A direct fluorescence polarization

A direct fluorescence polarization (FP) assay strategy, dedicated to the small molecule sensing and based
on the unique induced-fit binding mechanism of end-labelled nucleic acid aptamers, has been recently
developed by our group. Small target binding has been successfully converted into a significant increase of
the fluorescence anisotropy signal presumably produced by the reduction of the local motional freedom
of the dye. In order to generalize the approach, a rational FP sensor methodology was established herein,
by engineering instability in the secondary structure of an aptameric recognition element. The antiadenosine
DNA aptamer, labelled by a single fluorescein dye at its 3 extremity, was employed as a model
functional nucleic acid probe. The terminal stem of the stem-loop structure was shortened to induce a
destabilized/denatured conformation which promoted the local segmental mobility of the dye and then a
significant depolarization process. Upon target binding, the structural change of the aptamer induced the
formation of a stable stem-loop structure, leading to the reduction of the dye mobility and the increase
in the fluorescence anisotropy signal. This reasoned approach was applied to the sensing of adenosine
and adenosine monophosphate and their chiral analysis.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Fluorescence ตรงโพลาไรซ์ (FP) วิเคราะห์กลยุทธ์ ทุ่มเทเพื่อการตรวจวัดโมเลกุลขนาดเล็ก และใช้บนผูกพอดีเกิดเฉพาะ กลไกของกรดนิวคลีอิกที่สิ้นสุดมัน aptamers ได้รับเมื่อเร็ว ๆ นี้พัฒนา โดยกลุ่มของเรา เป้าหมายเล็ก ๆ ผูกได้สำเร็จแปลงเป็นการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญของสัญญาณ anisotropy fluorescence สันนิษฐานว่าผลิต โดยการลดเสรีภาพ motional ท้องถิ่นของสีย้อม เพื่อทั่วไปวิธีการ วิธีเซ็นเซอร์ของ FP เชือดก่อนี้โดยความไม่แน่นอนทางวิศวกรรมโครงสร้างรองขององค์การ aptameric Antiadenosine ที่ดีเอ็นเอ aptamer มัน โดยสี fluorescein เดียวที่ส่วนปลายของ 3 ถูกจ้างเป็นแบบกรดนิวคลีอิกทำโพรบ ก้านเทอร์มินัลของโครงสร้างการวนรอบก้านถูกตัดให้สั้นลงเพื่อก่อให้เกิดการdestabilized/denatured conformation ซึ่งการย้อมงานติด segmental เคลื่อนท้องถิ่นการส่งเสริมและการกระบวนการ depolarization อย่างมีนัยสำคัญ เมื่อผูกเป้าหมาย การเปลี่ยนแปลงโครงสร้างของ aptamer เกิดจากการก่อตัวของโครงสร้างมั่นคงวงก้าน นำไปสู่การเคลื่อนไหวการย้อมและการเพิ่มขึ้นในสัญญาณ anisotropy fluorescence นี้ reasoned ใช้วิธีการตรวจวัดอะดีและ monophosphate อะดีแล้วการวิเคราะห์สารเคมี chiral อนุ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โพลาไรซ์เรืองแสงโดยตรง (FP) กลยุทธ์การทดสอบที่ทุ่มเทให้กับการตรวจจับโมเลกุลขนาดเล็กและอยู่
ในกลไกการเหนี่ยวนำให้เกิดผลผูกพันพอดีที่ไม่ซ้ำกันของการสิ้นสุดป้ายกรดนิวคลีอิก aptamers เพิ่งได้รับการ
พัฒนาโดยกลุ่มของเรา เป้าหมายขนาดเล็กผูกพันได้รับการแปลงประสบความสำเร็จในการเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญของ
การเรืองแสงสัญญาณ anisotropy ผลิตสันนิษฐานจากการลดลงของเสรีภาพในโปรโมชั่นในท้องถิ่น
ของสีย้อม เพื่อที่จะพูดคุยวิธีการที่มีเหตุผลวิธีการเซ็นเซอร์ FP ก่อตั้งขึ้นที่นี้
โดยความไม่แน่นอนในด้านวิศวกรรมโครงสร้างทุติยภูมิขององค์ประกอบการรับรู้ aptameric antiadenosine
aptamer ดีเอ็นเอโดดเด่นด้วยสีย้อม fluorescein เดียวใน 3 ของตนหรือไม่ ปลายได้รับการว่าจ้างให้เป็นรูปแบบ
การสอบสวนกรดนิวคลีอิกทำงาน ต้นกำเนิดของโครงสร้างขั้วก้านวงลงไปทำให้เกิด
destabilized / โครงสร้างเอทิลแอลกอฮอล์ซึ่งการส่งเสริมการเคลื่อนไหวปล้องท้องถิ่นของสีย้อมแล้ว
กระบวนการสลับขั้วอย่างมีนัยสำคัญ เมื่อเป้าหมายที่มีผลผูกพันการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างของ aptamer เหนี่ยวนำให้เกิด
การก่อตัวของโครงสร้างห่วงก้านที่มีเสถียรภาพที่นำไปสู่การลดลงของการเคลื่อนไหวสีย้อมและการเพิ่มขึ้น
ในสัญญาณ anisotropy เรืองแสง วิธีการให้เหตุผลนี้ถูกนำไปใช้ในการตรวจจับของอะดีโนซีน
โมโนฟอสเฟตและ adenosine และการวิเคราะห์ chiral ของพวกเขา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เรืองตรงโพลาไรเซชัน ( FP ) กลยุทธ์การทดสอบ โดยเฉพาะเพื่อใช้ในการตรวจจับโมเลกุลขนาดเล็กและไม่ซ้ำกันและผูก
พอดีจบว่ากลไกของกรดนิวคลีอิก ได้รับเมื่อเร็ว ๆนี้
พัฒนาโดยกลุ่มของเรา เป้าหมายเล็ก ๆผูกได้แปลงเป็นเพิ่มขึ้นอย่างมาก
เรืองแสง anisotropy สัญญาณผลิตสันนิษฐานโดยการลดลงของท้องถิ่นโบกไม้โบกมือเสรีภาพ
ของสีย้อม เพื่อหาแนวทางเหตุผล FP เซนเซอร์วิธีการก่อตั้งขึ้นในที่นี้
โดยวิศวกรรมความไม่แน่นอนในโครงสร้างของการรับรู้ aptameric องค์ประกอบ การ antiadenosine
ดีเอ็นเอ aptamer labelled ด้วยเดี่ยวสีที่ส่วนปลายของ  ี่ 3 ,ถูกนำมาใช้เป็นแบบจำลอง
หน้าที่กรดนิวคลีอิกด้วย ปลายก้านของลำต้นโครงสร้างวงถูกลดลง ทำให้เกิดโครงสร้างที่ส่งเสริม /
สูญสลายเกิดการเคลื่อนไหวกลุ่มท้องถิ่นของสีย้อม และกระบวนการเปลี่ยนขั้วสําคัญ

เมื่อเป้าหมายการเปลี่ยนแปลงโครงสร้างของ aptamer กระตุ้นการก่อตัวของก้านห่วง
มีโครงสร้างที่นำไปสู่การลดลงของการเคลื่อนไหวสีและเพิ่ม
ใน fluorescence anisotropy ของสัญญาณ นี้เหตุผลแบบที่ใช้กับสัมผัสของอะดีโนซีนโมโนฟอสเฟต adenosine และ
และการวิเคราะห์ 1 .