2.3. Experimental procedure in primary cultures of rat
hepatocyte
Primary cultures of rat hepatocyte were prepared as previously described by Pramyothin et al. (2005). After 24 h of
culturing, hepatocytes were treated with ethanol (96l/ml) and
PA (1–4 mg/ml) for 2 h. After 2 h incubation, cell viability was
tested using MTT assay, AST and ALT release.
All experiments were performed at least three times using
different cell preparations.
2.4. Determination of cell viability in primary cultures of
rat hepatocyte
2.4.1. MTT assay
MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium
bromide] assay is based on the ability of viable cells to reduce
MTT from a yellow water-soluble dye to a dark blue insoluble formazan product (Mosmann, 1983). MTT was dissolved in
phosphate-buffered saline (PBS) at a concentration of 5 mg/ml
and added to the cell culture to the final concentration of
100l/ml. After 1 h, medium was removed and the remaining
MTT crystals were dissolved in 100l DMSO. Optical density
was assessed using a microplate reader at 570/620 nm.
2.3. Experimental procedure in primary cultures of rat
hepatocyte
Primary cultures of rat hepatocyte were prepared as previously described by Pramyothin et al. (2005). After 24 h of
culturing, hepatocytes were treated with ethanol (96l/ml) and
PA (1–4 mg/ml) for 2 h. After 2 h incubation, cell viability was
tested using MTT assay, AST and ALT release.
All experiments were performed at least three times using
different cell preparations.
2.4. Determination of cell viability in primary cultures of
rat hepatocyte
2.4.1. MTT assay
MTT [3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium
bromide] assay is based on the ability of viable cells to reduce
MTT from a yellow water-soluble dye to a dark blue insoluble formazan product (Mosmann, 1983). MTT was dissolved in
phosphate-buffered saline (PBS) at a concentration of 5 mg/ml
and added to the cell culture to the final concentration of
100l/ml. After 1 h, medium was removed and the remaining
MTT crystals were dissolved in 100l DMSO. Optical density
was assessed using a microplate reader at 570/620 nm.
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.3 ทดลองกระบวนการในวัฒนธรรมหลักของหนู
หลักวัฒนธรรมของตับตับหนูเตรียมไว้ก่อนหน้านี้ที่อธิบายโดย pramyothin et al . ( 2005 ) หลังจาก 24 ชั่วโมงของการเพาะเลี้ยงเซลล์ตับ
, รักษาด้วยเอทานอล ( 96 L / มิลลิลิตร ) และ
PA ( 1 ) 4 มก. / มล. ) 2 ชั่วโมงหลังจากการบ่มเซลล์เป็น 2 H ,
ทดสอบใช้ MTT assay AST และ ALT
, ปล่อยทุกการทดลอง คืออย่างน้อย 3 ครั้ง โดยการเตรียมเซลล์ต่าง ๆ
.
2.4 . การหาปริมาณเซลล์ในวัฒนธรรมหลักของตับ
หนูเครื่องมือกำจัดเพื่อย้าย . MTT assay
MTT [ 3 - ( 4,5-dimethylthiazol-2-yl ) - 2,5-diphenyltetrazolium
โบรไมด์ ] การทดสอบจะขึ้นอยู่กับความสามารถในการวางเซลล์ ลด
MTT จากสีเหลืองละลายน้ำย้อมเป็นสีน้ำเงินเข้มลงปฏิบัติการผลิตภัณฑ์ ( mosmann , 1983 )ยาละลายในน้ำเกลือ ( PBS )
ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ความเข้มข้น 5 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร
และเพิ่มเซลล์วัฒนธรรมจึงนาล ความเข้มข้นของ
100 L / มล. หลังจาก 1 ชั่วโมง กลางจะถูกลบออกและที่เหลือ
MTT ผลึกถูกละลายใน DMSO 100 ลิตร . ความหนาแน่นของแสงและการใช้พื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทย
อ่านที่ 570 / 620 นาโนเมตร
การแปล กรุณารอสักครู่..
