2. Materials and methods2.1. Plant

2. Materials and methods

2.1. Plant material
Plantlets were harvested from the laboratory of South Sub-tropical Crops Research Institute,
Chinese Academy of TropicalAgriculture Sciences,
originated through shoot proliferation fromsuckers (20–30 cm) of H.11648.
Most of the leaves of the plantletswere removed,
and only a columnar shoot tip (cut into 3–8 mmsegment) and 5–8 mm basal end of immature leaves were used asthe explants.


2.2. Basal medium and culture conditions
Murashige and Skoog (MS) (Murashige and Skoog, 1962) and SH(Gamborg et al., 1968) (300 mg l−1ammonium nitrate,

2267 mg l−1potassium nitrate,
353 mg l−1potassium dihydrogen phosphate,
3 mg l−1glycine, 1.0 mg l−1B1, 1.0 mg l−1B6,
1.0 mg l−1niacin,
200 mg l−1inositol) basal media containing 0.8% Gelrite (KI01-3A,JingFei) and 30 g l−1sucrose were used for callus formation andadventitious shoots regeneration,
respectively.

In all of the experi-ments,
several plant growth regulator combinations were used.
The pH of the media was adjusted to 5.8 prior to autoclaving at 121◦Cand 1.1 kg cm−2for 20 min.
The cultures were incubated at 26 ± 2◦Cwith a 12 h photoperiod under 2000 lux light intensity provided bycool-white fluorescent tubes.

2.3. Callus induction
The shoot tip (3–8 mm) and basal end of immature leaf(5–8 mm) explants from three to four-month-old plantlets werecultured on sterile MS medium (0.8% Gelrite and 30 g l−1sucrose)
containing 6-benzyladenine (BA; 0.2–3.0 mg l−1) and2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D; 0.1–2.0 mg l−1)
or -naphthalene acetic acid (NAA; 0.1–1 mg l−1) for callus induction. Allcultures were maintained in glass jars (60 mm × 90 mm) containing30 ml medium.

Four explants were cultured per jar,
and each treat-ment contained twenty explants.
Every experiment was repeatedthree times.
During the first few weeks,
the cultures were incu-bated in the dark until callus was induced.
The calli induced fromthe explants were then sub-cultured onto the same medium every 4weeks.
Each callus was divided into 4–6 mm diameter pieces duringthe transfer and subcultured up to two to three times.

2.4. Plantregeneration from callus cultures
The calli subcultured on MS medium for 8–12 weeks was usedfor inducing adventitious shoots.
Callus pieces (4–6 mm) were firsttransferred to SH medium supplemented with different concen-trations
of 6-benzyladenine (BA; 1.0–5.0 mg l−1) in combination with -naphthalene acetic acid (NAA; 0.1–1.0 mg l−1)
and indole-3-butyric acid (IBA; 0.1–1.0 mg l−1).
Based on the first results,
threeBA concentrations (2 mg l−1, 3 mg l−1and 5 mg l−1) in combinationwith 0.1 mg l−1NAA and 0.1 mg l−1IBA were tested.
Shoot induc-tion was evaluated and expressed as the shooting frequency andnumber of shoots per callus after 8 weeks. Four calli were culturedper jar (containing 30 ml medium),
and each treatment contained20 calli.
Every experiment was repeated three times.

2.5. Rooting and acclimatization
The shoots generated from SH media containing 3.0 mg l−1BA in combination with 0.1 mg l−1IBA and 0.1 mg l−1NAA were used for the rooting experiment.
Regenerated shoots measur-ing approximately 5–8 cm in length were transferred to rootingmedium,
which consisted of MS medium supplemented with different concentrations of indole-3-butyric acid (IBA; 0–5 mg l−1)
or -naphthalene acetic acid (NAA; 0–5 mg l−1) alone.
After 4 weeks,
rooting was evaluated and expressed as the rooting frequency,
rootnumber and the root length per shoot.
Four shoots were culturedper jar (containing 35 ml medium),
each treatment contained 20explants,
which were maintained in five replicate jars,
and eachexperiment was repeated three times.
The cultures were incubatedat 26 ± 2◦C with a 12 h photoperiod under 2000 lux light intensityprovided by cool-white fluorescent tubes.
The rooted plantlets were transferred to garden soil mixed withsand and soil (1:1) in a shade shelter (approximately 75% shade)under natural conditions (26 ± 3◦C) with a 12 h photoperiod.
The soil was treated with 1000 mg l−1antracol (PD20050192) one daybefore transfer.
The plants with 6–8 pieces of leaves were trans-ferred to the field.

2.6. Statistical analysis
The treatments were arranged in a completely randomizeddesign (CRD) (callus induction and rooting)
and an orthogonalexperimental design (plant regeneration).
All experiments wererepeated three times,
and each treatment contained twentyexplants.
The data were subjected to analysis of variance (ANOVA),
and a significance comparison among the means was performedusing Duncan’s multiple-range test; a P value of less than 0.05 wasconsidered significant.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. พืชวัสดุPlantlets ถูกเก็บเกี่ยวจากห้องปฏิบัติการของใต้เขตร้อนย่อยพืช สถาบันวิจัย ศาสตร์สถาบันจีน TropicalAgriculture เริ่มต้น โดยถ่ายภาพขยาย fromsuckers (20 – 30 เซนติเมตร) ของ H.11648 ส่วนใหญ่ของ plantletswere เอา ใบไม้ และใช้เฉพาะแนะนำยิงเรียงเป็นแนวตั้ง (ตัดเป็น mmsegment 3-8) และสิ้นสุดโรค 5-8 มม.ของใบไม้ immature เป็น explants ใบ2.2. โรคสภาพปานกลางและวัฒนธรรมMurashige และ Skoog (MS) (Murashige และ Skoog, 1962) และดี (Gamborg et al., 1968) (300 mg l−1ammonium ไนเตรต 2267 มิลลิกรัม l−1potassium ไนเตรต 353 mg l−1potassium ไดไฮโดรเจนฟอสเฟตl−1glycine 3 มิลลิกรัม l−1B1 มิลลิกรัม 1.0, 1.0 มิลลิกรัม l−1B6 l−1niacin 1.0 มิลลิกรัม200 mg l−1inositol) โรคสื่อประกอบด้วย 0.8% Gelrite (KI01 3A, JingFei) และ l−1sucrose 30 g ใช้สำหรับให้ผู้แต่ง andadventitious ถ่ายภาพฟื้นฟู ตามลำดับ ใน experi-ments มีใช้ชุดควบคุมการเจริญเติบโตพืชหลาย ปรับ pH ของสื่อถูก 5.8 ก่อน autoclaving ที่ cm−2for 121◦Cand 1.1 กิโลกรัม 20 นาที วัฒนธรรมถูก incubated ที่ 26 ± 2◦Cwith ชั่วโมง h 12 ต่ำกว่า 2000 ลักซ์ความเข้มแสงให้หลอดเรืองแสงขาว bycool2.3. ให้เหนี่ยวนำแนะนำยิง (3 – 8 mm) และโรคสิ้น explants ใบ immature (5 – 8 มิลลิเมตร) ที่ 3 อายุ 4 เดือน plantlets werecultured บนกอซ MS ปานกลาง (0.8% Gelrite และ 30 g l−1sucrose) ประกอบด้วย 6 benzyladenine (BA; 0.2-3.0 มิลลิกรัม l−1) and2 กรด 4-dichlorophenoxyacetic (2, 4-D; 0.1-2.0 mg l−1) หรือ - แนฟทาลีนกรดอะซิติก (NAA; 0.1-1 mg l−1) สำหรับการเหนี่ยวนำให้ Allcultures ถูกจัดเก็บอยู่ในสื่อมลแก้วขวด (60 มม. × 90 mm) containing30 Explants สี่มีอ่างต่อขวด และแต่ละปฏิบัติติดขัดอยู่ explants ยี่สิบ การทดลองทุกครั้ง repeatedthree ได้ ในช่วงสองสามสัปดาห์แรก วัฒนธรรมมี bated incu ในมืดจนกว่าจะมีเกิดแคลลัส Calli เกิดจาก explants ถูกแล้วย่อย cultured บนสื่อเดียวทุก 4 อาทิตย์ ให้แต่ละถูกแบ่งออกเป็น 4 – 6 มม.เส้นผ่าศูนย์กลางชิ้น duringthe โอน และ subcultured ขึ้นไปสองถึงสามครั้ง2.4. Plantregeneration จากวัฒนธรรมให้Calli subcultured บน MS กลาง 8 – 12 สัปดาห์ถูก usedfor inducing adventitious หน่อ ชิ้นส่วนแคลลัส (4 – 6 มิลลิเมตร) ได้ firsttransferred ปานกลางดีเสริม ด้วยแตกต่างกัน concen-trations ของ 6-benzyladenine (BA; l−1 1.0-5.0 มิลลิกรัม) ร่วมกับ - กรดอะซิติกแนฟทาลีน (NAA; 0.1-1.0 มิลลิกรัม l−1) และกรดอินโดล-3-butyric (อิบา 0.1-1.0 มิลลิกรัม l−1) ตามผลลัพธ์แรก threeBA ความเข้มข้น (2 mg l−1, l−1 3 mg l−1and 5 mg) ใน combinationwith มิลลิกรัม 0.1 0.1 มิลลิกรัมและ l−1NAA l−1IBA ถูกทดสอบ ยิง induc สเตรชันประเมิน และแสดงเป็น andnumber ความถี่ในการถ่ายภาพของถ่ายภาพต่อให้หลังจาก 8 สัปดาห์ Calli สี่ถูกขวด culturedper (ประกอบด้วย 30 ml กลาง), และแต่ละ calli contained20 รักษา ทุกการทดลองถูกซ้ำสามครั้ง2.5. rooting acclimatization และถ่ายภาพที่สร้างขึ้นจากสื่อดีประกอบด้วย l−1BA 3.0 มิลลิกรัมร่วมกับ l−1IBA มิลลิกรัม 0.1 0.1 มิลลิกรัม l−1NAA ถูกใช้สำหรับการทดลอง rooting สร้างยอด measur กำลังประมาณ 5 – 8 ซม.ความยาวถูกโอนย้ายไป rootingmedium ซึ่งประกอบด้วยสื่อ MS เสริม ด้วยความเข้มข้นแตกต่างกันของกรดอินโดล-3-butyric (อิบา 0 – 5 mg l−1) หรือ - กรดอะซิติกแนฟทาลีน (NAA; 0 – 5 mg l−1) เพียงอย่างเดียว หลังจาก 4 สัปดาห์rooting ประเมิน และแสดงเป็นความถี่ rooting rootnumber และความยาวรากต่อยิง 4 ถ่ายภาพได้ culturedper ขวด (มี 35 ml กลาง), ละรักษาอยู่ 20explants ซึ่งถูกเก็บรักษาไว้ในขวด replicate ห้า และ eachexperiment ถูกซ้ำสามครั้ง วัฒนธรรม 2◦C ± incubatedat 26 มีช่วงแสง 12 h เป็นภายใต้ intensityprovided แสง 2000 ลักซ์โดยหลอดเรืองแสงสีขาวเย็นได้Rooted plantlets ได้โอนย้ายไปสวนดินผสมดิน (1:1) ในที่ร่มกำบัง (ประมาณ 75% เงา) ภายใต้เงื่อนไขธรรมชาติ (26 ± 3◦C) และ withsand กับมีช่วงแสง 12 h ดินได้รับ 1000 มิลลิกรัม l−1antracol โอน daybefore หนึ่ง (PD20050192) พืช มี 6-8 ชิ้นของใบ ferred ธุรกรรมในฟิลด์ได้2.6. สถิติวิเคราะห์การรักษาถูกจัดเป็นสมบูรณ์ randomizeddesign (CRD) (การเหนี่ยวนำแคลลัสและ rooting) และแบบ orthogonalexperimental (พืชฟื้นฟู) ทั้งหมดทดลอง wererepeated สามครั้ง และแต่ละ twentyexplants รักษาอยู่ ข้อมูลถูกต้องวิเคราะห์ผลต่างของ (การวิเคราะห์ความแปรปรวน),และการเปรียบเทียบความสำคัญระหว่างวิธีการ performedusing ดันแคนหลายช่วงทดสอบ ค่า P น้อยกว่า 0.05 wasconsidered ที่สำคัญ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ2.1 วัสดุปลูกต้นกล้าที่ได้จากการเก็บเกี่ยวในห้องปฏิบัติการของภาคใต้ของพืชเขตร้อนอนุกรรมการสถาบันวิจัยจีน Academy of Sciences TropicalAgriculture, ต้นกำเนิดผ่านการงอกยิง fromsuckers (20-30 เซนติเมตร) H.11648. ส่วนใหญ่ของใบของ plantletswere ลบออกและมีเพียง ปลายยอดเสา (หั่นเป็น 3-8 mmsegment) และ 5-8 มมปลายฐานของใบอ่อนถูกนำมาใช้ asthe ชิ้น. 2.2 สื่อพื้นฐานและวัฒนธรรมเงื่อนไขอาหารสูตร Murashige และ Skoog (MS) (อาหารสูตร Murashige และ Skoog, 1962) และ SH (Gamborg et al., 1968) (300 มไนเตรต L-1ammonium, 2267 มิลลิกรัมไนเตรต L-1potassium, 353 มิลลิกรัมต่อลิตร 1potassium ไดไฮโดรเจนฟอสเฟต , 3 มิลลิกรัมต่อลิตร 1glycine 1.0 มิลลิกรัมต่อลิตร-1B1, 1.0 มิลลิกรัมต่อลิตร-1B6, 1.0 มิลลิกรัมต่อลิตร 1niacin, 200 มิลลิกรัมต่อลิตร 1inositol) สื่อพื้นฐานที่มี 0.8% Gelrite (KI01-3A, JingFei) และ 30 GL-1sucrose อยู่ ที่ใช้สำหรับการสร้างแคลลัส andadventitious ยิงฟื้นฟูตามลำดับ. ในทุกประสบ-ments, เจริญเติบโตของพืชหลายชุดที่ควบคุมการถูกนำมาใช้. ค่า pH ของสื่อที่มีการปรับเป็น 5.8 ก่อนที่จะนึ่งฆ่าเชื้อที่121◦Cand 1.1 กิโลกรัมเซนติเมตร 2for 20 นาทีวัฒนธรรมที่ได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ 26 ±2◦Cwithแสง 12 ชั่วโมงภายใต้ 2,000 ลักซ์ความเข้มของแสงให้เรืองแสง bycool ขาวหลอด. 2.3 แคลลัสเหนี่ยวนำปลายยอด (3-8 มิลลิเมตร) และสิ้นสุดฐานของใบที่ยังไม่บรรลุนิติภาวะ (5-8 มิลลิเมตร) ชิ้นส่วนจากสามถึงสี่ต้นเดือนเก่า werecultured บนอาหารสูตร MS หมัน (0.8% Gelrite และ 30 GL-1sucrose) มี 6 -benzyladenine (BA; 0.2-3.0 มิลลิกรัม L-1) and2,4-dichlorophenoxyacetic กรด (2,4-D; 0.1-2.0 มิลลิกรัม L-1) หรือกรดอะซิติก -naphthalene (NAA; 0.1-1 มิลลิกรัม L-1) การชักนำแคลลัส Allcultures ถูกเก็บรักษาไว้ในขวดแก้ว (60 มิลลิเมตร× 90 มิลลิเมตร) containing30 มลกลาง. สี่ชิ้นถูกนำมาเลี้ยงต่อขวด, และแต่ละรักษา-ment มียี่สิบชิ้น. ทดลองทุกครั้งที่ได้รับการ repeatedthree. ในช่วงสองสามสัปดาห์แรกวัฒนธรรมเป็น incu- ซึ้งน้อยลงในที่มืดจนถูกชักนำแคลลัส. แคลลัสชักนำ fromthe ชิ้นได้แล้วย่อยที่เพาะเลี้ยงบนกลางเหมือนกันทุก 4 อาทิตย์. แต่ละแคลลัสได้ถูกแบ่งออกเป็น 4-6 มิลลิเมตรเส้นผ่าศูนย์กลางชิ้นระหว่างการถ่ายโอนและเชื้อได้ถึง 2-3 ครั้ง. 2.4 Plantregeneration จากวัฒนธรรมแคลลัส. แคลลัสเชื้อบนอาหารสูตร MS 8-12 สัปดาห์ที่ได้รับการกระตุ้นให้เกิดการ usedfor หน่อบังเอิญชิ้นแคลลัส (4-6 มิลลิเมตร) ถูก firsttransferred เพื่อ SH เสริมกลางที่มีแตกต่างกันมุ่งเน้นให้ trations- 6-benzyladenine (BA; 1.0-5.0 มก. L-1) ร่วมกับกรดอะซิติก -naphthalene (NAA; 0.1-1.0 มิลลิกรัม L-1) และ indole-3-butyric กรด (IBA; 0.1-1.0 มิลลิกรัม L-1). จากผลครั้งแรกที่ความเข้มข้น threeBA (2 มิลลิกรัมต่อลิตร-1, 3 มก. L-1 และ 5 มิลลิกรัมต่อลิตร-1) ใน combinationwith 0.1 มิลลิกรัมต่อลิตร 1NAA และ 0.1 มิลลิกรัมต่อลิตร 1IBA ได้มีการทดสอบ. ยิง INDUC-การได้รับการประเมินและแสดงเป็นความถี่ยิง andnumber ของหน่อต่อ แคลลัสหลังจาก 8 สัปดาห์ สี่แคลลัสมีโถ culturedper (ที่มีขนาด 30 ml ขนาดกลาง), และการรักษาแต่ละ contained20 แคลลัส. ทุกทดลองซ้ำสามครั้ง. 2.5 รากและเคยชินกับสภาพหน่อที่เกิดจากสื่อ SH ที่มี 3.0 มิลลิกรัมต่อลิตร 1BA ร่วมกับ 0.1 มิลลิกรัมต่อลิตร 1IBA และ 0.1 มิลลิกรัมต่อลิตร 1NAA กับที่ใช้ในการทดลองราก. Regenerated ยิงมาตรการไอเอ็นจีประมาณ 5-8 เซนติเมตรยาวถูกย้าย เพื่อ rootingmedium, ซึ่งประกอบด้วย MS สื่อเสริมที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันของ indole-3-butyric กรด (IBA; 0-5 มิลลิกรัม L-1) หรือกรดอะซิติก -naphthalene (NAA; 0-5 มิลลิกรัม L-1). คนเดียวหลังจากที่ 4 สัปดาห์ที่ผ่านมาขจัดถูกประเมินและแสดงความเป็นความถี่ราก, rootnumber และความยาวรากต่อยิง. สี่หน่อเป็น culturedper ขวด (ที่มี 35 มล. ขนาดกลาง), การรักษาแต่ละที่มี 20explants, ซึ่งถูกเก็บรักษาในห้าขวดซ้ำ, และ eachexperiment ซ้ำสาม . ครั้งวัฒนธรรมเป็น incubatedat 26 ±2◦Cกับแสง 12 ชั่วโมงภายใต้แสง 2,000 ลักซ์ intensityprovided โดยหลอดเรืองแสงเย็นสีขาว. รากต้นกล้าที่ได้โอนไปยังสวนดินผสม withsand และดิน (1: 1) ในที่กำบังร่มเงา ( ร่มเงาประมาณ 75%) ภายใต้สภาพธรรมชาติ (26 ±3◦C) กับช่วงแสง 12 ชั่วโมง. ดินได้รับการรักษาด้วย 1000 mg L-1antracol (PD20050192) หนึ่งวันก่อนการโอน. พืชที่มี 6-8 ชิ้นส่วนของใบมีทรานส์ ferred ไปที่สนาม. 2.6 การวิเคราะห์สถิติการรักษาที่ถูกจัดให้อยู่ใน randomizeddesign สมบูรณ์ (CRD) (เหนี่ยวนำแคลลัสและราก) และการออกแบบ orthogonalexperimental (การฟื้นฟูพืช). การทดสอบทั้งหมด wererepeated สามครั้งและการรักษาแต่ละที่มี twentyexplants. ข้อมูลที่ถูกยัดเยียดให้การวิเคราะห์ความแปรปรวน (ANOVA ) และการเปรียบเทียบอย่างมีนัยสำคัญในหมู่หมายถึงเป็น performedusing ดันแคนทดสอบหลายช่วง; ค่า P น้อยกว่า 0.05 wasconsidered อย่างมีนัยสำคัญ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ

2.1 . ต้นพืชวัสดุ
เก็บจากห้องปฏิบัติการของสถาบันวิจัยพืชเขตร้อนย่อยใต้ , จีน Academy of Sciences

ที่มาผ่าน tropicalagriculture , การยิง fromsuckers ( 20 – 30 ซม. ) ของ h.11648 .
ที่สุดของใบของ plantletswere ลบออก
เพียงมียอด ( ตัดเป็น 3 – 8 mmsegment ) และ 5 – 8 มม. ปลายใบฐานอ่อนใช้เป็นอาหาร


. . พื้นฐานวัฒนธรรมอาหารขนาดกลางและเงื่อนไข
and Skoog ( MS ) ( อาหารสูตร Murashige and Skoog , 1962 ) และ SH ( Gamborg et al . , 1968 ) ( 300 mg L − 1ammonium ไนเตรต

ที่สุด mg L − 1potassium ไนเตรต
353 mg L − 1potassium dihydrogen ฟอสเฟต ,
3 mg L − 1glycine 1.0 มิลลิกรัม ผม 1b1 − 10 มิลลิกรัมต่อลิตร 1b6 −− 1niacin , 1.0 mg L

L − , 200 มิลลิกรัม 1inositol ) สื่อพื้นฐานที่ 0.8% gelrite ( ki01-3a jingfei , ) และ 30 กรัมต่อลิตร บริษัท เวสเทิร์น 1sucrose นำมาแคลลัสเกิด andadventitious ยอดงอก ,
)

ในทั้งหมดของประสบการ ments
หลาย , ควบคุมการเจริญเติบโตพืชผสม สถิติที่ใช้
pH ของสื่อมีการปรับดีขึ้นก่อนอัตราส่วนโฟกัสที่ 121 ◦และ 1.1 กก. cm − 2 เพราะ
20 นาทีวัฒนธรรมที่อุณหภูมิ 26 ± 2 ◦ cwith 12 H ภายใต้ความเข้มแสงลักซ์แสง 2000 ให้ bycool สีขาวหลอด fluorescent .

2.3 การชักนำแคลลัส
ยอด ( 3 - 8 มม. ) และสิ้นสุด ( ใบอ่อน ( 5 - 8 มม. ) อาหารจากสามถึงสี่เดือนเก่าต้นหมัน werecultured บน MS ( gelrite 0.8% และ 30 g L − 1sucrose ที่มี 6-benzyladenine ( BA )
; 0.2 – 3.0 mg L − 1 ) 2 ,4-dichlorophenoxyacetic acid ( 2 , 4-D 0.1 - 2.0 มิลลิกรัมต่อลิตร ; − 1 )
- แมนดารินหรือกรดน้ำส้ม ( NAA 0.1 มิลลิกรัมต่อลิตร ( ; 1 − 1 ) ชักนำ . allcultures ถูกเก็บรักษาไว้ในขวดแก้ว ( × 60 มม. 90 มม. ) containing30 มล. อาหาร

4 เนื้อเยื่อเพาะเลี้ยงต่อขวด
และแต่ละรักษา ment ที่มีอยู่ 20 อาหาร .
ทุกการทดลอง repeatedthree ครั้ง

ในช่วงสองสามสัปดาห์แรกวัฒนธรรมเป็น incu ลดในที่มืดจนถูกชักนำแคลลัส . การเพาะเลี้ยงแคลลัสจาก
แล้วซบลงบนกลางเลี้ยงเหมือนกันทุกๆ 4weeks .
แต่ละแคลลัสได้แบ่งออกเป็น 4 – 6 มม. เส้นผ่าศูนย์กลางชิ้นในการโอนและ subcultured ถึงสองถึงสามครั้ง . . . .

2.4 . วัฒนธรรม
เพาะเลี้ยงแคลลัสแคลลัสบนอาหารสูตร MS ที่ subcultured 8 – 12 สัปดาห์พบว่ากระตุ้นยอดปากดี .
ชิ้นส่วนแคลลัส ( 4 – 6 มม. ) firsttransferred ไป SH เติมแตกต่างกัน concen trations
ของ 6-benzyladenine ( b ; 1.0 – 5.0 mg L − 1 ) ผสมกับกรด - แนพทาลีน ( NAA 0.1 และ 1.0 mg ; และ L − 1 )
Increase ( IBA ) ; 0.1 1.0 mg L − 1 ) .

ขึ้นอยู่กับผลแรกthreeba ความเข้มข้น ( 2 mg L − 1 , − 3 มิลลิกรัมต่อลิตรและ 5 มิลลิกรัมต่อลิตรร่วมกับ− 1 ) 0.1 mg L และ L −− 1naa 0.1 มิลลิกรัม 1iba ถูกทดสอบ
ยิง induc tion และการประเมินผลแสดงเป็นยิงยอดต่อแคลลัสของความถี่ andnumber หลังจาก 8 สัปดาห์ 4 ขวด ( culturedper แคลลัสที่มีขนาดกลาง ) 30 ml
และแต่ละการรักษา contained20 เปอร์เซ็นต์ .
ทุกครั้งที่ทำการทดลองซ้ำ 3 ครั้ง

2.5รากและใซ้
หน่อที่เกิดจากสื่อที่มี 3.0 มิลลิกรัมต่อลิตร SH − 1ba ร่วมกับ 0.1 mg / L −− 1iba และ 0.1 มก. 1naa ถูกใช้เพื่อสนับสนุนการทดลอง
7 มาตรการ สำหรับยอดประมาณ 5 – 8 ซม. ยาวถูกย้าย rootingmedium
, ซึ่งประกอบด้วยอาหารสูตร MS ที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันของ Increase ( IBA ; 0 – 5 mg L − 1 )
หรือกรดแนฟทาลีน ( NAA 0 – 5 mg L − 1 ) คนเดียว

หลังจาก 4 สัปดาห์ รากและการประเมินผลแสดงเป็นรากความถี่
rootnumber และความยาวราก / หน่อ
สี่ยอด culturedper จาร์ ( ที่มีขนาดกลาง 35 ml )

20explants รักษาแต่ละที่มีอยู่ , ซึ่งถูกเก็บรักษาไว้ในห้าเลียนแบบขวด
eachexperiment และทำซ้ำ 3 ครั้ง
วัฒนธรรมเป็น 26 incubatedat ± 2 ◦ C 12 ชั่วโมงภายใต้แสงลักซ์แสง 2000 intensityprovided โดยเย็นหลอดเรืองแสงสีขาว รากต้น
ถูกย้ายไปยังสวน ดินผสม ดิน withsand ( 1 : 1 ) ในร่มเงาพักพิง ( ประมาณ 75% เฉด ) ภายใต้เงื่อนไขของธรรมชาติ ( 26 ± 3 ◦ C ) กับแสงเป็น 12 ชั่วโมง .
ดินที่ถูกปฏิบัติด้วย 1000 mg L − 1antracol ( pd20050192 ) โอน daybefore .
พืชกับ 6 – 8 ชิ้นส่วนของใบทราน ferred ไปยังสนาม

2.6 การวิเคราะห์ทางสถิติ
วิธีจัด randomizeddesign สมบูรณ์ ( CRD ) ( ชักนำและขจัด )
และการออกแบบ orthogonalexperimental ( สร้างโรงงาน )

wererepeated การทดลองทั้งหมด 3 ครั้งและการรักษาแต่ละที่มีอยู่ twentyexplants .
ข้อมูลได้รับการวิเคราะห์ความแปรปรวน ( ANOVA ) และการเปรียบเทียบระหว่าง
) วิธีการคือการทดสอบหลายช่วง performedusing ดันแคน ; ค่า P น้อยกว่า 0.05
ตัวอย่างมีนัยสำคัญ