Protoporphyrinogen oxidase (Protox)

Protoporphyrinogen oxidase (Protox) is the last common enzyme in the biosynthesis of chlorophylls and heme. In plants, there are two isoenzymes of Protox, one located in plastids and other in the mitochondria. We cloned the cDNA of spinach (Spinacia oleracea) plastidal Protox and purified plastidal Protox protein from spinach chloroplasts. Sequence analysis of the cDNA indicated that the plastid Protox of spinach is composed of 562 amino acids containing the glycine-rich motif GxGxxG previously proposed to be a dinucleotide binding site of many flavin-containing proteins. The cDNA of plastidal Protox complemented a Protox mutation inEscherichia coli. N-terminal sequence analysis of the purified enzyme revealed that the plastidal Protox precursor is processed at the N-terminal site of serine-49. The predicted transit peptide (methionine-1 to cysteine-48) was sufficient for the transport of precursors into the plastid because green fluorescent protein fused with the predicted transit peptide was transported to the chloroplast. Immunocytochemical analysis using electron microscopy showed that plastidal Protox is preferentially associated with the stromal side of the thylakoid membrane, and a small portion of the enzyme is located on the stromal side of the chloroplast inner envelope membrane.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Protoporphyrinogen oxidase (Protox) เป็นเอนไซม์ทั่วไปล่าสุดในการสังเคราะห์ heme และ chlorophylls ในพืช มี isoenzymes สองของ Protox หนึ่งใน plastids และอื่น ๆ ใน mitochondria เรา cloned cDNA ของผักโขม (ตื่นสาย Spinacia) plastidal Protox และโปรตีนบริสุทธิ์ plastidal Protox จากผักโขม chloroplasts การวิเคราะห์ของ cDNA ที่ระบุว่า พลาสติด Protox ผักขมประกอบด้วยกรดอะมิโน 562 ประกอบด้วยแปลน glycine-ริช GxGxxG ก่อนหน้านี้เสนอให้ ไซต์ผูก dinucleotide ของโปรตีน flavin ประกอบด้วยหลาย CDNA ของ plastidal Protox ตู้ตัว Protox กลายพันธุ์ inEscherichia coli N-เทอร์มินัลการวิเคราะห์ของเอนไซม์บริสุทธิ์เปิดเผยว่า สารตั้งต้น Protox plastidal ประมวลผลที่เว็บไซต์ N-เทอร์มินัลของแถ-49 เพปไทด์ส่งต่อคาดการณ์ (methionine-1 cysteine 48) ก็เพียงพอสำหรับการขนส่งของ precursors เป็นพลาสติดได้เนื่องจากโปรตีนเรืองแสงสีเขียวพร้อมเพปไทด์ส่งต่อคาดการณ์ถูกขนส่งไปในคลอโรพลาสต์ Immunocytochemical วิเคราะห์ใช้ microscopy อิเล็กตรอนพบว่า plastidal Protox สัมพันธ์โน้ตกับอันเมมเบรนของ thylakoid stromal และส่วนหนึ่งของเอนไซม์นี้จะอยู่ด้านของเมมเบรนซองจดหมายภายในคลอโรพลาสต์ stromal

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

oxidase Protoporphyrinogen (Protox) เป็นเอนไซม์ที่พบบ่อยสุดท้ายในการสังเคราะห์ของคลอโรฟิและ heme ในพืชมีสอง isoenzymes ของ Protox หนึ่งตั้งอยู่ในพลาและอื่น ๆ ใน mitochondria เราโคลน cDNA ของผักขม (Spinacia oleracea) plastidal Protox และ plastidal บริสุทธิ์โปรตีน Protox จากคลอโรพลาผักขม การวิเคราะห์ลำดับของยีนชี้ให้เห็นว่าพลาส Protox ของผักขมประกอบด้วย 562 กรดอะมิโนที่มีบรรทัดฐานไกลซีนที่อุดมด้วย GxGxxG ก่อนหน้านี้ที่นำเสนอจะเป็น dinucleotide เว็บไซต์ผูกพันของเอนไซม์ที่มีหลายโปรตีน cDNA ของ plastidal Protox ครบครันกลายพันธุ์ Protox coli inEscherichia การวิเคราะห์ลำดับ n- ขั้วของเอนไซม์พบว่าสารตั้งต้น plastidal Protox มีการประมวลผลที่เว็บไซต์ n- ขั้วของซีรีน-49 เปปไทด์ที่คาดการณ์การขนส่ง (methionine-1 ถึง cysteine​​-48) ก็เพียงพอสำหรับการขนส่งสารตั้งต้นที่เป็นพลาสเพราะโปรตีนเรืองแสงสีเขียวผสมกับเปปไทด์การขนส่งที่คาดการณ์ถูกส่งไป chloroplast การวิเคราะห์ Immunocytochemical โดยใช้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนพบว่า plastidal Protox มีความสัมพันธ์พิเศษกับด้าน stromal ของเมมเบรน thylakoid และส่วนเล็ก ๆ ของเอนไซม์ที่ตั้งอยู่บนฝั่ง stromal ของเมมเบรนซองจดหมายภายในคลอโรพลา

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

protoporphyrinogen oxidase ( โปรท๊อกซ์ ) เป็นเอนไซม์ที่พบล่าสุดในการสังเคราะห์คลอโรฟิลล์ และท่าน ในพืช มี สอง ของ ของ โปรท๊อกซ์ หนึ่งอยู่ในพลาสติด และอื่น ๆ ใน mitochondria . วิธีที่เราสามารถของผักโขม ( spinacia oleracea ) และโปรท๊อก plastidal โปรตีนโปรท๊อก plastidal จากคลอโรพลาสต์ผักขมการวิเคราะห์ลำดับของยีน พบว่าโปรท๊อกซ์พลาสติดของผักโขมประกอบด้วยกรดอะมิโนไกลซีน รวยแต่ที่มีแม่ลาย gxgxxg ก่อนหน้านี้เสนอเป็นไดนิวคลีโอไทด์มัดเว็บไซต์ของหลาย ฟลาวิน ประกอบด้วยโปรตีน วิธีของ plastidal โปรท๊อกซ์ครบครันเป็นโปรท๊อกซ์ การกลายพันธุ์ inescherichia coliการวิเคราะห์ลำดับของกรดอะมิโนของเอนไซม์ พบว่า สารโปรท๊อก plastidal การประมวลผลที่เว็บไซต์ถูก serine-49 . คาดการณ์การขนส่งเปปไทด์ ( methionine-1 เพื่อ cysteine-48 ) ก็เพียงพอสำหรับการขนส่งสารตั้งต้นที่เป็นพลาสติด เพราะโปรตีนเรืองแสงสีเขียวผสมกับการคาดการณ์การขนส่งเปปไทด์ถูกเคลื่อนย้ายไปยังคลอ .การวิเคราะห์ immunocytochemical โดยใช้กล้องจุลทรรศน์อิเล็กตรอนชนิดส่องกราด พบว่า plastidal โปรท๊อก คือ preferentially เกี่ยวข้องกับด้าน stromal ของเยื่อไทลาคอยด์ และเป็นส่วนเล็ก ๆของเอนไซม์ตั้งอยู่บนฝั่ง stromal ของคลอภายในซองเยื่อ