อนของคอนแทคเลนส์มีแสดงของแบคทีเรียแกรมลบตัวเลขสูง และผู้ป่วยกระจกตาอักเสบติดเชื้อ มีรายงานมากมายที่สวมใส่และซื้อคอนแทคเลนส์ผ่านอินเทอร์เน็ต นอกจากนี้ยังพบผู้ป่วยเพิ่มความเสี่ยงของ keratitis จุลินทรีย์ การศึกษานี้ใช้วิธีของโคมไฟสำหรับเด็กของพี aeruginosa โดยเฉพาะ - ขยายพันธุ์
รองพื้นเพื่อตรวจหายีน ecfx .สภาวะที่เหมาะสมคือ 60 นาทีที่ 65 ° C MgSO4 ใความเข้มข้น 6.0 มิลลิเมตร ส่วน DNA polymerase 8U dntp ผสม , ความเข้มข้นของ 1.4 มม. และป้องกันการเกิดปฏิกิริยา false-positive ใช้ไกลโคไซเลส DNA ยูราซิล ( udg ) และได้ถูกทดแทน dttp เป็นผลไม่แสดงปฏิกิริยาข้ามกับ non-p.aeruginosa . นอกจากนี้โคมไฟ aunp วิธีบังคับใช้ 60 นาทีและ 5 นาทีสำหรับทำโคมไฟผลิตภัณฑ์โคมไฟที่ aunp labaled ssdna สอบสวนตามด้วยเกลือและการสอบสวนของภาพสี และใช้สีรองพื้นพัฒนา biotin ป้ายทำป้าย fitc ดีเอ็นเอตรวจสอบที่ 5 นาทีและผลของแดนและสามารถมองเห็นติดอยู่ที่ lfd ทดสอบสายภายใน 5 มินซึ่งหลีกเลี่ยงการใช้เจล สำหรับตรวจหาความไวในวัฒนธรรมที่บริสุทธิ์คือ 1.670 x 103 โคโลนีที่แน่นอนหรือ 3.10 CFU reaction-1 ในขณะที่เชื้อปกติคือ 1.670 x 104 โคโลนีโคโลนีที่แน่นอนหรือเล่น reaction-1 . ในกรณีของแหลมคอนแทคเลนส์ตัวอย่างคือ 1.080 x 102 CFU CFU reaction-1 แน่นอนหรือ 2.00 ในขณะที่เชื้อปกติคือ 1.080 x 103 CFU CFU reaction-1 แน่นอนหรือ 20.0 ,โคมไฟและ aunp lamp-lfd อ่อนไหวมากกว่า โดยใช้เทคนิค PCR ตรวจหา P . aeruginosa ดังนั้น ผลการศึกษานี้วิเคราะห์ยีนเป้าหมาย ecfx เป็นง่ายการวิเคราะห์สั้นเวลาที่เฉพาะเจาะจง ความไวสูงในการตรวจหาพี aeruginosa และการประยุกต์ใช้ตรวจสอบเชื้อโรคอื่น ๆ สำหรับปฏิบัติการภาคสนามและการควบคุมและการคัดกรอง .
ของประโยค